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申请/专利权人:甘肃农业大学
摘要:本发明涉及动物生物技术领域中的绵羊生长速度的分子标记辅助育种技术,具体涉及到甘肃高山细毛羊生长速度相关基因等位基因检测试剂盒。一种甘肃高山细毛羊生长速度相关基因Leptin的PCR‑SSCP检测试剂盒,其特征是包括有PCR反应液,Leptin*C的DNA标准样;SSCP检测试剂,去离子水,10%过硫酸铵,上样变性缓冲液,TEMED,12%的非变性聚丙烯酰胺凝胶Arc:Bis=37.5:1;所述的上样变性缓冲液,包括98%去离子甲酰胺,0.025%溴酚蓝,0.025%二甲苯青,10mmolL EDTA pH8.0。本发明的优点是本发明对甘肃高山细毛羊的分子标记选种具有快速、敏感性高、成本低等特点。
主权项:一种甘肃高山细毛羊生长速度相关性基因Leptin的 PCR‑SSCP检测试剂盒,其特征在于包括有PCR反应液,Leptin*C的DNA标准样;去离子水,10%过硫酸铵,上样变性缓冲液,TEMED,12%的非变性聚丙烯酰胺凝胶Arc:Bis=37.5:1;所述的上样变性缓冲液,包括98%去离子甲酰胺,0. 025%溴酚蓝,0. 025%二甲苯青,10mmolL EDTA pH 8. 0;所述的PCR反应液:总体积20μL,其中10×buffer缓冲液为2.0μL,Mg2+浓度为2.5mM,dNTPs的终浓度为100μM,引物Leptin‑F: 5’ TACCAACAGATCCTCGCCAGTC 3'和Leptin‑R: 5’ CTTCAAGGCTTCAGCACCCA 3'各0.1μM,Taq聚合酶0.5U,ddH2O补充体积至20μL;所述的Leptin*C的DNA标准样的核苷酸序列为:taccaacaga tcctcgccag tctgccttcc agaaatgtga tccaaatatc taatgacctggagaacctcc aggaccttct ccacctgctg gccgcctcca agagctgccc cttgccgcaggtcagggccc tggagagctt ggagagcctg ggcgtcgtcc tggaagcctc cctctactccaccgaggtgg tggccctgag ccggctacag gggtctctac aggacatgtt gcggcagctggacctcagcc ctgggtgctg aagccttgaa g。
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