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摘要:本发明公开了一种同步共分化的多组织或多类器官模型及其构建方法,所述方法包括获得芯片:包括细胞培养板和设于所述细胞培养板的集成式培养元件,所述集成式培养元件包括中部设有凹槽的底部件、位于上层的中空件、设于所述中空件内的隔板,所述隔板将所述凹槽分隔成底部相互连通的第一和第二凹槽;后将干细胞接种至所述凹槽培养,待所述细胞沉降于所述凹槽底部后加入干细胞聚集体形成培养基;待干细胞聚集体将凹槽与隔板的空隙填满,两侧培养基不互通时;通过添加两种分化培养基在空间上调控所述凹槽内聚集体向不同组织或类器官共分化,获得多组织或多类器官模型。不同组织或类器官的共分化,促进了组织或器官的发育与成熟。
主权项:1.一种同步共分化的多组织或多类器官模型的构建方法,其特征在于,所述方法包括:获得多组织或多类器官同步共分化芯片,所述多组织或多类器官同步共分化芯片包括细胞培养板和设于所述细胞培养板内的集成式培养元件,所述集成式培养元件包括位于下层的中部设有凹槽的底部件、位于上层的外形与所述底部件的外形相匹配的中空件、设于所述中空件内的隔板,所述隔板将所述凹槽分隔成底部相互连通的第一凹槽和第二凹槽;使用干细胞聚集体形成培养基将消化的干细胞接种至所述第一凹槽和所述第二凹槽中培养,待所述细胞沉降于所述凹槽底部且细胞间形成连接后,加入干细胞聚集体形成培养基培养,待干细胞相互聚集,形成干细胞聚集体将两个凹槽与隔板的空隙填满使得两侧培养基不互通;对于所述第一凹槽的干细胞聚集体作如下培养:应用第一组织或类器官的诱导分化条件,不同时期加入相关培养基,获得第一组织或类器官;对于所述第二凹槽的干细胞聚集体作如下培养:应用第二组织或类器官的诱导分化条件,不同时期加入相关培养基,获得第二组织或类器官;其中,所述隔板的厚度为0.1mm~0.5mm;所述第一凹槽与第二凹槽的中间连接处的宽度为0.1mm~1mm,所述第一凹槽与第二凹槽的面积为0.20mm2~1.54mm2;所述隔板将所述中空件分为为左右两个分离的腔室,即为第一培养腔室和第二培养腔室,所述第一培养腔室和第二培养腔室通过所述第一凹槽和所述第二凹槽相互连通之处而相连通;所述干细胞接种至所述第一凹槽和所述第二凹槽中培养,使用干细胞聚集体形成培养基将消化的干细胞浓度调整至2×104~10×104个μL细胞浓度后,取2倍两个凹槽总体积的干细胞悬液接种至所述第一凹槽和所述第二凹槽中培养。
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百度查询: 武汉大学 一种同步共分化的多组织或多类器官模型及其构建方法
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