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申请/专利权人：河南红枫种苗股份有限公司

摘要：本发明涉及农业技术领域，特别涉及一种陕西卫矛种子的萌发方法。该萌发方法包括：将陕西卫矛种子进行消毒处理，切除远离种脐端的部分胚乳，然后进行生根培养；生根培养包括：将切除胚乳的种子接种到生根培养基中进行培养，待种子生根后转接到炼苗培养基中进行培养；生根培养基包括KT和NAA。本发明具有的有益效果为：采用本发明方法进行陕西卫矛种子萌发诱导，实现了陕西卫矛种子萌发率从不足10％提高到了90％以上，炼苗成活率在85％左右，对于实现陕西卫矛的规模化种子繁殖具有非常重要的作用。

主权项：一种陕西卫矛种子的萌发方法，其特征在于，包括：将陕西卫矛种子进行消毒处理，切除远离种脐端的14～13体积的胚乳，然后进行生根培养；所述生根培养包括：将切除胚乳的种子接种到生根培养基中进行培养，待种子生根后转接到炼苗培养基中进行培养；所述生根培养基包括KT和NAA。

全文数据：一种陕西卫矛种子的萌发方法技术领域[0001]本发明涉及农业技术领域，特别涉及一种陕西卫矛种子的萌发方法。背景技术[0002]陕西卫矛EuonymusschensianusMaxim又名金丝吊蝴蝶，是卫矛科卫矛属翅果系，果实具翅4〜5,成熟后为红色，翅长可达2.5〜3cm，宽1.5〜2cm，吊在绿叶之间，犹如振翅欲飞的蝴蝶，是一种园林观赏价值极高的树种。[0003]陕西卫矛的繁殖方法包括播种和嫁接。播种方法为:秋天果实成熟后采收，日晒待果皮开裂后收集种子并晾干、收藏。翌年1月将种子用30°C温水浸种24小时，然后湿沙背阴处贮藏。3月中旬移至背风向阳处并保持20〜25°C温度催芽，待胚根出现后即可播种。采取条播，行距35cm，株距3〜5cm，覆土厚度2〜3cm，播种量IOkg亩。嫁接方法为:可用丝棉木作砧木，3月中下旬砧木萌动时即可嫁接。采用劈接和切接方法进行，有很高的观赏价值。[0004]陕西卫矛种子在自然条件下萌发率极低，常规播种试验证明其萌发率几乎为零，而经过一定浓度的赤霉素、细胞分裂素等激素处理之后，萌发率依然很低，萌发率不足10%。由于种子萌发条件的限制，现在陕西卫矛快繁技术多是以带芽茎段作为外植体，但是组培苗生长较慢，炼苗不易成活。目前，园林上多采用丝棉木作为砧木进行嫁接繁殖，虽然可以实现陕西卫矛的规模化繁殖，但嫁接属于无性繁殖，无法实现陕西卫矛的基因重组和品种改良。因此，只有实现陕西卫矛的种子顺利成苗，才能实现亲本到子代的延续，杂交培育新品种才具有可行性，突破陕西卫矛的种子萌发技术，对于实现该品种的种质保存和品种改良具有非常重要的意义。因此，提供一种促进陕西卫矛种子萌发的方法具有重要的现实意义。发明内容[0005]有鉴于此，本发明提供了一种陕西卫矛种子的萌发方法。采用本发明方法进行陕西卫矛种子萌发诱导，实现了陕西卫矛种子萌发率从不足10%提高到了90%以上，炼苗成活率在85%左右，对于实现陕西卫矛的规模化种子繁殖具有非常重要的作用。[0006]为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：[0007]本发明提供了一种陕西卫矛种子的萌发方法，包括:将陕西卫矛种子进行消毒处理，切除远离种脐端的部分胚乳，然后进行生根培养；[0008]生根培养包括:将切除胚乳的种子接种到生根培养基中进行培养，待种子生根后转接到炼苗培养基中进行培养;生根培养基包括激动素KT和萘乙酸NAA。[0009]KT是一种非天然的细胞分裂素，化学名称为6-糖基氨基嘌呤或N6-呋喃甲基腺嘌呤），分子式c1QH9N5o。不溶于水，溶于强酸、碱及冰醋酸中；除具有促进细胞分裂的作用外，还具有延缓离体叶片和切花衰老，诱导芽分化和发育及增加气孔开度的作用。