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申请/专利权人：基因泰克公司

摘要：本发明提供抗PMEL17抗体和免疫缀合物及其使用方法。

主权项：一种结合PMEL17的分离单克隆抗体，其中所述抗体结合SEQ ID NO:26的氨基酸105至125内的表位，或结合SEQ ID NO:26的氨基酸25至45内的表位。

全文数据：抗PMEL17抗体和免疫缀合物发明领域[0001]本发明涉及抗PMEL17抗体和免疫缀合物及其使用方法。[0002]背景[0003]黑素细胞蛋白质PMEL17是一种经受自内质网排出至高尔基体的整合膜蛋白，在高尔基体中，其经糖基化并且最终迀移至黑素体。成熟PMEL17到达黑素体所通过的特定途径已成为争论的主题，然而，明显的是该蛋白质的某一部分在其进入I期黑素体中之前短暂存在于细胞表面处。黑素体是产生黑色素的特定溶酶体相关细胞器，所述黑色素沉积在由源于PMEL17蛋白质的蛋白水解片段构成的原纤维上。黑色素的合成主要局限于黑素细胞和眼的有丝分裂后色素上皮。黑素细胞独特表达色素形成所需的特定基因，其中一些黑素细胞在其转化成黑素瘤之后得以维持。[0004]人PMEL17是一种具有661个氨基酸的蛋白质包括氨基末端信号序列），其中跨膜区域位于氨基酸596和616处。PMEL17经受复杂加工，但该蛋白质的生命周期的至少一部分是在细胞表面上度过。[0005]本领域存在对靶向PMEL17以诊断和治疗PMEL17相关病状诸如癌症）的药剂的需要。本发明满足此需要并且提供其它益处。[0006]概述[0007]本发明提供抗PMEL17抗体和免疫缀合物及其使用方法。[0008]在一些实施例中，提供结合PMEL17的分离抗体。在一些这类实施方案中，抗体结合SEQIDN0:26的氨基酸105至125内的表位。在一些这类实施方案中，抗体结合SEQIDNO:26的氨基酸25至45内的表位。在一些实施方案中，抗体为单克隆抗体。在一些实施方案中，抗体为人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。在一些实施方案中，抗体为结合PMELl7的抗体片段。在一些实施方案中，PMEL17为人PMEL17。在一些实施方案中，人PMEL17具有序列SEQIDN0:26或SEQIDN0:27。在一些实施方案中，抗体为IgGl、IgG2a或IgG2b抗体。[0009]在一些实施方案中，抗体包含:a⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:5的HVR-H3,（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3,和（iii包含氨基酸序列SEQIDN0:4的HVR-H2;或b⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:15的HVR-H3，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3,和（iii包含氨基酸序列SEQID冊：14的取1?-!12;或3通过具有4了0：登录号?了4-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的HVR-H3、HVR-L3和HVR-H2。[0010]在一些实施方案中，抗体包含:a⑴包含氨基酸序列SEQIDNO:3的HVR-Hl，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:4的HVR-H2,和（iii包含氨基酸序列SEQIDN0:5的HVR-H3;或b⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:13的HVR-Hl，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:14的HVR-H2,和（iii包含氨基酸序列SEQID冊：15的取1?-!13;或3通过具有4了0：登录号?了4-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的HVR-Hl、HVR-H2和HVR-H3。[0011]在一些实施方案中，抗体包含:a⑴包含氨基酸序列SEQIDNO:3的HVR-Hl，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:4的HVR-H2，（iii包含氨基酸序列SEQIDN0:5的HVR-H3，（iv包含氨基酸序列SEQIDN0:6的HVR-Ll，（v包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2，（vi包含氨基酸序列SEQIDNO:8的HVR-L3;或b⑴包含氨基酸序列SEQIDNO:13的HVR-Hl，ii包含氨基酸序列SEQIDNO:14的HVR-H2,和（iii包含氨基酸序列SEQIDNO:15的HVR-H3，（iv包含氨基酸序列SEQIDN0:16的HVR-Ll，（v包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2，（vi包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3;或c通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的HVR-H1、HVR-H2、HVR-H3、HVR-L1、HVR-L2*HVR-L3。[0012]在一些实施方案中，抗体包含:a⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:6的HVR-Ll，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2，（iii包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3;或b⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:16的HVR-Ll，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2，iii包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3;或c通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的HVR-Ll、HVR-L2和HVR-L3。[0013]在一些实施方案中，抗体包含:a与氨基酸序列SEQIDNO:1或50具有至少95%序列同一性的VH序列；或b与氨基酸序列SEQIDN0:2具有至少95%序列同一性的VL序列;或c如（a中的VH序列和如⑹中的VL序列；或d与氨基酸序列SEQIDN0:9或49具有至少95%序列同一性的VH序列；或e与氨基酸序列SEQIDNO:10具有至少95%序列同一性的VL序列;或f如⑹中的VH序列和如e中的VL序列；或g与通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的VH序列具有至少95%序列同一性的VH序列;或h与通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的VL序列具有至少95%序列同一性的VL序列;或i如g中的VH序列和如⑹中的VL序列。[00M]在一些实施方案中，抗体包含具有氨基酸序列SEQIDNO:1或50的VH序列、具有氨基酸序列SEQIDN0:9或49的VH序列、或通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的VH序列。