恭喜中元汇吉生物技术股份有限公司董璐获国家专利权
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龙图腾网恭喜中元汇吉生物技术股份有限公司申请的专利一种对核酸提取裂解液中异硫氰酸胍耐受时间延长的蛋白酶K突变体及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116334051B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-01发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211616133.2,技术领域涉及:C12N9/58;该发明授权一种对核酸提取裂解液中异硫氰酸胍耐受时间延长的蛋白酶K突变体及其应用是由董璐;陈威;赵伟;王建琴设计研发完成,并于2022-12-15向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种对核酸提取裂解液中异硫氰酸胍耐受时间延长的蛋白酶K突变体及其应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种对核酸提取裂解液中异硫氰酸胍耐受时间延长的蛋白酶K突变体及其应用。本发明通过对野生型蛋白酶K进行组合定向改造,在SEQIDNO.1所示的氨基酸序列的基础上,将第151位的酪氨酸突变为丙氨酸,第208位的赖氨酸突变为组氨酸,第273的丝氨酸突变为苏氨酸,第293位的甘氨酸突变为丙氨酸。本发明提供的蛋白酶K突变体相比野生型蛋白酶K更加耐受高浓度的异硫氰酸胍,在25℃下,核酸提取裂解液处理后30分钟时残余活力不受影响;处理60分钟时仍然能保持80%以上残余活力,而此时野生型蛋白酶K残余活力仅为28%。由此提高了蛋白酶K对核酸提取试剂盒的核酸提取裂解液的耐受能力。
本发明授权一种对核酸提取裂解液中异硫氰酸胍耐受时间延长的蛋白酶K突变体及其应用在权利要求书中公布了:1.一种对核酸提取裂解液中异硫氰酸胍耐受时间延长的蛋白酶K突变体,其特征在于,其氨基酸序列由SEQIDNO.1所示序列突变而来,所述蛋白酶K突变体选自如下任一种:1对应于SEQIDNO.1的第151位的酪氨酸突变为丙氨酸和第208位的赖氨酸突变为组氨酸;2对应于SEQIDNO.1的第151位的酪氨酸突变为丙氨酸和第273的丝氨酸突变为苏氨酸;3对应于SEQIDNO.1的第208位的赖氨酸突变为组氨酸和第273的丝氨酸突变为苏氨酸;4对应于SEQIDNO.1的第208位的赖氨酸突变为组氨酸、第273的丝氨酸突变为苏氨酸和第293位的甘氨酸突变为丙氨酸;所述突变体的氨基酸序列如SEQIDNO.3、4、6、11任一种所示。
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