[0010]NAA，中文名称1-萘乙酸（1-Naphthaleneaceticacid，是一种有机化合物，化学式:CiqH7CH2CO2H,是一种易溶于有机溶剂的无色固体。它是一种植物激素生长素，常用于商用的发根粉或发根剂中，在植物使用扦插法繁殖时使用。它也可用于植物组织培养。[0011]本发明采用包含KT和NAA的培养基对陕西卫矛种子进行萌发培养，结果显示本发明培养基可显著促进陕西卫矛种子的萌发，萌发率可达95%以上。[0012]作为优选，KT的浓度为0·8〜1·OmgL，NAA的浓度为0·08〜0·lmgL。[0013]优选地，KT的浓度为I.OmgL，NAA的浓度为0.lmgL。[0014]作为优选，生根培养的条件为:光照时间为8〜12hd，光照强度为2500〜35001x，培养温度为24〜26°C，相对湿度为45%〜50%。[0015]在本发明提供的实施例中，生根培养的条件为：光照时间为12hd，光照强度为2500〜35001x，培养温度为24〜26°C，相对湿度为45%〜50%。[0016]作为优选，生根培养基为包括KT、NAA、蔗糖和琼脂的固体培养基，蔗糖的浓度为25〜30gL，琼脂的浓度为5〜7gL。[0017]在本发明提供的实施例中，生根培养基中蔗糖的浓度为30gL，琼脂的浓度为7gL0[0018]作为优选，炼苗培养基为包括蔗糖和琼脂的固体培养基，蔗糖的浓度为15〜20gL，琼脂的浓度为5〜7gL。[0019]在本发明提供的实施例中，炼苗培养基中蔗糖的浓度为20gL，琼脂的浓度为7gL0[0020]在本发明提供的实施例中，固体培养基为MS固体培养基。[0021]作为优选，陕西卫矛种子的采摘时间为9月11日〜10月1日之间。和传统的等待果实成熟炸开后采收种子不同，申请人在9月中旬至10月上旬之间进行种子采收，此时果实由青转红，胚已经发育成熟，具有很高的活力。本申请经试验发现，9月11之前，胚过于幼嫩而无法成活，10月1日之后，种子接种后染菌率高达80%以上。[0022]作为优选，消毒处理为:在次氯酸溶液中浸泡10〜20min，然后依次用酒精和氯化汞各消毒5〜lOmin，无菌水冲洗，将假种皮剥离，放入双氧水中。[0023]在本发明提供的实施例中，消毒处理为:在0.1%次氯酸溶液中浸泡IOmin，然后依次用75%酒精和0.1%氯化汞各消毒5min，无菌水冲洗5〜6遍，将假种皮剥离，放入1%双氧水中。[0024]在消毒处理之前，还包括种子的前处理。种子的前处理包含以下步骤：用加有洗涤剂的清水浸泡清洗，去除果皮上残留的虫卵、污渍，再用流水冲洗2h，晾干水份。用刀片切去果翅、上部的果蒂和下部的脐，不要伤到内部的种子。[0025]作为优选，切除远离种脐端的部分胚乳为切除远离种脐端的14〜13体积的胚乳。[0026]作为优选，生根培养后还包括炼苗。[0027]炼苗包含以下步骤：[0028]1选取生长健壮的瓶苗，先开瓶炼苗2〜3d，使幼苗适应外界环境；[0029]2将苗小心取出，不要伤到根系，流水冲净植株上附着培养基，洗不净则容易导致根系发霉腐烂最终死亡；[0030]3将苗栽到事先准备好已灭菌的培养土中，培养土采用蛭石：泥炭=1:1的比例进行配制；[0031]⑷栽好后喷洒多菌灵溶液，然后覆薄膜，放置阴凉处；[0032]5待新叶、新根长出后放置向阳处培养，注意保持湿度，可白天覆膜，夜晚揭膜，温度保持在15〜25°C，逐步加强通风；[0033]⑶待幼苗长势健壮再进行露天栽植。[0034]本发明提供了一种陕西卫矛种子的萌发方法。该萌发方法包括:将陕西卫矛种子进行消毒处理，切除远离种脐端的部分胚乳，然后进行生根培养;生根培养包括:将切除胚乳的种子接种到生根培养基中进行培养，待种子生根后转接到炼苗培养基中进行培养;生根培养基包括KT和NAA。