在一些实施方案中，抗体包含具有氨基酸序列SEQIDN0:2的VL序列、具有氨基酸序列SEQIDNO:10的VL序列、或通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤75093IDl.6.7产生的抗体的VL序列。在一些实施方案中，抗体包含a具有氨基酸序列SEQIDNO:1或50的VH序列和具有氨基酸序列SEQIDNO:2的VL序列；或⑹具有氨基酸序列SEQIDNO:9或49的VH序列和具有氨基酸序列SEQIDNO:10的VL序列;或c通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的VH序列和通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的VL序列。[0015]在一些实施方案中，提供一种结合PMEL17的分离抗体，其中所述抗体包含:ai包含氨基酸序列SEQIDN0:22的HVR-H3，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:25的HVR-L3,和iii包含氨基酸序列SEQIDN0:21的HVR-H2;或b⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:20的HVR-Hl，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:21的HVR-H2,和（iii包含氨基酸序列SEQIDNO:22的HVR-H3;或c⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:23的HVR-Ll，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:24的HVR-L2，（iii包含氨基酸序列SEQIDN0:25的HVR-L3;或d⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:20的HVR-Hl，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:21的HVR-H2,和（iii包含氨基酸序列SEQIDN0:22的HVR-H3，（iv包含氨基酸序列SEQIDN0:23的HVR-Ll，（v包含氨基酸序列SEQIDN0:24的HVR-L2，（vi包含氨基酸序列SEQIDN0:25的HVR-L3;或e与氨基酸序列SEQIDNO:11或51具有至少95%序列同一性的VH序列;或f与氨基酸序列SEQIDNO:12具有至少95%序列同一性的VL序列；或g如（e中的VH序列和如（f中的VL序列；或h具有氨基酸序列SEQIDNO:11或51的VH序列；或i具有氨基酸序列SEQIDNO:12的VL序列；或j如⑹中的VH序列和如⑴中的VL序列。在一些实施方案中，抗体为IgGl、IgG2a或IgG2b抗体。[0016]在一些实施方案中，提供一种编码任何上述抗体的分离核酸。在一些实施方案中，提供一种包含所述核酸的宿主细胞。在一些实施方案中，提供一种产生抗体的方法，所述方法包括培养宿主细胞以使抗体得以产生。[0017]在一些实施方案中，提供一种免疫缀合物。在一些这类实施方案中，所述免疫缀合物包含任何上述抗体和细胞毒性剂。在一些实施方案中，免疫缀合物具有式Ab-L-Dp，其中：（aAb为如权利要求1至16中任一项项所述的抗体；（bL为接头；（CD为选自美登木素maytansinoid、奥瑞斯他汀auristatin、卡里奇霉素（calicheamicin、卩比略并苯并二氮杂卓pyrrolobenzodiazepine和奈莫柔比星nemorubicin衍生物的药物;并且⑹p在1-8的范围内。[0018]在一些实施方案中，D为奥瑞斯他汀。在一些这类实施方案中，D具有式De[0019][0020]并且其中R2和R6各自为甲基，R3和R4各自为异丙基，R5为H，R7为仲丁基，各R8独立地选自CH3、O-CH3、OH和H;R9为H;并且R18为-CR82-CR82-芳基。[0021]在一些实施方案中，药物⑼为MMAE。[0022]在一些实施方案中，D为式A吡咯并苯并二氮杂卓：[0023][0024]其中点线指示任选地在Cl与C2或C2与C3之间存在双键；[0025]R2独立地选自H、0H、=0、=CH2、CN、R、OR、=CH-Rd、=CRd2、O-SO2-R、CO2R和⑶R，并且任选地进一步选自卤基或二卤基，其中Rd独立地选自R、CO2R、COR、CHO、CO2H和卤基；[0026]R6和R9独立地选自H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR’、NO2、Me3Sn和卤基；[0027]R7独立地选自H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR’、N〇2、Me3Sr^P*S;[0028]Q独立地选自0、S和NH;[0029]R11为H或R或其中Q为0、SO3M，其中M为金属阳离子；[0030]R和R’各自独立地选自任选取代的C1-S烷基、C3-8杂环基和C5-2Q芳基，并且任选地就基团NRR’而言，R和R’连同其所连接的氮原子一起形成任选取代的4、5、6或7元杂环；[0031]R12、R16、R19和R17分别是如对于R2、R6、R9和R7所定义；[0032]R〃为C3-12亚烷基，该链可间杂有一或多个杂原子和或任选取代的芳族环;并且[0033]X和X’独立地选自0、S和N⑻。[0034]在一些这类实施方案中，D具有结构：[0035][0036]其中η为0或1。[0037]在一些实施方案中，D具有选自以下的结构：[0038][0039]其中r4pre”各自独立地选自H或Rd，其中Rd独立地选自R、CO2R、⑶R、CHO、⑶2Η和卤基；[0040]其中Ar1和Ar2各自独立地为任选取代的C5—2Q芳基;并且[0041]其中η为0或1。[0042]在一些实施方案中，D为奈莫柔比星衍生物。在一些这类实施方案中，D具有选自以下的结构：[0043][0044]在一些实施方案中，接头可由蛋白酶裂解。在一些这类实施方案中，接头包含val-cit二肽或Phe-Lys二肽。在一些实施方案中，接头具有酸不稳定性。在一些这类实施方案中，接头包含腙。[0045]在一些实施方案中，免疫缀合物具有式：[0046][0047]其中S为硫原子。[0048]在一些实施方案中，免疫缀合物具有式：[0049][0050]在一些实施方案中，免疫缀合物具有选自以下的式：[0051][0052][0053]在上述免疫缀合物的一些实施方案中，p在2-5的范围内。[0054]在一些实施方案中，提供一种免疫缀合物，其中所述免疫缀合物包含含有以下的抗体:a⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:3的HVR-Hl，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:4的HVR-H2，（iii包含氨基酸序列SEQIDN0:5的HVR-H3，（iv包含氨基酸序列SEQIDN0:6的HVR-Ll，（v包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2，（vi包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3;或b⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:13的HVR-Hl，（ii包含氨基酸序列SEQIDNO:14的HVR-H2,和iii包含氨基酸序列SEQIDN0:15的HVR-H3，（iv包含氨基酸序列SEQIDN0:16的HVR-Ll，（v包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2，（vi包含氨基酸序列SEQIDNO:8的HVR-L3;或c通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的HVR-Hl、HVR-H2、HVR-H3、HVR-Ll、HVR-L2和HVR-L3。