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一种基因突变原位成像方法 

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申请/专利权人:四川大学

摘要:本发明公开了一种利用点亮RNA适配体的单碱基突变成像方法,属于细胞内基因原位检测领域。通过连接酶辅助转录反应实现对单核苷酸位点变异SNV的识别,使用点亮的RNA适配体作为报告体,消除了非特异性探针结合和清洗过程,与使用荧光原位杂交方法相比,信号显著提高。因此,本发明可以精确定量细菌混合物中的耐药菌株,并鉴定从家禽养殖场分离出的耐药沙门氏菌。

主权项:1.一种基于转录放大和单核酸变异SNV点亮策略的针对单细胞单碱基突变耐药致病菌和胃肠道耐药致病菌RNA突变成像的非疾病诊断与治疗目的的方法,其特征在于该方法包括突变位点识别和信号转化输出两个过程,通过连接酶辅助转录反应实现对SNV的识别,使用点亮的RNA适配体作为报告探针,产生特异性荧光,点亮目标基因,消除了非特异性探针结合和清洗过程,通过T4DNA连接酶将两段引物连接,从而形成可供转录的、可进行信号转化的序列,并对引物目标基因的杂交长度进行了优化,所用的引物序列如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示,所述突变为gyrA的Ser83Phe突变。

全文数据:

权利要求:

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