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摘要:本发明提供一种基于单分子免疫检测技术测定细胞外囊泡ITGB1的方法,涉及细胞外囊泡ITGB1的检测技术领域。该种基于单分子免疫检测技术测定细胞外囊泡ITGB1的方法,通过采用化学修饰的方法将羧基修饰到磁珠表面,磁珠活化后,与ITGB1捕获抗体发生偶联,形成稳定的共价键,组成检测抗体-磁珠复合物;以荧光微球作为ITGB1检测抗体的偶联载体,组成检测抗体-磁珠复合物,加入待测样本后,最终形成双抗体夹心复合物。进而通过单分子荧光免疫分析仪对形成的抗原抗体复合物进行逐个计数,进行定量分析,与现有技术相比,该方法灵敏度极高,尤其适合细胞外囊泡蛋白的痕量检测,特异性好,且检测快速高效、检测样本消耗量少,价格经济实惠,具有广泛推广的潜力。
主权项:1.一种基于单分子免疫检测技术测定细胞外囊泡ITGB1的方法,其特征在于,包括以下具体步骤:步骤一:采用超高速离心法提取血清细胞外囊泡;步骤二:配置磁珠偶联液,准备ITGB1捕获抗体并制备ITGB1捕获抗体磁珠复合物;步骤三:配置标记偶联液,制备ITGB1检测抗体微球复合物;步骤四:将ITGB1捕获抗体与血清细胞外囊泡结合;步骤五:洗涤,去除未结合的游离抗原;步骤六:将ITGB1检测抗体与结合有捕获抗体的细胞外囊泡结合;步骤七:洗涤,去除多余的未结合的检测抗体-荧光微球复合物;步骤八:重悬反应体系,加入微流控芯片中,置于单分子荧光免疫分析仪中,完成血清细胞外囊泡ITGB1的检测和结果分析。
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百度查询: 安徽省立医院(中国科学技术大学附属第一医院) 一种基于单分子免疫检测技术测定细胞外囊泡ITGB1的方法
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