[0055]在一些实施方案中，提供一种免疫缀合物，其中该免疫缀合物包含含有以下的抗体：（a具有氨基酸序列SEQIDNO:1或50的VH序列和具有氨基酸序列SEQIDN0:2的VL序列；或⑹具有氨基酸序列SEQIDN0:9或49的VH序列和具有氨基酸序列SEQIDNO:10的VL序列;或c通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的VH序列和通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的VL序列。[0056]在一些实施方案中，提供药物制剂。在一些这类实施方案中，所述药物制剂包含本文所述的抗体和药学上可接受的载体。在一些实施方案中，药物制剂进一步包含另一治疗剂。[0057]在一些实施方案中，提供治疗患有PMEL17阳性癌症的个体的方法。在一些这类实施方案中，所述方法包括向个体施用有效量的包含结合PMEL17的抗体的免疫缀合物。在一些这类实施方案中，所述方法包括向个体施用有效量的包含结合PMEL17的胞外结构域的抗体的免疫缀合物。在一些这类实施方案中，所述方法包括向个体施用有效量的包含本文所述的抗体的免疫缀合物。在一些实施方案中，PMEL17阳性癌症为黑素瘤。在一些实施方案中，治疗患有PMEL17阳性癌症的个体的方法进一步包括向该个体施用另一治疗剂。[0058]在一些实施方案中，提供治疗患有PMEL17阳性癌症的个体的方法，其中所述PMEL17阳性癌症对第一治疗剂具有抗性。在一些实施方案中，所述方法包括向个体施用有效量的包含结合PMEL17的抗体的免疫缀合物。在一些实施方案中，PMEL17阳性癌症为黑素瘤。在一些实施方案中，第一治疗剂包含结合除PMEL17以外的抗原的第一抗体。在一些实施方案中，第一治疗剂为包含结合除PMEL17以外的抗原的第一抗体和第一细胞毒性剂的第一免疫缀合物。在一些实施方案中，第一抗体结合选自内皮素B受体ETBR、酪氨酸酶相关蛋白质ITYRPl、细胞毒性T淋巴细胞抗原4CTLA-4和糖蛋白匪BGPNMB的抗原。在一些实施方案中，第一抗体结合ETBR。在一些实施方案中，第一抗体为hu5E9.V1。在一些实施方案中，第一免疫缀合物为hu5E9.vl-MC-val-cit-PAB-MMAE。在一些实施方案中，第一细胞毒性剂与包含结合PMEL17的抗体的免疫缀合物的细胞毒性剂不同。在一些这类实施方案中，第一细胞毒性剂为MMAE并且包含结合PMEL17的抗体的免疫缀合物的细胞毒性剂是选自卡里奇霉素、吡咯并苯并二氮杂卓和奈莫柔比星衍生物。在一些实施方案中，包含结合PMEL17的抗体的免疫缀合物的细胞毒性剂是选自吡咯并苯并二氮杂卓和奈莫柔比星衍生物。[0059]在一些实施方案中，提供一种治疗患有PMEL17阳性癌症的个体的方法，其中所述方法包括向该个体施用有效量的与包含结合ETBR的抗体的第二免疫缀合物组合的本文所述的第一免疫缀合物。在一些实施方案中，结合ETBR的抗体包含含有序列SEQIDN0:33的HVRHl、含有序列SEQIDNO:34的HVRH2、含有序列SEQIDNO:35的HVRH3、含有序列SEQIDN0:36的HVRL1、含有序列SEQIDN0:37的HVRL2、和含有序列SEQIDN0:38的HVRL3。在一些实施方案中，结合ETBR的抗体包含含有序列SEQIDN0:40的重链可变区和含有序列SEQIDNO:39的轻链可变区。在一些实施方案中，第一免疫缀合物包含选自奥瑞斯他汀、吡咯并苯并二氮杂卓和奈莫柔比星衍生物的细胞毒性剂，并且第二免疫缀合物包含选自奥瑞斯他汀、吡咯并苯并二氮杂卓和奈莫柔比星衍生物的细胞毒性剂。在一些实施方案中，第一免疫缀合物包含选自吡咯并苯并二氮杂卓和奈莫柔比星衍生物的细胞毒性剂，并且第二免疫缀合物包含奥瑞斯他汀。在一些实施方案中，第二免疫缀合物包含MMAE。在一些这类实施方案中，第二免疫缀合物包含含有MC-val-cit-PAB-MMAE的接头-药物部分。在一些实施方案中，第二免疫缀合物为hu5E9.vl-MC-val-cit-PAB-MMAE。在任何上述实施方案中，PMEL17阳性癌症可为黑素瘤。在一些实施方案中，PMELl7阳性癌症也为ETBR阳性的。[0060]在一些实施方案中，提供一种抑制PMEL17阳性细胞增殖的方法。在一些这类实施方案中，所述方法包括在容许本文所述的免疫缀合物结合细胞表面上的PMEL17的条件下使细胞暴露于免疫缀合物，借此抑制细胞增殖。在一些实施方案中，细胞为黑素瘤细胞。[0061]在一些实施方案中，提供一种缀合于标记的结合PMEL17的抗体。在一些实施方案中，标记为正电子发射体。在一些这类实施方案中，正电子发射体为89Zr。[0062]在一些实施方案中，提供一种检测生物样品中的人PMEL17的方法。在一些实施方案中，所述方法包括使生物样品与本文所述的抗PMELl7抗体在容许所述抗PMELl7抗体结合天然存在的人PMEL17的条件下接触。在一些实施方案中，所述方法进一步包括检测在抗PMEL17抗体与生物样品中的天然存在的人PMEL17之间是否形成复合物。在一些实施方案中，抗PMEL17抗体为通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体。在一些实施方案中，抗体包含a⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:3的HVR-Hl，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:4的HVR-H2，（iii包含氨基酸序列SEQIDN0:5的HVR-H3，（iv包含氨基酸序列SEQIDN0:6的HVR-Ll，（v包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2，（vi包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3;或b⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:13的HVR-Hl，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:14的HVR-H2,和（iii包含氨基酸序列SEQIDN0:15的HVR-H3，（iv包含氨基酸序列SEQIDN0:16的HVR-Ll，（v包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2，（vi包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3;或c通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的狀1?-!11、取1?-!12、狀1?-!13、狀1?-1^1、取1?-1^和狀1?-1^3。在一些实施方案中，生物样品为黑素瘤样品。[0063]在一些实施方案中，提供一种检测PMEL17阳性癌症的方法。在一些这类实施方案中，所述方法包括⑴向患有或疑似患有PMEL17阳性癌症的受试者施用经标记抗PMEL17抗体，其中所述经标记抗PMEL17抗体包含本文所述的抗PMEL17抗体，和（ii检测所述受试者中的所述经标记抗PMEL17抗体，其中检测到所述经标记抗PMEL17抗体指示在所述受试者中存在PMEL17阳性癌症。在一些这类实施方案中，经标记抗PMEL17抗体包含缀合于正电子发射体的抗PMELl7抗体。在一些实施方案中，正电子发射体为89Zr。[0064]附图简述[0065]图1示出㈧人PMEL17在各种组织中的基因表达水平的图形表示，和⑻人PMEL17在各种人细胞系中的含量的图形表示，如实施例A中所述。