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申请/专利权人：中国科学院新疆理化技术研究所

摘要：本发明涉及一种响应面法制备羔羊皱胃糖蛋白部位的方法及应用，该方法以液料比、盐浓度和提取温度为自变量，以提取率和OH活性为响应值，利用响应面Box‑Behnken实验设计优化了糖蛋白的提取方法，得率为24.6±2.1%。用BCA法测定得蛋白含量为23.45±0.34%，苯酚‑硫酸法测定得中性糖含量为6.4±0.5%，单糖组成为阿拉伯糖，木糖，甘露糖，葡萄糖和半乳糖。抗氧化活性结果显示，糖蛋白部位具有较强的总还原能力，DPPH和OH‑自由基清除能力，且后两者的IC50值分别为2.91±0.16mgmL，3.9±0.3mgmL。通过本发明所述获得羔羊皱胃糖蛋白部位的方法成熟，操作简单不繁琐，易于放大和大量制备；获得的羔羊皱胃具有很好的抗氧化活性，可以应用于医药，保健以及食品领域中。

主权项：1.一种响应面法制备羔羊皱胃糖蛋白部位的方法，其特征在于按下列步骤进行：a、取新鲜羔羊皱胃，用自来水清洗胃腔内饲料，剥除脂肪及结缔组织，于温度-80℃下冷冻3h，剪碎，冷冻干燥，液氮粉碎，即得羔羊皱胃粉末；b、将步骤a中所得羔羊皱胃粉末石油醚脱脂3次，自然风干，得羔羊皱胃脱脂粉末，于温度-20℃下冷冻保存；c、用单因素分别对料液比，在18mLg,24mLg,30mLg,36mLg，提取温度15℃，30℃，45℃，60℃，钠盐浓度0.15M，0.3M，0.35M，0.6M进行实验，得到料液比24-36mLg，温度15-45℃，钠盐浓度0.2-0.6M；d、以步骤c得到的钠盐浓度、温度和液料比为自变量分别命名为A,B和C，提取率和OH自由基清除能力为响应值依次命名为Y1,Y2，利用DesignExpert12软件进行Box-BehnkenDesignBBD设计，对步骤b所得羔羊皱胃脱脂粉末进行提取，所得提取液中加入去离子水稀释4倍，在温度4℃下7000转速离心10min,取上清液，测定提取率和OH自由基清除活性；e、对提取率和OH自由基清除能力的响应面实验结果分别进行回归分析，对三个因素进行回归拟合后得到回归方程：Y1%=23.34-3.68A2-3.25B2-2.91C2+3.53A+1.45B+0.8288C+0.7825AB-0.0875AC-0.84BCY2%=36.43-5.99A2-4.55B2-5.78C2+4.97A+2.54B+0.31C+2.4AB-0.8AC-2.4BC以提取率和OH自由基清除能力为最大值得到提取条件，氯化钠盐浓度0.4-0.6M，温度20-40℃，液料比25-35mLg；f、将步骤e得到的提取条件对羔羊皱胃脱脂粉末进行糖蛋白提取，提取液在温度4℃下7000转速离心10min,取上清液，以去离子水为交换液透析袋透析脱盐60h后，将透析袋内液冷冻干燥，得到羔羊皱胃糖蛋白部位，称重计算提取率，于温度-20℃保存。

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