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申请/专利权人:维思克思生物科技(武汉)有限公司
摘要:本发明公开了靶向肝癌的载药外泌体、快速制备方法及其应用,属于生物医药技术领域。本发明以人脐带间充质干细胞MSC来源的外泌体作为载体,将传统化疗药物阿霉素通过超声辅助装入其中,得到高载药量的外泌体,然后使用神经氨酸酶处理外泌体,经酶催化作用水解唾液酸后表面大量暴露半乳糖或N‑乙酰半乳糖胺残基,得到去唾液酸化的载药外泌体,增加了其对肝肿瘤表面ASGPR的结合能力。本发明得到了有载药量高达25%的能够有效靶向肝癌细胞的载有阿霉素药物的外泌体,对肝细胞癌的治疗效果提高可达167%。本发明的靶向肝癌的载药外泌体,具有更好的生物相容性、低细胞毒性、肝癌靶向性,而且制备耗时短、方法简便、易于应用。
主权项:1.一种靶向肝癌的、载有阿霉素的外泌体,其特征在于,所述靶向肝癌的载药外泌体是将装载有阿霉素的外泌体使用神经氨酸酶进行处理后得到;所述靶向肝癌的、载有阿霉素的外泌体的制备方法包括:1从人脐带间充质干细胞中获得初始外泌体;2在初始外泌体中装载阿霉素得到装载有阿霉素的外泌体;3酶处理装载有阿霉素的外泌体:每30μg蛋白含量的载药外泌体中,添加4U的神经氨酸酶,37℃孵育2h,离心,得到去唾液酸化的载药外泌体,即为靶向肝癌的载药外泌体;所述阿霉素是通过如下方法装载到外泌体中:取盐酸阿霉素添加到外泌体中,轻轻吹吸混合;使用功率为80W的超声,按照超声时间40s、间隔时间20s、超声次数5次的方法进行超声处理,然后37℃孵育90min使外泌体膜恢复原状,再离心洗涤去除表面的阿霉素,得到靶向肝癌的、载有阿霉素的外泌体。
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