[0066]图2A和图2B示出抗体8G3、17A9和15F2的㈧轻链和⑻重链可变区序列的比对。[0067]图3A至图3D示出77E6A和B、17A9C和D和31D1D的表位定位，如实施例D中所述。[0068]图4示出17A9在黑素瘤细胞中的内化，如实施例G中所述。[0069]图5示出通过递增浓度的17A9ADC杀死各种PMEL17+黑素瘤细胞系，如实施例I中所述。[0070]图6示出㈧31D1染色在正常皮肤中的分布，（B通过FACS测定的正常黑素细胞和黑素瘤细胞系SK-MEL-5的17A9染色，和⑹17A9对正常黑素细胞的IC50比17A9对黑素瘤细胞系的IC50高接近100倍，如实施例J中所述。[0071]图7示出A各PMEL17染色水平的示例性染色和⑻一组人黑素瘤样品的IHC计分，如实施例K中所述。[0072]图8示出17A9ADC在SK-MEL-23细胞系异种移植物中的功效，如实施例L中所述。[0073]图9A和图9B示出人、小鼠、大鼠和食蟹猴PMELl7的比对，如实施例F中所述。[0074]图10示出（A用UACC-257X2.2黑素瘤细胞接种并且施用不同剂量的抗ETBR-Vc-MMAE“5E9vl-vcE”）的小鼠中随时间变化的肿瘤体积，和⑻亲本和抗性UACC-257X2.2细胞在递增浓度的抗ETBR-vc-MMAEADC存在下的体外生长，如实施例M中所述。[0075]图11示出ETBRA和B;也称为“EDNRB”）和PMEL17C和D在亲本和抗性体内（A和C和体外B和D源性UACC-257X2.2细胞中的表达，如实施例M中所述。[0076]图12示出A亲本UACC-257X2.2细胞，⑻体内源性抗性UACC-257X2.2细胞，和⑹体外源性抗性UACC-257X2.2细胞对递增浓度的抗ETBR-vc-MMAE、抗PMELl7-vc-MMAE和抗gD-vc-MMAE的敏感性，如实施例M中所述。[0077]图13示出A亲本UACC-257X2.2细胞，⑻体内源性抗性UACC-257X2.2细胞，和⑹体外源性抗性UACC-257X2.2细胞对递增浓度的抗ETBR-PNU、抗PMEL17-PNU和抗gD-PNU的敏感性，如实施例M中所述。[0078]图14示出A亲本UACC-257X2.2细胞，⑻体内源性抗性UACC-257X2.2细胞，和⑹体外源性抗性UACC-257X2.2细胞对递增浓度的抗ETBR-vc-PNU、抗PMEL17-VC-PNU和抗gD-VC-PNU的敏感性，如实施例M中所述。[0079]图15示出包括以下的各种抗体-药物缀合物的结构：（AUb-MC-val-cit-PAB-MMAE;⑻Ab-MC-缩醛-PNU-159682;⑹Ab-MC-val-cit-PAB-PNU-159682;⑼Ab-MC-val-cit-PAB-PBD;和⑹Ab-PNU-159682。[0080]本发明某些实施方案的详述[0081]I.定义[0082]出于本文的目的，“受体人框架”为以下框架:其包含源于如以下定义的人免疫球蛋白框架或人共有框架的轻链可变结构域VL框架或重链可变结构域VH框架的氨基酸序列。“源于”人免疫球蛋白框架或人共有框架的受体人框架可包含其相同氨基酸序列，或其可含有氨基酸序列变化。在一些实施方案中，氨基酸变化数目为10或以下、9或以下、8或以下、7或以下、6或以下、5或以下、4或以下、3或以下、或2或以下。在一些实施方案中，VL受体人框架在序列方面与VL人免疫球蛋白框架序列或人共有框架序列相同。[0083]“亲和力”是指分子例如抗体）的单一结合位点与其结合配偶体例如抗原之间的非共价相互作用的总和的强度。除非另外指示，否则如本文所用，“结合亲和力”是指反映结合对例如抗体和抗原）的成员之间的1:1相互作用的内在结合亲和力。分子X对其配偶体Y的亲和力可通常由解离常数Kd表示。亲和力可通过本领域已知的常见方法包括本文所述的那些进行测量。在下文中描述测量结合亲和力的特定说明性和示例性实施方案。[0084]“亲和力成熟”抗体是指相较于在一或多个高变区HVI?中不具有一或多个改变的亲本抗体，具有这类改变的抗体，这类改变会导致抗体对抗原的亲和力改进。[0085]术语“抗PMEL17抗体”和“结合PMEL17的抗体”是指能够以足以使抗体在靶向PMEL17时适用作诊断剂和或治疗剂的亲和力结合PMEL17的抗体。在一个实施方案中，抗PMEL17抗体结合无关非PMEL17蛋白质的程度小于抗体与PMEL17的结合的约10%，如例如通过放射免疫分析ΦΙΑ所测量。在某些实施方案中，结合PMEL17的抗体的解离常数例如HT8M或HT8M以下，例如HT8M至HT13M,例如HT9M至IT13M。在某些实施方案中，抗PMEL17抗体结合PMELl7的在来自不同物种的PMELl7中保守的表位。[0086]术语“抗体”在本文中以最广泛意义使用并且涵盖各种抗体结构，包括但不限于单克隆抗体、多克隆抗体、多特异性抗体例如双特异性抗体和抗体片段，只要它们展现所需抗原结合活性即可。[0087]“抗体片段”是指非完整抗体的分子，其包含完整抗体的一部分并且结合完整抗体所结合的抗原。抗体片段的实例包括但不限于?¥、？813、？313’、？313’-3!1、？313’）2;双抗体;线性抗体;单链抗体分子例如scFv;和由抗体片段形成的多特异性抗体。[0088]作为参照抗体的“结合相同表位的抗体”是指在竞争分析中使参照抗体与其抗原的结合受阻断50%或以上的抗体，并且反之，参照抗体在竞争分析中使所述抗体与其抗原的结合受阻断50%或以上。本文提供示例性竞争分析。[0089]术语“癌症”和“癌性”是指或描述哺乳动物的特征通常在于细胞生长增殖不受调控的生理病状。癌症的实例包括但不限于黑素瘤、癌、淋巴瘤例如霍奇金氏Hodgkin’s和非霍奇金氏淋巴瘤）、母细胞瘤、肉瘤和白血病。这类癌症的更具体实例包括鳞状细胞癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞状癌、腹膜癌、肝细胞癌、胃肠癌、胰腺癌、神经胶质瘤、子宫颈癌、卵巢癌、肝癌（livercancer、膀胱癌、肝细胞瘤、乳癌、结肠癌、结肠直肠癌、子宫内膜癌或子宫癌、唾液腺癌、肾脏癌、肝癌、前列腺癌、阴门癌、甲状腺癌、肝癌hepaticcarcinoma、白血病和其它淋巴增殖性病症以及各种类型的头颈部癌。[0090]术语“嵌合”抗体是指重链和或轻链的一部分源于特定来源或物种，而重链和或轻链的其余部分源于不同来源或物种的抗体。[0091]抗体的“类别”是指其重链所具有的恒定结构域或恒定区的类型。存在五个主要抗体类别：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，并且若干这类类别可进一步分成子类（同种型），例如IgGi、IgG2、IgG3、IgG4、IgAi和IgA2。对应于不同免疫球蛋白类别的重链恒定结构域分别称为α、δ、ε、γ和μ。[0092]如本文所用的术语“细胞毒性剂”是指抑制或阻止细胞功能和或导致细胞死亡或破坏的物质。细胞毒性剂包括但不限于放射性同位素例如At211、I131、I125、Y9、Re186、Re188、5!11153、81212、？32、？13212和1^的放射性同位素）；化学治疗剂或药物（例如甲氨蝶呤methotrexate、阿德力霉素adriamicin、长春花生物碱长春新碱vincristine、长春花碱vinblastine、依托泊苷etoposide、阿霉素doxorubicin、美法仑melphalan、丝裂霉素CmitomycinC、苯丁酸氮芥chlorambucil、道诺霉素daunorubicin或其它插入剂）；生长抑制剂;酶及其片段，诸如核分解酶;抗生素;细菌、真菌、植物或动物来源的毒素，诸如小分子毒素或酶活性毒素，包括其片段和或变异体;和以下公开的各种抗肿瘤剂或抗癌剂。[0093]“化学治疗剂”为适用于治疗癌症的化合物。