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基于RPA-PAND的肠道病毒分型检测试剂盒和检测方法 

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申请/专利权人:湖北大学

摘要:本发明公开了基于RPA‑PAND的肠道病毒分型检测试剂盒和检测方法,其中检测试剂盒包括PfAgo蛋白以及用于特异性检测肠道病毒EV71型、CVA6型、CVA10型、CVA16型以及通用型EVU的gDNA和MB组合。本发明基于PfAgo蛋白介导靶标检测并结合RPA技术成功建立了分型检测常见肠道病毒A型病原EV71、CVA6、CVA10、CVA16以及肠道病毒通用型EVU的RPA‑HFMD‑PAND快速核酸检测方法,该方法具有高灵敏度、高特异性、成本低、位置靶向限制较低、反应体系简便、无气溶胶污染、能够进行多通道核酸检测的优势。本发明为HFMD的临床诊断和流行病学监测提供了新的试剂和途径。

主权项:1.一种肠道病毒分型检测试剂盒,其特征在于,包括PfAgo蛋白以及用于检测肠道病毒EV71型、CVA6型、CVA10型、CVA16型以及通用型EVU的gDNA、MB和RPA引物;其中,MB-EVU如SEQIDNO.2所示,EVU-g1、EVU-g2、EVU-g3如SEQIDNO.3~5所示;MB-EV71如SEQIDNO.7所示,EV71-g1、EV71-g2、EV71-g3如SEQIDNO.8~10所示;MB-CVA6如SEQIDNO.12所示,CVA6-g1、CVA6-g2、CVA6-g3如SEQIDNO.13~15所示;MB-CVA10如SEQIDNO.17所示,CVA10-g1、CVA10-g2、CVA10-g3如SEQIDNO.18~20所示;MB-CVA16如SEQIDNO.22所示,CVA16-g1、CVA16-g2、CVA16-g3如SEQIDNO.23~25所示;且RPA引物包括以下:序列如SEQIDNO.26和SEQIDNO.27所示的EVU-RPA-FR;序列如SEQIDNO.28和SEQIDNO.29所示的EV71-RPA-FR;序列如SEQIDNO.30和SEQIDNO.31所示的CVA6-RPA-FR;序列如SEQIDNO.32和SEQIDNO.33所示的CVA10-RPA-FR;序列如SEQIDNO.34和SEQIDNO.35所示的CVA16-RPA-FR。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 湖北大学 基于RPA-PAND的肠道病毒分型检测试剂盒和检测方法

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