恭喜海南热带海洋学院曾小娜获国家专利权
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龙图腾网恭喜海南热带海洋学院申请的专利一种斑马鱼肠道细菌代谢物与肠道类器官体外共培养模型及其制备方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119464187B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-22发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510033377.5,技术领域涉及:C12N5/071;该发明授权一种斑马鱼肠道细菌代谢物与肠道类器官体外共培养模型及其制备方法和应用是由曾小娜;陈燕;黄海;谢青梅;陈胜;潘延曦;刘茜瑶;许影设计研发完成,并于2025-01-09向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种斑马鱼肠道细菌代谢物与肠道类器官体外共培养模型及其制备方法和应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种斑马鱼肠道细菌代谢物与肠道类器官体外共培养模型及其制备方法和应用,涉及水产养殖细胞培养技术领域,该方法包括以下步骤:制备富含短链脂肪酸的斑马鱼肠道细菌代谢物;收集斑马鱼肠道类器官;体外共培养;制得体外共培养模型。本发明可在体外模拟体内3D生长环境,能够更加真实反映机体功能,从而研究斑马鱼肠道细菌代谢物与肠道的互作过程和发生机制,本发明共培养产物可用来鉴定用于治疗疾病的药物或试剂的方法。可以为肠病分子机制研究、疾病模拟、营养成分体外评估、药物靶点发现及药效筛选等提供精准的研究工具,具有广泛的应用前景。本发明解决了现有技术中缺乏理想的斑马鱼肠道类器官体外研究模型的问题。
本发明授权一种斑马鱼肠道细菌代谢物与肠道类器官体外共培养模型及其制备方法和应用在权利要求书中公布了:1.一种斑马鱼肠道细菌代谢物与肠道类器官体外共培养模型的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)制备富含短链脂肪酸的斑马鱼肠道细菌代谢物:将可产生短链脂肪酸的斑马鱼肠道细菌进行富集和分离培养,诱导可产生短链脂肪酸的斑马鱼肠道细菌制备代谢产物,离心,取上清液过滤,灭活,制得富含短链脂肪酸的斑马鱼肠道细菌代谢物;(2)收集斑马鱼肠道类器官:收集分离培养的斑马鱼肠道类器官,加入类器官消化液,室温下进行完全消化,然后离心并去上清,用PBS重悬,制得斑马鱼肠道类器官;(3)体外共培养:将步骤(1)制得的富含短链脂肪酸斑马鱼肠道细菌代谢物和步骤(2)制得的斑马鱼肠道类器官混合,加入基质胶重悬,在24孔板上滴胶接种,然后体外共培养3-5d;(4)收集共培养产物:收集步骤(3)的24孔板的上清液,制得体外共培养上清液;收集步骤(3)的24孔板的培养基,加入类器官消化液,室温下进行完全消化,离心并去上清,用PBS重悬,作为体外共培养的肠道组织产物,将体外共培养上清液与体外共培养的肠道组织产物混合,制得体外共培养产物,制得斑马鱼肠道细菌代谢物与肠道类器官体外共培养模型;步骤(1)中,斑马鱼肠道细菌包括乳酸杆菌、肠杆菌、假单胞菌和曲霉菌中的至少一种;步骤(1)中,富集和分离培养的方法为:将斑马鱼饲喂不可消化多糖,无菌条件下,采集斑马鱼肠道内容物,并接种到培养基上,倒置培养,然后进行分离纯化,选取纯化的细菌进行16SrDNA序列测定鉴定;所述不可消化多糖为木质素;步骤(1)中,采用不可消化多糖作为发酵底物,诱导可产生短链脂肪酸的斑马鱼肠道细菌制备代谢产物;所述不可消化多糖为木质素。
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