化学治疗剂的实例包括烷基化剂，诸如噻替派thiotepa和环磷酰胺CYTOXAN^;烷基磺酸盐，诸如白消安busulfan、英丙舒凡（improsulfan和哌泊舒凡piposulfan;氮丙啶，诸如本多帕（benzodopa、卡巴醌carboquone、米特多帕（meturedopa和优多帕（uredopa;乙稀亚胺和甲基蜜胺methylamelamine，包括六甲蜜胺（altretamine、三乙稀蜜胺（triethylenemelamine、三乙稀磷酰胺（triethylenephosphoramide、三乙稀硫代磷酰胺triethylenethiophosphoramide和三轻甲基蜜胺（trimethylolomelamine;多聚乙酰acetogenin尤其是布拉它辛bullatacin和布拉它辛酮bullatacinone;δ-9_四氢大麻酷（tetrahydrocannabinol屈大麻酷（dronabinol，MARINOLk;β_拉帕醌beta-lapachone;拉帕醇（Iapachol;秋水仙碱（colchicine;桦木酸（betulinic8^1;喜树碱〇^11^丨0丨1163；!_11包括合成类似物拓扑替康〇1〇^0丨6〇31111¥€人]^〇11^1、CPT-Ii伊立替康（irinotecan，camptosar_ki、乙酰基喜树碱acetylcamptothecin、莫菪素（scopolectin和9-氨基喜树碱aminocamptothecin;苔藓抑素bryostatin;凯利他汀（callystatin;CC_1065包括其阿多来新adozelesin、卡折来新（carzelesin和比折来新（bizelesin合成类似物）；足叶草素podophyllotoxin;足叶草酸podophyllinicacid;替尼泊苷（teniposide;念珠藻素cryptophycin具体是念珠藻素1和念珠藻素8;多拉司他汀（dolastatin;倍癌霉素duocarmycin包括合成类似物KW-2189和CB1-TM1;软珊瑚醇eleutherobin;潘卡他汀pancratistatin;匍枝珊瑚醇（sarcodictyin;海绵抑制素（spongistatin;氮芥，诸如苯丁酸氮芥chlorambucil、萘氮芥chlornaphazine、氯磷酰胺cholophosphamide、雌氮芥（estramustine、异环磷酰胺（ifosfamide、二氯甲基二乙胺mechlorethamine、二氯甲基二乙胺氧化物盐酸盐、美法仑、新恩比兴（ηοVembichiη、苯芥胆甾醇phenesterine、泼尼莫司汀prednimustine、氯乙环磷酰胺（trofosfamide、尿喃啶氮芥（uracilmustard;亚硝基脲，诸如卡莫司汀（carmustine、卩比葡亚硝脲chlorozotocin、福莫司汀（fotemustine、洛莫司汀（Iomustine、尼莫司汀（nimustine和雷莫司汀ranimnustine;抗生素，诸如稀二炔抗生素例如卡里奇霉素，尤其卡里奇霉素γII和卡里奇霉素ωIl参见例如Agnew，ChemIntl.EcLEngl·,33:183-1861994;达内霉素（dynemicin，包括达内霉素A;埃斯培拉霉素（esperamicin;以及新制癌菌素neocarzinostatin发色团和相关色蛋白稀二炔抗生素发色团、阿克拉霉素aclacinomysin、方文线菌素（actinomycin、安曲霉素（authramycin、重氮丝氨酉爱azaserine、博莱霉素bleomycin、放线菌素Ccactinomycin、卡拉比星carabicin、洋红霉素carminomycin、嗜癌菌素carzinophilin、色霉素chromomycin、放线菌素Ddactinomycin、道诺霉素（daunorubicin、地托比星detorubicin、6_重氮基_5_氧代-L-正亮氨酸、阿霉素包括吗啉代-阿霉素、氰基吗啉代-阿霉素、2-啦咯啉基-阿霉素和脱氧阿霉素）、表柔比星epirubicin、依索比星esorubicin、伊达比星（idarubicin、麻西罗霉素marcellomycin、丝裂霉素mitomycin诸如丝裂霉素C、霉酷酸mycophenolicacid、诺加霉素nogalamycin、橄榄霉素（olivomycin、培洛霉素peplomycin、泊非霉素（porfiromycin、卩票呤霉素（puromycin、三铁阿霉素（quelamycin、罗多比星rodorubicin、链黑菌素（streptonigrin、链脲霉素（streptozocin、杀结核菌素tubercidin、乌苯美司ubenimex、净司他汀zinostatin、佐柔比星zorubicin;抗代谢物，诸如甲氨蝶呤和5-氟尿喃啶（5-FU;叶酸类似物，诸如二甲叶酸denopterin、甲氨蝶呤、蝶罗呤（pteropterin、三甲曲沙（trimetrexate;卩票呤类似物，诸如氟达拉滨fludarabine、6_疏基卩票呤（6-mercaptopurine、硫咪卩票呤（thiamiprine、硫鸟卩票呤thioguanine;喃啶类似物，诸如环胞苷ancitabine、阿扎胞苷azacitidine、6_氮尿苷（6-azauridine、卡莫氟（carmofur、阿糖胞苷（cytarabine、二脱氧尿苷dideoxyuridine、脱氧氟尿苷（doxifIuridine、依诺他滨（enocitabine、氟尿苷floxuridine;雄激素（androgen，诸如二甲睾酮（calusterone、屈他雄酮丙酸盐dromostanolonepropionate、环硫雄醇（epitiostanol、美雄焼mepitiostane、睾内酯（testolactone;抗肾上腺剂，诸如氨鲁米特aminoglutethimide、米托坦mitotane、曲洛司坦trilostane;叶酸folicacid补充剂，诸如弗罗林酸frolinicacid;乙酰葡醛酯（aceglatone;醛磷酰胺糖苷（aldophosphamideglycoside;氨基乙酰丙酸aminolevulinicacid;恩尿喃口定（eniluraci1;安口丫啶（amsacrine;倍曲布西bestrabucil;比生群bisantrene;依达曲沙（edatraxate;地佛法明（defofamine;地美可辛（demecoIcine;地卩丫醌（diaziquone;依洛尼塞（elfornithine;依利醋鞍elliptiniumacetate;埃博霉素（epothilone;依托格鲁（etoglucid;硝酸嫁galliumnitrate;轻基脲hydroxyurea;香燕多糖（Ientinan;洛尼代宁（Ionidainine;美登木素，诸如美登素maytansine和安丝菌素ansamitocin;米托胍腙mitoguazone;米托蒽醌（mitoxantrone;莫匹丹莫（mopidanmol;二胺硝卩丫啶（nitraerine;喷司他汀pentostatin;苯来美特（phenamet比柔比星（pirarubicin;洛索蒽醌Iosoxantrone;2-乙基酰肼；丙卡巴肼procarbazine;PSK®客糖复合物（JHSNaturalProducts，Eugene，OR;雷佐生razoxane;根霉素rhizoxin;西索菲兰（sizofiran;螺旋锗（spirogermanium;细交链抱菌酮酸（tenuazonicacid;三亚胺醌（triaziquone;2，2’，2〃-三氯三乙胺；单端孢霉稀（trichothecene尤其T-2毒素、维拉库林AverracurinA、杆孢菌素AroridinA和蛇形菌素（anguidine;乌拉坦（urethan;长春地辛VindesineELDISINE'FILDESlNk;达卡巴嗪（dacarbazine;甘露醇氮芥mannomustine;二溴甘露醇（mitobronitol;二溴卫矛醇（mitolactol;哌泊溴焼pipobroman;格塞图辛（gacytosine;阿拉伯糖苷（arabinoside“Ara_C”）；噻替派thiotepa;紫杉焼（taxoid，例如太平洋紫杉醇（paclitaxelTAXOL®;Bristol-MyersSquibbOncology，Princeton，N.J.