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申请/专利权人：南方科技大学
摘要：本发明属于核酸检测领域，公开了一种免扩增的核酸检测方法及其应用。本发明的核酸检测方法包括：用捕获探针捕获待检核酸，形成捕获探针‑待检核酸复合物；将捕获探针‑待检核酸复合物与CRISPR反应体系混合形成反应液，将反应液通入微流控芯片的微孔中进行反应；对产生的荧光进行显微观察，以确定核酸检测结果。本发明将CRISPR技术与微流控技术相结合开发的核酸检测方法，不需要核酸扩增就可以实现核酸的单分子检测，简便快速，不会造成扩增核酸时引起的气溶胶污染，灵敏度高，可检测到阿摩尔级别的核酸分子，极大地扩大了使用范围。
主权项：1.一种免扩增的流感病毒M基因的核酸的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：用捕获探针捕获待检核酸，形成捕获探针-待检核酸复合物；所述捕获探针序列如SEQIDNO:1所示；S2：将所述捕获探针-待检核酸复合物与CRISPR反应体系混合形成反应液，将所述反应液通入微流控芯片的微孔中进行反应；所述CRISPR反应体系包括Cas蛋白、CRISPRRNA和报告探针；所述CRISPRRNA序列如SEQIDNO:2所示；所述微流控芯片的微孔的体积为30～100fL；S3：对步骤S2中所述报告探针产生的荧光进行显微观察，以确定核酸检测结果；步骤S1中所述的捕获探针与磁珠结合，所述磁珠的直径为2.6～3.5μm；所述捕获探针上修饰有生物素，所述磁珠上修饰有链霉亲和素，通过共同孵育，所述生物素和所述链霉亲和素的结合将所述捕获探针修饰在所述磁珠上；所述检测方法不以疾病的诊断或治疗为目的。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 南方科技大学 一种免扩增的核酸检测方法及其应用
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