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申请/专利权人：华侨大学
摘要：本发明提供一种碳酸酐酶和氨基甲酸酯激酶双酶级联催化系统及其构建方法、氨基甲酰磷酸的制备方法，通过合成碳酸酐酶菌种和氨基甲酸酯激酶菌种，并将碳酸酐酶菌种和氨基甲酸酯激酶菌种进行菌株培养和相关酶的表达与纯化，成功构建了双酶级联催化系统。该双酶级联催化系统可以克服单酶缺陷并提高酶的催化效率，具有较宽的适用性和实用性。本发明的双酶级联催化系统在加入CO2、NH3和ATP的条件下，可利用氨基甲酸酯激酶将碳酸酐酶水合的HCO3‑转化为氨基甲酰磷酸。本发明利用双酶级联生物转化的策略可将氨和二氧化碳转化成有价值的化学品从而减少大气中二氧化碳的释放，在氨和二氧化碳的综合利用上具有较高的应用前景，该技术是一种绿色的CCUS路线。
主权项：1.一种碳酸酐酶和氨基甲酸酯激酶双酶级联催化系统的构建方法，所述碳酸酐酶和氨基甲酸酯激酶双酶级联系统包括氨基甲酸酯激酶酶液和碳酸酐酶酶液，其特征在于，包括以下步骤：S1、重组工程菌的制备：将激烈火球菌DSM3638的CK样酶的片段与第一质粒载体连接，并导入大肠杆菌BL21中，得到氨基甲酸酯激酶菌种；然后将来源于Sulfurihydrogenibiumazorense的CAs和来源于人类重组链Ferritin的Ferritin序列结合，克隆至第二质粒载体后导入大肠杆菌BL21中，得到碳酸酐酶菌种；S2、所述氨基甲酸酯激酶菌种活化后，接种至第一培养基中培养并使用IPTG诱导表达，经蛋白纯化，得到所述氨基甲酸酯激酶酶液；S3、所述碳酸酐酶菌种活化后，接种至第二培养基中培养并使用IPTG诱导表达，经蛋白纯化，得到所述碳酸酐酶酶液。
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百度查询： 华侨大学 碳酸酐酶和氨基甲酸酯激酶双酶级联催化系统及其构建方法、氨基甲酰磷酸的制备方法
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