本发明具有的有益效果为:采用本发明方法进行陕西卫矛种子萌发诱导，实现了陕西卫矛种子萌发率从不足10%提高到了90%以上，炼苗成活率在85%左右，对于实现陕西卫矛的规模化种子繁殖具有非常重要的作用。附图说明[0035]图1示接种后10天，种子开始萌动，子叶呈黄色，微微露出；[0036]图2示接种后30天，子叶明显长出，变成绿色，胚轴开始伸长；[0037]图3示接种后60天，子叶展开，真叶开始发育，根部开始长出；[0038]图4示接种后90天，根系发达，有2〜3条主根，长可达4〜6cm，真叶展开4〜6片，叶片墨绿色，生长健壮。具体实施方式[0039]本发明公开了一种陕西卫矛种子的萌发方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。[0040]本发明采用的固体MS培养基的具体配方为:NH4N031.65gL、KN031.9gL、CaCl2·2H200.44gL、MgS〇4.7H200.37gL、KH2P〇40.17gL、KI0.83mgL、H3B036.2mgL、MnS〇4·4H2022.3mgL、ZnS〇4·7H208.6mgL、Na2Mo〇4·2H200.25mgL、CuS〇4·5H200.025mgL、CoCl2·6H2O0.025mgL、FeS〇4·7H2027.8mgL、Na2-EDTA·2H2037.3mgL、肌醇10〇11^1^、1¥13烟酸0.511^1^、盐酸卩比咳醇（维生素1360.511^1^、盐酸硫胺素（维生素1310.lmgL、甘氨酸2mgL。琼脂质量浓度7gL，蔗糖质量浓度30gL，pH值为6.0，所配培养基经过高压高温蒸汽灭菌，126摄氏度下5分钟。[0041]组培室培养条件:光照时间12hd，光照强度2500〜35001X，培养温度为24〜26°C，相对湿度45%〜50%，每3d用紫外灯灭菌25〜30min。[0042]本发明提供的陕西卫矛种子的萌发方法中所用培养基、激素等均可由市场购得。[0043]下面结合实施例，进一步阐述本发明：[0044]实施例1[0045]本发明实施例陕西卫矛种子萌发方法如下：[0046]1、种子的处理[0047]1在9月11日至10月1日之间，选取果实饱满、果皮青白色、外观完整、无病虫害的陕西卫矛果实进行采集。[0048]2采收后先用加有洗涤剂的清水浸泡清洗，去除果皮上残留的虫卵、污渍等，再用流水冲洗2h，晾干水份。用刀片切去果翅、上部的果蒂和下部的脐，此过程不要伤到内部的种子。[0049]3种子切好后放入0·1%HC10中浸泡lOmin。[0050]4在超净工作台内依次用75%酒精和0.1%HgCl各消毒5min。注：消毒液的使用次数不超过10次，达到后倒掉重新配制。其中，酒精使用完毕后要求密封保存，避免挥发降低消毒效果;氯化汞要求避光保存，以免失效。[0051]5消毒完成后，用无菌水冲洗5〜6遍，每次浸泡时间要求长于3min。[0052]6清洗完成后，在超净工作台内用手术刀和镊子把果实剥开，取出种子，并将种子外面的红色假种皮剥离干净，放入I^H2O2中待用。[0053]2、接种[0054]1在超净工作台内，切除种子远离种脐段的胚乳14到13体积，接种到灭菌后的加有KT1.0mgL、NAAO.lmg1的MS培养基中。接种10天后，种子开始萌动，子叶呈黄色，微微露出（图1。接种后30天后，子叶明显长出，变成绿色，胚轴开始伸长图2。[0055]⑵培养45〜60天后种子第一片真叶展开，根已经伸长，并长出须根。接种后60天，子叶展开，真叶开始发育，根部开始长出（图3。[0056]3在超净工作台内，将长出须根的幼苗转接到不含激素的MS固体培养基中。