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摘要：本发明涉及免疫细胞治疗领域，具体是一种肿瘤特异性CTL细胞制备的工艺方法，D0准备高效诱导的人工抗原提呈细胞1120株，从人外周血单个核细胞分选CD8细胞和Non‑CD8PBMC细胞；共同孵育人工抗原提呈细胞和肺癌抗原肽，D0‑D4共同培养CD8细胞和负载肺癌抗原肽的人工抗原提呈细胞；D5加入IL‑2和IL‑7；D7和D14负载肺癌抗原肽的Non‑CD8PBMC细胞重新刺激CTL细胞；D7‑D20进行细胞换液，并加入IL‑2和IL‑7以维持其生长；D20收集CTL细胞，染色计数。本发明的优点在于：用最佳工艺条件所诱导制备的肺癌特异性的CTL细胞纯度和活率高、细胞活性强，可以有效杀伤肿瘤靶细胞功能化的T细胞识别靶细胞时分泌大量的IFN‑γ，具有潜在的临床应用价值。
主权项：1.一种肿瘤特异性CTL细胞制备的工艺方法，其特征在于方法如下：D0、从已建立的工作细胞库中准备人工抗原提呈细胞D1120，从人外周血单核细胞磁珠分选CD8细胞和Non-CD8PBMC细胞；D0、共同孵育人工抗原提呈细胞D1120和肺癌抗原肽，获得负载肺癌抗原肽的人工抗原提呈细胞D1120；D0-D4、共同培养CD8细胞和负载肺癌抗原肽的人工抗原提呈细胞D1120；D5、加入IL-2和IL-7；D7和D14、共同培养后的CD8细胞含CTL细胞，收集所述的CTL细胞，与负载肺癌抗原肽的Non-CD8PBMC细胞共培养，进行再刺激，所述负载肺癌抗原肽的Non-CD8PBMC细胞由Non-CD8PBMC细胞与肺癌抗原肽孵育后获得；D7-D20、细胞扩增期间进行细胞换液，并加入IL-2和IL-7以维持其生长；D20、收集经过再刺激和扩增培养的CTL细胞，染色计数，记录活细胞数和死细胞数；所述肺癌抗原肽的序列为：SLLMWITQCFL、RMFPNAPYL、FLWGPRALV、KMVELVHFL、SLLMWITQV、ILAKFLHWL、YLQLVFGIEV和SLLMWITQC；所述人工抗原提呈细胞D1120是以果蝇SC2为基础，共转染表达人HLA-A2、CD80、CD54、CD70和LFA-3分子，且所述分子表达都在50%以上。
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