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申请/专利权人：上海师范大学
摘要：一种栽培玉米籽粒冰冻切片的制备方法，包括：1选材和备样：选取不早于2DAP且不晚于24DAP的栽培玉米籽粒，去除籽粒外部母体组织后，用预冷的生理盐水冲洗，并擦干表面水分；2包埋：将籽粒放入包埋盒中，使近胚端朝下，包埋于预冷的OCT包埋胶中，随后将包埋盒置于干冰中慢冻至完全冻结，形成包埋块；3切片：放入切片机内，设置切片厚度为15μm～30μm，进行连续切片，直至看到包含完整细胞亚群的纵切面，并从此切片开始，连续快速切下多张目标切片；4制片：对目标切片进行修整，随后将切片转移到空间组学分析专用玻片上，得到用于玉米籽粒空间组学分析的切片。本发明有效避免组织较大冰晶的形成和富含淀粉组织的脱落，获得了完整的籽粒切片。
主权项：1.一种栽培玉米籽粒冰冻切片的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1选材和备样：选取不早于2DAP授粉后天数且不晚于24DAP的栽培玉米籽粒，去除籽粒外部母体组织后，用预冷的生理盐水冲洗，并擦干表面水分；2包埋：将步骤1中清洗并擦干后的籽粒放入包埋盒中，使近胚端朝下，包埋于预冷的OCT包埋胶中，其中OCT包埋胶的预冷温度为4℃，随后将包埋盒置于干冰中慢冻至完全冻结，形成包埋块；3切片：将包埋块样本放入预冷至-20℃的切片机内，设置切片厚度为15μm～30μm，调整刀片与样本固定头的位置保持平行，并调整刀锋与切面位置以切出包含样本所有细胞组织的最大纵切面，进行连续切片，在光学显微镜下观察细胞形态直至看到包含完整细胞亚群的纵切面，并从此切片开始，连续快速切下多张目标切片；4制片：对步骤3中获得的目标切片进行修整，随后将切片转移到空间组学分析专用玻片上，得到所述冰冻切片。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 上海师范大学 一种用于空间组学的栽培玉米籽粒冰冻切片方法
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