[0057]⑷培养45〜60天后，幼苗根系发达茎干粗壮，叶片发育正常，可以进入炼苗阶段。接种后90天，根系发达，有2-3条主根，长可达4-6cm，真叶展开4-6片，叶片墨绿色，生长健壮图4。[0058]同时统计种子萌发率。经统计，萌发率为96%。[0059]3、炼苗[0060]1选取生长健壮的瓶苗，先开瓶炼苗2d，使幼苗适应外界环境。[0061]2将苗小心取出，不要伤到根系，流水冲净植株上附着培养基，洗不净则容易导致根系发霉腐烂最终死亡。[0062]3将苗栽到事先准备好已灭菌的培养土中，培养土采用蛭石：泥炭=1:1的比例进行配制。[0063]⑷栽好后喷洒多菌灵溶液，然后覆薄膜，放置阴凉处。[0064]51个月左右，待新叶、新根长出后放置向阳处培养，注意保持湿度，可白天覆膜，夜晚揭膜，温度保持在15〜25°C，逐步加强通风。[0065]6待幼苗长势健壮再进行露天栽植。栽植前统计炼苗成活率。经统计，炼苗成活率达85%。[0066]实施例2[0067]本发明实施例陕西卫矛种子萌发方法如下：[0068]2、种子的处理[0069]1在9月11日至10月1日之间，选取果实饱满、果皮青白色、外观完整、无病虫害的陕西卫矛果实进行采集。[0070]2采收后先用加有洗涤剂的清水浸泡清洗，去除果皮上残留的虫卵、污渍等，再用流水冲洗2h，晾干水份。用刀片切去果翅、上部的果蒂和下部的脐，此过程不要伤到内部的种子。[0071]3种子切好后放入0.1%HC10中浸泡lOmin。[0072]4在超净工作台内依次用75%酒精和0.1%HgCl各消毒5min。注：消毒液的使用次数不超过10次，达到后倒掉重新配制。其中，酒精使用完毕后要求密封保存，避免挥发降低消毒效果;氯化汞要求避光保存，以免失效。[0073]5消毒完成后，用无菌水冲洗5〜6遍，每次浸泡时间要求长于3min。[0074]6清洗完成后，在超净工作台内用手术刀和镊子把果实剥开，取出种子，并将种子外面的红色假种皮剥离干净，放入I^H2O2中待用。[0075]2、接种[0076]1在超净工作台内，切除种子远离种脐段的胚乳14到13体积，接种到灭菌后的加有KT0.9mgL、NAA0.09mgL的MS培养基中。[0077]2培养45〜60天后种子第一片真叶展开，根已经伸长，并长出须根。[0078]3在超净工作台内，将长出须根的幼苗转接到不含激素的MS固体培养基中。[0079]⑷培养45〜60天后，幼苗根系发达茎干粗壮，叶片发育正常，可以进入炼苗阶段。同时统计种子萌发率。经统计，萌发率为96%。[0080]3、炼苗[0081]1选取生长健壮的瓶苗，先开瓶炼苗2d，使幼苗适应外界环境。[0082]2将苗小心取出，不要伤到根系，流水冲净植株上附着培养基，洗不净则容易导致根系发霉腐烂最终死亡。[0083]3将苗栽到事先准备好已灭菌的培养土中，培养土采用蛭石：泥炭=1:1的比例进行配制。[0084]⑷栽好后喷洒多菌灵溶液，然后覆薄膜，放置阴凉处。[0085]51个月左右，待新叶、新根长出后放置向阳处培养，注意保持湿度，可白天覆膜，夜晚揭膜，温度保持在15〜25°C，逐步加强通风。[0086]6待幼苗长势健壮再进行露天栽植。栽植前统计炼苗成活率。经统计，炼苗成活率达85%。[0087]实施例3[0088]本发明实施例陕西卫矛种子萌发方法如下：[0089]3、种子的处理[0090]1在9月11日至10月1日之间，选取果实饱满、果皮青白色、外观完整、无病虫害的陕西卫矛果实进行采集。[0091]2采收后先用加有洗涤剂的清水浸泡清洗，去除果皮上残留的虫卵、污渍等，再用流水冲洗2h，晾干水份。用刀片切去果翅、上部的果蒂和下部的脐，此过程不要伤到内部的种子。[0092]3种子切好后放入0·1%HC10中浸泡lOmin。