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一种高效成脂分化的脂肪干细胞及其制备方法 

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申请/专利权人:复旦大学;上海市东方医院(同济大学附属东方医院);上海赛傲生物技术有限公司

摘要:本发明属生物技术领域,涉及原代脂肪干细胞的分离,具体涉及一种高效成脂分化的脂肪干细胞及其制备方法,本发明使所述脂肪干细胞分化为成熟的脂肪细胞。本发明通过严格控制胶原酶的消化时间,最终得到高表达前脂肪干细胞相关基因的间充质细胞群,去除抑制脂肪细胞分化的血管相关细胞,从而使分离得到的细胞群具有90%以上的体外成脂分化能力。本发明能解决脂肪干细胞的体外成脂分化效率不高,导致难以在体外建立稳定的原代脂肪干细胞成脂分化方案,有望为肥胖相关的代谢性疾病的研究提供稳定的原代细胞。

主权项:1.高效成脂分化的脂肪干细胞,其特征在于,采用下述方法和步骤制备:1无菌获取雄性小鼠腹股沟脂肪组织;2使用PBS洗涤脂肪组织后,加入PBS剪碎;3再加入0.1%胶原酶消化液,40分钟后离心去除上层脂质和消化液,保留下层沉淀;4在沉淀中加入红细胞裂解液,打散细胞,离心去除上清,剩余沉淀加入培养基混匀,并转移至培养皿中进行原代P1培养;5细胞接触抑制后2天,定义为day0,加入诱导剂8天后获得成熟的脂肪细胞。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 复旦大学 上海市东方医院(同济大学附属东方医院) 上海赛傲生物技术有限公司 一种高效成脂分化的脂肪干细胞及其制备方法

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