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申请/专利权人：苏州大学附属第一医院
摘要：本发明公开了一种pCDH1-MCS1-EF1-copGFP-HCN4质粒的构建方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：（1）从心肌组织中提取总RNA，将提取的总RNA反转录合成cDNA第一链，以反转录得到的cDNA为模板，使用含有核苷酸序列为SEQNo：2和为SEQNo：3的基因特异性引物通过PCR扩增得到HCN4起搏基因；（2）抽提pCDH1-MCS1-EF1-copGFP质粒，分别对空质粒载体pCDH1-MCS1-EF1-copGFP和步骤（1）PCR扩增得到的HCN4起搏基因用EcoRⅠ和BamHⅠ进行双酶切；（3）将双酶切后的空质粒载体pCDH1-MCS1-EF1-copGFP和双酶切后的HCN4起搏基因进行连接反应，将HCN4起搏基因连接入pCDH1-MCS1-EF1-copGFP质粒中，构建形成pCDH1-MCS1-EF1-copGFP-HCN4质粒。该质粒可以作为生物起搏的研究基础。
主权项：一种pCDH1‑MCS1‑EF1‑copGFP‑HCN4质粒的构建方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：（1）从心肌组织中提取总RNA，将提取的总RNA反转录合成cDNA第一链，以反转录得到的cDNA为模板，使用含有核苷酸序列为SEQ No：2和为SEQ No：3的基因特异性引物通过PCR扩增得到HCN4起搏基因；（2）抽提pCDH1‑MCS1‑EF1‑copGFP质粒，分别对空质粒载体pCDH1‑MCS1‑EF1‑copGFP和步骤（1）PCR扩增得到的HCN4起搏基因用EcoRⅠ和BamHⅠ进行双酶切：（3）将双酶切后的空质粒载体pCDH1‑MCS1‑EF1‑copGFP和双酶切后的HCN4起搏基因进行连接反应，将HCN4起搏基因连接入pCDH1‑MCS1‑EF1‑copGFP质粒中，构建形成pCDH1‑MCS1‑EF1‑copGFP‑HCN4质粒。
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权利要求：
百度查询： 苏州大学附属第一医院 pCDH1-MCS1-EF1-copGFP-HCN4质粒的构建方法
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