、ABRAXANE™无聚氧乙稀蓖麻油（Cremophor-free的白蛋白工程化的太平洋紫杉醇纳米颗粒制剂（AmericanPharmaceuticalPartners,Schaumberg,Illinois和多西他赛（docetaxelTAXOTERE"Rhdne-Poulenc丨《orer,Antony,France;苯丁酉爱氮芥；吉西他滨gemcitabineGEMZAR";6-硫代鸟嘌呤（6-thioguanine;巯基嘌呤mercaptopurine;甲氨蝶呤；铀类似物，诸如顺铀（cisplatin和卡铀（carboplatin;长春花碱vinblastineVKLBAN®.;铀；依托泊苷VP-16;异环磷酰胺;米托蒽醌;长春新碱vincristineONCOVIN®;奥沙利铀（oxaliplatin;亚叶酸（Ieucovovin;长春瑞滨（vinorelbineNAVELBINE㊣）；诺消灵（novantrone;依达曲沙（edatrexate;道诺霉素；氨基蝶呤（aminopterin;伊班膦酸盐（ibandronate;拓扑异构酶抑制剂RFS2000;二氟甲基鸟胺酸DMFO;类视色素retinoid，诸如视黄酸retinoicacid;卡培他滨（capecitabineXELODA®:任何上述各物的药学上可接受的盐、酸或衍生物；以及上述各物中两种或更多种的组合，诸如CHOP，即环磷酰胺、阿霉素、长春新碱和泼尼松龙prednisolone的组合疗法的缩写；CVP，即环磷酰胺、长春新碱和泼尼松龙的组合疗法的缩写;和F0LF0X，即用奥沙利铂EL0XATIN™与5-FU和亚叶酸组合进行的治疗方案的缩写。[0094]“效应子功能”是指可归因于抗体的Fc区的那些生物活性，其随抗体同种型而变化。抗体效应子功能的实例包括:Clq结合和补体依赖性细胞毒性CDC;Fc受体结合;抗体依赖性细胞介导的细胞毒性ADCC;吞噬作用;细胞表面受体例如B细胞受体的下调;和B细胞活化。[0095]药剂例如药物制剂）的“有效量”是指在各种剂量下并且持续必要时间段，有效实现所需治疗或防治结果的量。[0096]术语“表位”是指抗体所结合的在抗原分子上的特定位点。[0097]本文术语“Fc区”用于定义免疫球蛋白重链的含有至少一部分恒定区的C末端区域。该术语包括天然序列Fc区和变体Fc区。在一个实施方案中，人IgG重链Fc区从Cys226或Pr〇230延伸至重链的羧基末端。然而，Fc区的C末端赖氨酸Lys447可以或可以不存在。除非本文另外规定，否则Fc区或恒定区中的氨基酸残基的编号是根据EU编号系统，也称为EU索弓I，如Kabat等，SequencesofProteinsofImmunologicalInterest，第5版PublicHealthService，NationalInstitutesofHealth,Bethesda，MD，1991中所述。[0098]“框架”或“FR”是指除高变区（HVR残基以外的可变结构域残基。可变结构域的FR通常由四个FR结构域组成:FRI、FR2、FR3和FR4。因此，HVR和FR序列通常按以下顺序出现在VH或VL中：FRl-HlLI-FR2-H2L2-FR3-H3L3-FR4。[0099]术语“全长抗体”、“完整抗体”和“全抗体”在本文中可互换使用来指代具有实质上与天然抗体结构类似的结构或具有含有如本文定义的Fc区的重链的抗体。[0100]术语“PMEL17的糖基化形式”是指通过添加碳水化合物残基而被转译后修饰的PMELl7的天然存在的形式。[0101]术语“宿主细胞”、“宿主细胞系”和“宿主细胞培养物”可互换使用并且是指其中已引入外源性核酸的细胞，包括这类细胞的子代。宿主细胞包括“转化体”和“转化细胞”，其包括初级转化细胞和源于其的子代而不考虑继代数目。子代在核酸内含物方面可能不完全与母细胞相同，而是可能含有突变。本文包括具有如在原始转化细胞中所筛选或选择的相同功能或生物活性的突变子代。[0102]“人抗体”为具有某一氨基酸序列的抗体，所述氨基酸序列对应于由人或人细胞产生或源于利用人抗体谱系或其它人抗体编码序列的非人来源的抗体的氨基酸序列。人抗体的此定义明确排除包含非人抗原结合残基的人源化抗体。[0103]“人共有框架”为代表在人免疫球蛋白VL或VH框架序列的选择中最通常存在的氨基酸残基的框架。一般而言，人免疫球蛋白VL或VH序列是选自可变结构域序列的亚组。一般而言，序列亚组为如Kabat等，SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第5版，NIHPublication91-3242，BethesdaMD1991,第1-3卷中的亚组。在一个实施方案中，对于VL，亚组为如Kabat等（上文）中的亚组κΐ。在一个实施方案中，对于VH，亚组为如Kabat等上文）中的亚组III。[0104]“人源化”抗体是指包含来自非人HVR的氨基酸残基和来自人FR的氨基酸残基的嵌合抗体。在某些实施方案中，人源化抗体将包含至少一个并且通常两个可变结构域的实质上全部，其中全部或实质上全部HVR例如CDR对应于非人抗体的HVR，并且全部或实质上全部FR对应于人抗体的FR。人源化抗体任选地可包含源于人抗体的抗体恒定区的至少一部分。例如非人抗体的抗体的“人源化形式”是指已经受人源化的抗体。[0105]如本文所用的术语“高变区”或“HVR”是指抗体可变结构域的在序列方面高度可变和或形成结构确定环（“高变环”）的各区域。一般而言，天然四链抗体包含六个HVR;三个在VH中（H1、H2、H3，并且三个在VL中（L1、L2、L3AVR通常包含来自高变环的氨基酸残基和或来自“互补决定区”（CDR的氨基酸残基，后者具有最高序列可变性和或涉及于抗原识别中。示例性高变环存在于氨基酸残基26-32仏1、5〇-52仏2、91-96仏3、26-32〇11、53-55H2和96-101H3处。（Chothia和Lesk,J.Mol.Biol.196:901-9171987。）示例性CDRCDR-L1、CDR-L2、CDR-L3、CDR-Hl、CDR-H2和CDR-H3存在于Ll的氨基酸残基24-34、L2的氨基酸残基50-56、L3的氨基酸残基89-97、Η1的氨基酸残基31-35B、H2的氨基酸残基50-65和H3的氨基酸残基95-102处。（Kabat等，SequencesofProteinsofImmunologicalInterest，第5版PublicHealthService,NationalInstitutesofHealth,Bethesda,MD1991。）除VH中的⑶Rl之外，CDR通常包含形成高变环的氨基酸残基。CDR也包含作为接触抗原的残基的“特异性决定残基”或“SDR”ADR含在CDR的称为缩短CDR或a-CDR的区域内。示例性a-CDRa-CDR-Ll、a-CDR-L2、a-CDR-L3、a-CDR-Hl、a-CDR-H2和a-CDR-H3存在于Ll的氨基酸残基31-34、L2的氨基酸残基50-55、L3的氨基酸残基89-96、Η1的氨基酸残基31-35B、H2的氨基酸残基50-58和H3的氨基酸残基95-102处。（参见Almagro和Fransson，Front.Biosci.13:1619-16332008。）除非另外指示，否则HVR残基和可变结构域中的其它残基例如FR残基在本文中是根据Kabat等上文加以编号。[0106]“免疫缀合物”为缀合于一或多个异源分子包括但不限于细胞毒性剂的抗体。[0107]“个体”或“受试者”为哺乳动物。哺乳动物包括但不限于驯养动物例如牛、绵羊、猫、狗和马）、灵长类动物例如人和非人灵长类动物，诸如猴）、兔和啮齿动物例如小鼠和大鼠）。在某些实施方案中，个体或受试者为人。