[0093]4在超净工作台内依次用75%酒精和0.1%HgCl各消毒5min。注：消毒液的使用次数不超过10次，达到后倒掉重新配制。其中，酒精使用完毕后要求密封保存，避免挥发降低消毒效果;氯化汞要求避光保存，以免失效。[0094]5消毒完成后，用无菌水冲洗5〜6遍，每次浸泡时间要求长于3min。[0095]6清洗完成后，在超净工作台内用手术刀和镊子把果实剥开，取出种子，并将种子外面的红色假种皮剥离干净，放入I^H2O2中待用。[0096]2、接种[0097]1在超净工作台内，切除种子远离种脐段的胚乳14到13体积，接种到灭菌后的加有KT0.8mgL、NAA0.08mgL的MS培养基中。[0098]2培养45〜60天后种子第一片真叶展开，根已经伸长，并长出须根。[0099]3在超净工作台内，将长出须根的幼苗转接到不含激素的MS固体培养基中。[0100]⑷培养45〜60天后，幼苗根系发达茎干粗壮，叶片发育正常，可以进入炼苗阶段。同时统计种子萌发率。经统计，萌发率为96%。[0101]3、炼苗[0102]1选取生长健壮的瓶苗，先开瓶炼苗2d，使幼苗适应外界环境。[0103]2将苗小心取出，不要伤到根系，流水冲净植株上附着培养基，洗不净则容易导致根系发霉腐烂最终死亡。[0104]3将苗栽到事先准备好已灭菌的培养土中，培养土采用蛭石：泥炭=1:1的比例进行配制。[0105]⑷栽好后喷洒多菌灵溶液，然后覆薄膜，放置阴凉处。[0106]51个月左右，待新叶、新根长出后放置向阳处培养，注意保持湿度，可白天覆膜，夜晚揭膜，温度保持在15〜25°C，逐步加强通风。[0107]6待幼苗长势健壮再进行露天栽植。栽植前统计炼苗成活率。经统计，炼苗成活率达85%。[0108]实施例4[0109]本发明研究了激素配比对种子生长情况的影响，试验方法同实施例1，对比结果如下：[0110]表1激素配比对种子生长情况的影响[0111][0112]以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

权利要求：1.一种陕西卫矛种子的萌发方法，其特征在于，包括:将陕西卫矛种子进行消毒处理，切除远离种脐端的14〜13体积的胚乳，然后进行生根培养；所述生根培养包括:将切除胚乳的种子接种到生根培养基中进行培养，待种子生根后转接到炼苗培养基中进行培养;所述生根培养基包括KT和NAA。2.根据权利要求1所述的萌发方法，其特征在于，所述KT的浓度为0.8〜l.OmgL，所述NAA的浓度为0·08〜0·lmgL。3.根据权利要求1或2所述的萌发方法，其特征在于，所述生根培养的条件为:光照时间为8〜12hd，光照强度为2500〜35001x，培养温度为24〜26°C，相对湿度为45%〜50%。4.根据权利要求1所述的萌发方法，其特征在于，所述生根培养基为包括KT、NAA、蔗糖和琼脂的固体培养基，所述蔗糖的浓度为25〜30gL，所述琼脂的浓度为5〜7gL。5.根据权利要求1所述的萌发方法，其特征在于，所述炼苗培养基为包括蔗糖和琼脂的固体培养基，所述蔗糖的浓度为15〜20gL，所述琼脂的浓度为5〜7gL。6.根据权利要求4或5所述的萌发方法，其特征在于，所述固体培养基为MS固体培养基。7.根据权利要求1所述的萌发方法，其特征在于，所述陕西卫矛种子的采摘时间为9月11日〜10月1日之间。8.根据权利要求1所述的萌发方法，其特征在于，所述消毒处理为：在次氯酸溶液中浸泡10〜20min，然后依次用酒精和氯化汞各消毒5〜lOmin，无菌水冲洗，将假种皮剥离，放入双氧水中。9.根据权利要求1所述的萌发方法，其特征在于，所述生根培养后还包括炼苗。

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