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申请/专利权人：华中科技大学
摘要：本发明涉及一种利用人工抗原呈递细胞进行免疫原性肿瘤新抗原筛选与鉴定方法，属于肿瘤免疫技术领域。本发明联合肿瘤全外显子测序分析、HLA与肽亲和力预测以及基于载体体外刺激T细胞增殖与抗瘤细胞因子分泌的检测，为准确筛选新抗原并验证其免疫原性提供新的方法借鉴。本发明免疫原性肿瘤新抗原筛选准确性高、无需体内外验证，操作简单。
主权项：1.一种高通量免疫原性肿瘤新抗原筛选与鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）进行肿瘤标本及非肿瘤标本的外显子测序，所述非肿瘤标本为癌旁组织或者外周血；将非肿瘤标本的外显子测序结果作为对照，剔除胚系突变以获取肿瘤体细胞突变；对所述肿瘤标本进行人白细胞抗原分型，将所述肿瘤体细胞突变得到的突变多肽与所述人白细胞抗原分型的分型结果进行比对，得到人白细胞抗原限制性新抗原；（2）构建质粒，所述质粒含有步骤（1）所述的人白细胞抗原的重链及轻链基因，还含有Flag标签；将所述质粒进行表达，得到人白细胞抗原和Flag标签的融合蛋白；将所述融合蛋白和T细胞共刺激信号的抗体负载到微球上，构建人工抗原呈递细胞；所述微球为硫酸盐乳胶微球或磷脂微球；（3）将步骤（1）得到的人白细胞抗原限制性新抗原和步骤（2）得到的人工抗原呈递细胞进行孵育，使所述人白细胞抗原限制性新抗原负载到人工抗原呈递细胞的人白细胞抗原上，然后与T细胞进行共孵育，所述T细胞表面具有与所述肿瘤标本相同的人白细胞抗原；若所述T细胞发生增殖且检测到杀伤性细胞因子分泌，则所述人白细胞抗原限制性新抗原为免疫原性肿瘤新抗原；若所述T细胞未发生增殖和或未检测到杀伤性细胞因子分泌，则所述人白细胞抗原限制性新抗原为非免疫原性肿瘤新抗原。
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权利要求：
百度查询： 华中科技大学 一种利用人工抗原呈递细胞进行免疫原性肿瘤新抗原筛选与鉴定方法
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