[0108]“分离抗体”为已与天然环境的组分分离的抗体。在一些实施方案中，将抗体纯化至大于95%或99%纯度，如通过例如电泳（例如SDS-PAGE、等电聚焦（IEF、毛细管电泳或色谱法（例如离子交换或反相HPLC所测定。对于评定抗体纯度的方法的评述，参见例如Flatman等，J.Chromatogr.B848:79-872007。[0109]“分离核酸”是指已与天然环境的组分分离的核酸分子。分离核酸包括通常含有核酸分子的细胞中含有的核酸分子，但核酸分子是存在于染色体外或存在于不同于其天然染色体位置的染色体位置处。[0110]“编码抗PMEL17抗体的分离核酸”是指一个或多个编码抗体重链和轻链或其片段）的核酸分子，包括在单一载体或各别载体中的此这类核酸分子和存在于宿主细胞中的一个或多个位置处的此这类核酸分子。[0111]如本文所用的术语“PMEL17”是指任何天然PMEL17。除非另外指示，否则该术语包括来自任何脊椎动物来源的PMEL17，所述脊椎动物来源包括哺乳动物，诸如灵长类动物例如人和食蟹猴）；和啮齿动物例如小鼠和大鼠）。该术语涵盖“全长”未加工PMEL17以及由在细胞中加工所产生的任何形式的PMEL17。该术语也包括PMEL17的天然存在的变异体，例如剪接变体或等位基因变体。具有信号序列氨基酸1-24的示例性人PMEL17前蛋白原的氨基酸序列显示于SEQIDNO:26中。示例性人PMEL17前蛋白的氨基酸序列显示于SEQIDNO:27中。示例性食蟹猴PMEL17的预测序列无信号序列）显示于SEQIDNO:28中。具有信号序列氨基酸1-25和无信号序列的示例性大鼠PMEL17的氨基酸序列分别显示于SEQIDN0:29和30中。具有信号序列氨基酸1-25和无信号序列的示例性小鼠PMEL17的氨基酸序列分别显示于SEQIDNO:31和32中。[0112]术语“PMEL17阳性癌症”是指包含在表面上表达包括短暂表达PMEL17的细胞的癌症。[0113]术语“PMEL17阳性细胞”是指在表面上表达PMEL17的细胞。[0114]如本文所用的术语“单克隆抗体”是指从实质上均质抗体的群体获得的抗体，即除可能的变异抗体例如含有天然存在的突变或在单克隆抗体制备物的产生期间产生的突变，这类变体通常以少量存在之外，构成该群体的单个抗体相同和或结合相同表位。与通常包括针对不同决定子表位的不同抗体的多克隆抗体制备物不同，单克隆抗体制备物的各单克隆抗体是针对抗原上的单一决定子。因此，修饰语“单克隆”指示如自实质上均质抗体群体获得的抗体的特性，并且不应解释为需要通过任何特定方法来产生抗体。例如，欲根据本发明使用的单克隆抗体可通过多种技术制备，所述技术包括但不限于杂交瘤方法、重组DNA方法、噬菌体展示方法和利用含有全部或一部分人免疫球蛋白基因座的转基因动物的方法，这类方法和制备单克隆抗体的其它示例性方法在本文中加以描述。[0115]“裸抗体”是指未缀合于异源部分例如细胞毒性部分或放射性标记的抗体。裸抗体可存在于药物制剂中。[0116]“天然抗体”是指具有不同结构的天然存在的免疫球蛋白分子。例如，天然IgG抗体为约150，000道尔顿的杂四聚糖蛋白，由经二硫键键合的两个相同轻链和两个相同重链构成。从N末端至C末端，各重链具有可变区（VH，也称为可变重结构域或重链可变结构域，随后为三个恒定结构域CH1、CH2和CH3。类似地，从N末端至C末端，各轻链具有可变区（VL，也称为可变轻结构域或轻链可变结构域，随后为恒定轻CL结构域。抗体的轻链可基于其恒定结构域的氨基酸序列指定为称为κ和λ的两种类型之一。[0117]术语“包装插页”用于指代惯常包括在治疗产品的商业包装中的说明书，其含有关于适应症、用法、剂量、给药、组合疗法、禁忌症和或涉及这类治疗产品的使用的警告的信息。[0118]关于参照多肽序列的“氨基酸序列同一性百分比（％”定义为在比对序列并且必要时引入间隙以实现最大序列同一性百分比，并且不考虑任何保守性取代作为序列同一性的一部分之后，候选序列中与参照多肽序列中的氨基酸残基相同的氨基酸残基的百分比。出于确定氨基酸序列同一性百分比的目的的比对可以本领域技术人员已知的多种方式实现，所述方式为例如使用可公开获得的计算机软件，诸如BLAST、BLAST-2、ALIGN或MegalignDNASTAI?软件。本领域技术人员可确定适用于比对序列的参数，包括为所比较的序列的全长，实现最大对准所需的任何算法。然而，出于本文目的，使用序列比较计算机程序ALIGN-2产生氨基酸序列同一"性％数值。ALIGN-2序列比较计算机程序由Genentech公司创造，并且源代码已与用户文件一起在美国版权办公室U.S.CopyrightOffice，WashingtonD.C.,20559备案，其中其在美国版权登记号TXU510087下注册。ALIGN-2程序可公开从Genentech公司（SouthSanFrancisco，California获得，或可自源代码编译。ALIGN-2程序应经编译以在UNIX操作系统包括数字UNIXV4.0D上使用。所有序列比较参数皆由ALIGN-2程序设置并且不改变。[0119]在ALIGN-2用于氨基酸序列比较的情况下，给定氨基酸序列A对于、与或相对于给定氨基酸序列B的氨基酸序列同一性％其或者可措词为给定氨基酸序列A具有或包含对于、与或相对于给定氨基酸序列B的某一氨基酸序列同一性％是如下进行计算：[0120]100\分数父八[0121]其中X为通过序列比对程序ALIGN-2在该程序进行A与B比对时计分为相同匹配的氨基酸残基数，并且其中Y为B中的氨基酸残基总数。应了解当氨基酸序列A的长度不等于氨基酸序列B的长度时，A对于B的氨基酸序列同一性％将不等于B对于A的氨基酸序列同一性％。除非另外明确陈述，否则本文使用的所有氨基酸序列同一性％数值都是使用ALIGN-2计算机程序如就在先前段落中所述来获得。[0122]术语“药物制剂”是指以下制剂:其呈允许其中含有的活性成分的生物活性有效的形式，并且不含有对将施用制剂的受试者具有不可接受毒性的额外组分。[0123]“药学上可接受的载体”是指药物制剂中除活性成分以外的对受试者无毒的成分。药学上可接受的载体包括但不限于缓冲剂、赋形剂、稳定剂或防腐剂。[0124]如本文所用，“治疗（treatment”（及其语法变化形式，诸如“治疗（treat”或“治疗treating”）是指企图改变所治疗个体的天然病程，并且可为实现预防或在临床病变的过程期间进行的临床介入。合乎需要的治疗效应包括但不限于防止疾病发生或复发、减轻症状、减弱疾病的任何直接或间接病理学结果、防止转移、降低疾病进展速率、改善或缓解疾病状态和缓和或改良预后。在一些实施方案中，本发明的抗体用于延迟疾病发展或减缓疾病进展。[0125]术语“可变区”或“可变结构域”是指抗体重链或轻链的涉及抗体结合抗原的结构域。天然抗体的重链和轻链的可变结构域分别为VH和VL通常具有类似结构，其中各结构域包含四个保守框架区FR和三个高变区HVR。（参见例如Kindt等KubyImmunology,第6版，W.H.FreemanandCo.，第91页（2007。）单一VH或VL结构域可足以赋予抗原结合特异性。此外，结合特定抗原的抗体可使用来自结合该抗原的抗体的VH或VL结构域以分别筛选互补VL或VH结构域的文库来分离。参见例如Portolano等，J.Immunol.150:880-8871993;Clarkson等，Nature352:624-6281991。[0126]如本文所用的术语“载体”是指核酸分子，其能够使其所连接的另一核酸增殖。该术语包括呈自我复制核酸结构的载体，以及并入其已引入的宿主细胞的基因组中的载体。某些载体能够指导与其可操作地连接的核酸的表达。这类载体在本文中称为“表达载体”。[0127]“烷基”为含有正碳原子、仲碳原子、叔碳原子或环状碳原子的C1-C18-。