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申请/专利权人:安徽职业技术学院
摘要:本发明涉及纳米酶催化领域,具体涉及一种阴阳离子双缺陷磷化镍纳米酶的微生物自磷化快速合成方法及其在乙酰胆碱酯酶活性检测中的应用,本发明采用酵母菌作为生物磷源,基于环境友好及超快高温加热技术的合成方法,制备了富含P阴离子缺陷和Ni阳离子缺陷的Ni‑Ni2P@NPC纳米酶,提供了一种环境友好的纳米酶制备方法。将该方法制备的纳米酶应用于乙酰胆碱酯酶活性的检测,推动了纳米酶颗粒在生物纳米技术领域的实际应用。
主权项:1.阴阳离子双缺陷磷化镍纳米酶的微生物自磷化合成方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤S1、使用磁力搅拌,将经过水预洗的酵母菌细胞溶解于30mL蒸馏水中,制成酵母菌细胞悬液;步骤S2、将过渡金属硝酸盐溶液加入酵母菌细胞悬液中。在30℃黑暗中温和搅拌2-48h后,收集产物,用蒸馏水冲洗数次,最后用真空冷冻机进行干燥,获得干燥物料;步骤S3、将步骤S2中的干燥物料转移至焦耳热超快加热石墨板的凹槽中,在ArH2混合气氛下,进行多次的高温焦耳热冲击,完成若干次热冲击后,冷却到室温,获得黑色碳化产物Ni-Ni2P@NPC;步骤S4、将0.35mL不同浓度的乙酰胆碱酯酶溶液与50μL的5mM乙酰胆碱溶液混合,将混合溶液稀释至0.5mL,随后在37℃下孵育10min后,加入步骤S3中制备的Ni-Ni2P@NPC并孵育1min,以完全抑制纳米酶;然后,加入985μL乙酸盐缓冲液,并注射100μL的1mMTMB,在37℃下再次孵育15min,通过紫外-可见光谱获得652nm处各自的吸光度。
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