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摘要：本发明涉及动物生物技术领域，且公开了一种高纯度的黄颡鱼肠道乳糜微粒提取方法，包括以下：1处理黄颡鱼：选取适中的黄颡鱼剪鳃、放血、取肠，肠道先在含BSA的Hank’s中清洗2‑3次，将洗涤后的肠道加入Hank’s，清洗3‑4次以去除肠腔杂质，剪碎后捞出；2消化处理：根据肠道含量用等体积消化液胶原蛋白酶与胰蛋白酶2：1混合进行消化。该高纯度的黄颡鱼肠道乳糜微粒提取方法，本发明首次提出一种淡水鱼类肠道乳糜微粒的提取技术，通过采用上述六个提取乳糜微粒操作简单易行，提取效率高，通过利用组织提取的乳糜微粒杂质少，通过采用组合消化液消化组织间杂质，能够有效减少污染，提高细胞提取效率，达到了提取效果好的优点。
主权项：1.一种高纯度的黄颡鱼肠道乳糜微粒提取方法，其特征在于，包括以下：1前期制备：选取适中的黄颡鱼，准备含BSA牛血清白蛋白的Hank’s溶液、胶原蛋白酶、胰蛋白酶和PMSF蛋白酶抑制剂试剂；2处理黄颡鱼：选取适中的黄颡鱼剪鳃、放血、取肠，肠道先在含BSA的Hank’s中清洗2-3次，将洗涤后的肠道加入Hank’s，清洗3-4次以去除肠腔杂质，剪碎后捞出；3消化处理：根据肠道含量用等体积消化液胶原蛋白酶与胰蛋白酶2：1混合进行消化；4制备匀桨液：按每克组织加入2ml的Hank’s，并加入适量PMSF蛋白酶抑制剂后，缓慢轻柔匀浆，直至没有组织结块为止，研磨后500g离心5min去除粗提杂质；5离心处理：破碎后的匀浆液850g离心10min，去沉淀，留上清液，上清液再按3中的条件离心两次，基本去除未破碎的细胞及细胞碎片；离心过程中，使用NaCl溶液调节上清液密度为1.00gml-1.20gml；6收集乳糜微粒：在2ml匀浆液上依次覆盖4ml浓度为1.063gml的NaCl密度溶液、4ml浓度为1.019gml的NaCl密度溶液和2.5ml浓度为1.006gml的NaCl密度溶液，收集上层液面2.5ml体积的液体，收集完成后，得到乳糜微粒。
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