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摘要：本发明涉及一种农杆菌介导的秋石斛遗传转化方法，属于植物基因工程技术领域。其包括：步骤S1、获取秋石斛的原球茎和幼嫩茎段作为外植体；步骤S2、对所述外植体依次进行一次诱导、二次诱导和增殖，获得胚性愈伤组织；步骤S3、利用EHA105农杆菌菌株侵染胚性愈伤组织；步骤S4、将侵染后的胚性愈伤组织移出所述农杆菌悬液转入共培养基进行共培养；步骤S5、利用筛选培养基进行抗性筛选，获得抗性愈伤组织或胚状体；步骤S6、所述抗性愈伤组织或胚状体分化得到转基因不定芽，生根获得转基因植株。本发明通过农杆菌介导，将外源基因导入到秋石斛胚性愈伤获得转基因苗，实现了热带兰秋石斛转基因从0到1的突破，也为后续高效遗传转化体系的构建奠定了基础。
主权项：1.一种农杆菌介导的秋石斛遗传转化方法，其特征在于，包括：步骤S1、获取秋石斛的球茎和幼嫩茎段作为外植体；步骤S2、对所述外植体依次进行一次诱导、二次诱导和增殖，以获取生长均一的胚性愈伤组织；步骤S3、利用预先获取的包含目的基因的EHA105农杆菌侵染所述胚性愈伤组织；步骤S4、将侵染后的胚性愈伤组织移出所述农杆菌悬液转入共培养基进行共培养；步骤S5、利用筛选培养基对共培养后的胚性愈伤组织进行抗性筛选，获得抗性愈伤组织或胚状体；步骤S6、将所述抗性愈伤组织或胚状体转入胚性愈伤分化培养基以分化得到转基因不定芽；步骤S7、将获得的所述转基因不定芽转入生根培养基中，获得转基因小苗。
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百度查询： 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 中国热带农业科学院海口实验站 一种农杆菌介导秋石斛胚性愈伤组织遗传转化的方法
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