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摘要：本文提供了古细菌聚合酶的工程化变体，相对于野生型聚合酶，所述工程化变体表现出核酸外切酶‑活性exonuclease‑minusactivity、增强的热稳定性、增强的3'修饰的核苷酸的掺入、改善的尿嘧啶耐受性和或减少聚合酶催化的核苷酸结合和延伸反应中的序列特异性错误。还提供了工程化聚合酶用于形成复合聚合酶和形成结合复合物的用途，以及用于进行核酸测序反应的用途。

主权项：1.一种工程化聚合酶，其包括与SEQIDNO:1-2501和2511-2523中的任一者至少85％相同的氨基酸序列，并且具有：●氨基酸取代突变Asp141Ala和Glu143Ala，其中与具有SEQIDNO:1或2RLF89458.1或RLF78286.1的氨基酸序列的野生型聚合酶相比，所述工程化聚合酶增加了链终止核苷酸类似物的掺入；●氨基酸取代突变Asp168Ala和Glu170Ala，其中与具有SEQIDNO:1316NOZ58130.1的氨基酸序列的野生型聚合酶相比，所述工程化聚合酶增加了链终止核苷酸类似物的掺入；●氨基酸取代突变Asp149Ala和Glu151Ala，其中与具有SEQIDNO:2215RMF90817.1的氨基酸序列的野生型聚合酶相比，所述工程化聚合酶增加了链终止核苷酸类似物的掺入；●氨基酸取代突变Asp173Ala和Glu175Ala，其中与具有SEQIDNO:2367MBC7218772.1的氨基酸序列的野生型聚合酶相比，所述工程化聚合酶增加了链终止核苷酸类似物的掺入；●氨基酸取代突变Asp141Ala和Glu143Ala，其中与具有SEQIDNO:2393WP175059460.1的氨基酸序列的野生型聚合酶相比，所述工程化聚合酶增加了链终止核苷酸类似物的掺入；●氨基酸取代突变Asp170Ala和Glu172Ala，其中与具有SEQIDNO:2408KUO42443.1的氨基酸序列的野生型聚合酶相比，所述工程化聚合酶增加了链终止核苷酸类似物的掺入；或●氨基酸取代突变Asp161Ala和Glu163Ala，其中与具有SEQIDNO:2436NOZ77387.1的氨基酸序列的野生型聚合酶相比，所述工程化聚合酶增加了链终止核苷酸类似物的掺入。

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百度查询： 元素生物科学公司 具有减少的序列特异性错误的工程化聚合酶