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申请/专利权人：上海市第十人民医院
摘要：本发明公开了一种基于膨胀后正交自组装的外泌体原位成像分析方法，涉及生物医学光学成像技术领域。该外泌体原位成像分析方法包括以下步骤：提取得到外泌体，并将其粘附在载玻片上，得到外泌体爬片；将DBCO修饰的TriggerDNA链与叠氮修饰的CD63抗体反应，得到TriggerDNA链标记抗体；对该外泌体爬片依次实施渗透、聚合、孵育以及膨胀处理后，通过共聚焦拍摄，在光学显微镜下获取外泌体成像结果。该方法实现了4.7倍的扩展因子和～55nm的横向分辨率，解决了物理扩展过程中信号稀释的固有缺陷，提高信噪比，同时，可以显著提高信号输出，实现低丰度外泌体的异质性分析，在光学层面可以观察相应精细结构。
主权项：1.一种基于膨胀后正交自组装的外泌体原位成像分析方法，其特征在于，包括以下步骤：提取得到外泌体，并将其粘附在载玻片上，得到外泌体爬片；将DBCO修饰的TriggerDNA链与叠氮修饰的CD63抗体反应，得到TriggerDNA链标记抗体；对所述外泌体爬片依次实施渗透、聚合、孵育以及膨胀处理后，通过共聚焦拍摄，在光学显微镜下获取外泌体成像结果；所述渗透是指将所述外泌体爬片置于含有包埋单体和交联剂的渗透母液中进行浸泡处理，得到渗透处理后的外泌体爬片；所述聚合是指将渗透处理后的外泌体爬片进行凝胶化处理，得到聚合后的外泌体爬片；所述孵育是指将聚合后的外泌体爬片、HCR反应元件和所述TriggerDNA链标记抗体进行孵育处理，得到孵育处理后的外泌体爬片；所述膨胀处理是指将孵育处理后的外泌体爬片进行吸水膨胀；所述TriggerDNA链的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示；所述HCR反应元件为两个具有茎环结构的发夹DNA链H1和H2；所述H1的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示；所述H2的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示。
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百度查询： 上海市第十人民医院 一种基于膨胀后正交自组装的外泌体原位成像分析方法
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