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一种DNA门控磁性金属有机框架Fe3O4@Uio-66比率型荧光传感器的制备方法 

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摘要:本发明属于生物传感领域,涉及一种DNA门控磁性金属有机框架Fe3O4@Uio‑66比率型荧光传感器的制备方法。步骤包括:磁性金属有机框架的制备,通过原位合成的方法在磁性Fe3O4表面引入Uio‑66‑NH2,合成Fe3O4@Uio‑66;双链DNA功能化磁性金属有机框架的构建,将荧光染料封装在Fe3O4@Uio‑66内部,并将双链DNA连接到Fe3O4@Uio‑66表面,形成DNA门控的Fe3O4@Uio‑66;比率型荧光传感器的构建,适配体和赭曲霉毒素A特异性结合,释放荧光染料,同时互补链被核酸外切酶I降解,通过荧光信号比值F550F425对赭曲霉毒素A进行定量分析。该传感器对赭曲霉毒素A的线性响应范围为0.5‑1000ngmL,检出限为0.308ngmL,具有良好的抗干扰和实际应用能力。

主权项:1.一种DNA门控磁性金属有机框架Fe3O4@Uio-66比率型荧光传感器的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)磁性金属有机框架的制备:将六水三氯化铁溶解在乙二醇中,后加入聚丙烯酸盐A、去离子水和脲类化合物B,得到磁性金属Fe3O4;Fe3O4经过脲类化合物B的水溶液处理后,得到功能化的Fe3O4;将其分散在含过渡金属氯化物C和2-氨基对苯二甲酸的N,N-二甲基甲酰胺溶液中,加热搅拌,用磁铁收集固体,再重复上述步骤一次,然后重新分散在新的溶液中,含有上述浓度的两种试剂,溶液高压釜密封加热一定时间,样品被磁铁收集,用乙醇洗涤,真空干燥,得到磁性金属有机框架Fe3O4@Uio-66;(2)双链DNA功能化磁性金属有机框架:将Fe3O4@Uio-66与罗丹明6G混合反应一段时间,从而将染料罗丹明6G装在到Fe3O4@Uio-66;为了得到双链DNA功能化Fe3O4@Uio-66,将适配体互补链cDNA与1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺和N-羟基丁二酰亚胺混合反应;然后,向反应混合物中加入适配体APT,在37℃恒温振荡器孵育一段时间,得到双链DNAdsDNA;为了封装罗丹明6G,将dsDNA溶液和上述罗丹明6G与Fe3O4@Uio-66混合液按照一定体积比在37℃恒温振荡器孵育一段时间;制备的产物用缓冲液洗涤三次,去除为未加载上的Rho6G和双链DNAdsDNA,分散于缓冲液中;(3)比率型荧光适配体传感器的构建:首先取双链DNA功能化Fe3O4@Uio-66,然后向溶液中加入不同浓度的OTA,在37℃恒温振荡器孵育一段时间;随后将一定体积的核酸外切酶ExoI加入反应溶液中,在37℃恒温振荡器孵育一段时间;用磁力架进行磁分离,记录沉淀固体的荧光光谱;至此,一种DNA门控磁性金属有机框架Fe3O4@Uio-66比率型荧光传感器制备完成。

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