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一种促进骨骼生长的鹿茸血肽制剂的制备方法 

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申请/专利权人:吉林农业科技学院

摘要:本发明属于生物医药领域,涉及伤口敷料,具体涉及一种促进骨骼生长的鹿茸血肽制剂的制备方法,该方法利用酶解法和超滤手段在鹿茸血中获取鹿茸血肽,并将鹿茸血肽(DBP)负载于席夫碱反应生成的氧化海藻酸钠(OSA)氨基明胶(N‑Gel)可注射水凝胶(OSAN‑Gel)生物支架中,生成氧化海藻酸钠氨基明胶鹿茸血肽水凝胶(OSAN‑GelDBP),该水凝胶可促进骨骼生长,有利于大鼠临界骨缺损的修复。

主权项:1.一种促进骨骼生长的鹿茸血肽制剂的制备方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:步骤1.鹿茸血肽的制备将冻干后的鹿茸血粉以2%的浓度溶解在蒸馏水中,沸水浴10min,冷却后调节pH到7.2,温度设置为50℃,按12690Ug酶用量加入木瓜蛋白酶酶解60min后调节pH到7.5,温度设置为48℃,按5940Ug酶用量加入中性蛋白酶酶解300min,每60min调节一次pH到7.5,酶解过程中不断搅拌,结束后95℃水浴灭酶30min,快速冷却,酶解液4000rmin离心10min收集上清,采用超滤装置分离出2000Da的鹿茸血肽,冻干,将鹿茸血肽冻干粉以100mgmL浓度溶解在蒸馏水中,利用葡聚糖凝胶柱,上样量为1mL,流动相为蒸馏水纯化2000Da的鹿茸血肽,富集后冻干即为鹿茸血肽;步骤2.氧化海藻酸钠的制备利用高碘酸钠氧化海藻酸钠,制备氧化海藻酸钠;步骤3.氨基明胶的制备采用乙二胺对明胶改性,使明胶中部分羧基变为氨基,制备氨基明胶;步骤4.OSAN-GelDBP的制备用PBS溶液将氧化海藻酸钠配置成的溶液记为溶液一,用PBS溶液将氨基明胶配置成的溶液记为溶液二,按照3-6mgg将鹿茸血肽加入到溶液二中得到溶液三;将溶液一与溶液三混匀即为OSAN-GelDBP。

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