实例为甲基Me、-CH3、乙基（EKH2CH3、1_丙基（n-Pr、正丙基、-CH2CH2CH3、2-丙基（i-Pr、异丙基、-CHCH32、1_丁基（n-Bu、正丁基、-CH2CH2CH2CH3、2-甲基丙基（i-Bu、异丁基、-CH2CHQfe2、2-丁基（s-Bu、仲丁基、-CHCH3CH2CH3、2-甲基丙基（t-Bu、叔丁基、-CCH33、1-戊基（正戊基、-CH2CH2CH2CH2CH3、2-戊基（-CHCH3CH2CH2CH3、3-戊基（-CHCH2CH32、2_甲基-2-丁基-CCH32CH2CH3、3_甲基-2-丁基-CHCH3CHCH32、3_甲基―1_丁基（_CH2CH2CHCH32、2-甲基_1-丁基（-CH2CHCH3CH2CH3、1_己基（_CH2CH2CH2CH2CH2CH3、2-己基（-CHCH3CH2CH2CH2CH3、3-己基（-CHCH2CH3CH2CH2CH3、2_甲基-2-戊基-CCH32CH2CH2CH3、3-甲基-2-戊基-CHCH3CHCH3CH2CH3、4-甲基-2-戊基（-CHCH3CH2CHCH32、3-甲基-3-戊基（-CCH3CH2CH32、2-甲基-3-戊基（-CHCH2CH3CHCH32、2，3-二甲基-2-丁基-CCH32CHCH32、3，3-二甲基-2-丁基-CHCH3CCH33o[0128]如本文所用的术语T1-C8烷基”是指具有1至8个碳原子的直链或支链饱和或不饱和烃。代表性uC1-C8烷基”包括但不限于-甲基、-乙基、-正丙基、-正丁基、-正戊基、-正己基、-正庚基、-正辛基、-正壬基和-正癸基；而支链C1-C8烷基包括但不限于-异丙基、-仲丁基、-异丁基、-叔丁基、-异戊基、2-甲基丁基，不饱和-：8烷基包括但不限于-乙烯基、-烯丙基、_1_丁稀基、_2_丁稀基、-异丁稀基、-1-戊稀基、_2_戊稀基、_3_甲基-1-丁稀基、_2_甲基_2_丁稀基、_2，3_二甲基_2_丁稀基、1-己基、2_己基、3_己基、-乙块基、-丙块基、-1-丁块基、_2_丁块基、-1-戊块基、_2_戊块基、_3_甲基-1-丁块基。Ci_C8烧基可以是未取代的或被一个或多个包括但不限于以下的基团取代^C1-C8烷基、-KC1-C8烷基）、-芳基、-C⑼R’、-OC⑼R’、-C0OR’、-C⑼NH2、-C⑼NHR’、-C⑼NR，）2-NHC⑼R’、-S03R’、-S02R’、-S0R’、-0H、_卤素、-N3、-NH2、-NHR’）、-NR’）2和-CN;其中各R’独立地选自K1-C8烷基和芳基。[0129]如本文所用的术语“CrCMS基”是指具有1至12个碳原子的直链或支链饱和或不饱和烃X1-C12烃基可以是未取代的或被一个或多个包括但不限于以下的基团取代^C1-C8烃基、-0-Ci-C8烃基）、_芳基、-C0R’、-OC⑼R’、-C0OR’、-C⑼NH2、-C0NHR’、-C⑼NR’）2-NHC⑼R’、-S03R’、_S⑼2R’、_S⑼R’、-0H、_卤素、-N3、-NH2、-NHR’）、-NR’）2和-CN;其中各R’独立地选自I-C1-C8烃基和芳基。[0130]如本文所用的术语uC1-C6烷基”是指具有1至6个碳原子的直链或支链饱和或不饱和烃。代表性uC1-C6烷基”包括但不限于-甲基、-乙基、-正丙基、-正丁基、-正戊基和-正己基；而支链Ci-C6烧基包括但不限于-异丙基、-仲丁基、-异丁基、-叔丁基、-异戊基和2_甲基丁基；不饱和C1-C6烷基包括但不限于-乙烯基、-烯丙基、-1-丁烯基、-2-丁烯基和-异丁烯基、_1_戊稀基、_2_戊稀基、_3_甲基-1-丁稀基、_2_甲基_2_丁稀基、_2，3_二甲基_2_丁稀基、1-己基、2-己基和3-己基。C1-C6烷基可以是未取代的或被一个或多个如上对于C1-C8烷基所述的基团取代。[0131]如本文所用的术语uC1-C4烷基”是指具有1至4个碳原子的直链或支链饱和或不饱和烃。代表性uC1-C4烷基”包括但不限于-甲基、-乙基、-正丙基、-正丁基；而支链C1-C4烷基包括但不限于-异丙基、-仲丁基、-异丁基、-叔丁基；不饱和C1-C4烷基包括但不限于-乙烯基、-稀丙基、_1_丁稀基、_2_丁稀基和-异丁稀基。C1-C4烧基可以是未取代的或被一个或多个如上对于C1-C8烷基所述的基团取代。[0132]“烷氧基”为单键键合于氧的烷基。示例性烷氧基包括但不限于甲氧基-OCH3和乙氧基-OCH2CH3。uC1-C^氧基”为具有1至5个碳原子的烷氧基。烷氧基可以是未取代的或被一个或多个如上对于烷基所述的基团取代。[0133]“烯基”为具有至少一个不饱和位点（即碳-碳Sp2双键）的含有正碳原子、仲碳原子、叔碳原子或环状碳原子的：2-：18烃。实例包括但不限于：乙烯或乙烯基-CH=CH2、烯丙基-CH2CH=CH2、环戊烯基-C5H7和5-己烯基-CH2CH2CH2CH2CH=Ch2。uC2-C8烯基”为具有至少一个不饱和位点（即碳-碳Sp2双键）的含有2至8个正碳原子、仲碳原子、叔碳原子或环状碳原子的烃。[0134]“炔基”为具有至少一个不饱和位点（即碳-碳sp三键）的含有正碳原子、仲碳原子、叔碳原子或环状碳原子的：2-：18烃。实例包括但不限于：乙炔基-C=CH和炔丙基-CH2C=CH。uC2-C8炔基”为具有至少一个不饱和位点（即碳-碳sp三键）的含有2至8个正碳原子、仲碳原子、叔碳原子或环状碳原子的烃。[0135]“亚烷基”是指具有1-18个碳原子并且具有通过从母体烷烃的同一或两个不同碳原子移除两个氢原子所获得的两个单价基团中心的饱和支链或直链或环状烃基团。典型亚烷基包括但不限于：亚甲基（-CH2-、1，2-乙基-CH2CH2-、1，3-丙基-CH2CH2CH2-、1，4-丁基（-CH2CH2CH2CH2-等。[0136]uC1-Ciq亚烷基”为具有式-CH2no-的直链饱和烃基团。C1-Ciq亚烷基的实例包括亚甲基、乙烯、亚丙基、亚丁基、亚戊基、亚己基、亚庚基、亚辛基、亚壬基和亚癸基。[0137]“亚烯基”是指具有2-18个碳原子并且具有通过从母体烯烃的同一或两个不同碳原子移除两个氢原子所获得的两个单价基团中心的不饱和支链或直链或环状烃基团。典型亚烯基包括但不限于：1，2-乙烯-CH=CH-。[0138]“亚炔基”是指具有2-18个碳原子并且具有通过从母体炔烃的同一或两个不同碳原子移除两个氢原子所获得的两个单价基团中心的不饱和支链或直链或环状烃基团。典型亚炔基包括但不限于:亚乙炔基-C=C-、炔丙基-CH2C=C-和4-戊炔基-CH2CH2CH2C=C-〇[0139]“芳基”是指碳环芳族基团。芳基的实例包括但不限于苯基、萘基和蒽基。碳环芳族基团或杂环芳族基团可以是未取代的或被一个或多个包括但不限于以下的基团取代C8烷基、-O-Ci-C8烷基）、_芳基、-C⑼R’、-OCOR’、-C⑼OR’、-C⑼NH2、-C⑼NHR’、-CONR’）2-NHC⑼R’、-S⑼2R’、-S⑼R’、-0H、-卤素、-N3、-NH2、-NHR’）、-NR’）2和-CN;其中各R’独立地选自K1-C8烷基和芳基。[0140]uC5-C2q芳基”为在碳环芳族环中具有5至20个碳原子的芳基。C5-C2q芳基的实例包括但不限于苯基、萘基和蒽基X5-C2q芳基可如上对于芳基所述被取代或未被取代。uC5-C14芳基”为在碳环芳族环中具有5至14个碳原子的芳基。C5-C14芳基的实例包括但不限于苯基、萘基和蒽基。C5-C14芳基可如上对于芳基所述被取代或未被取代。[0141]“亚芳基”为如以下结构中所示，具有两个共价键并且可呈邻位、间位或对位构型的芳基：[0142][0143]其中苯基可以是未取代的或被多达四个包括但不限于以下的基团取代^C1-C8烷基、-〇-：1-〇8烷基）、-芳基、-^〇1?’、-〇：〇1?’、-^〇〇1?’、-^〇冊2、-^〇冊1?’、-^〇0R’）2-NHC⑼R’、-S⑼2R’、-S⑼R’、-0H、-卤素、-N3、-NH2、-NHR’）、-NR’）2和-CN;其中各R’独立地选自K1-C8烷基和芳基。[0144]“芳基烷基”是指其中一个键合于碳原子通常为末端或Sp3碳原子的氢原子被芳基置换的无环烷基。典型芳基烷基包括但不限于苯甲基、2-苯基乙-1-基、2-苯基乙烯-1-基、蔡基甲基、2_蔡基乙-1-基、2_蔡基乙稀-1-基、蔡并苯甲基、2_蔡并苯基乙-1-基等。芳基烷基包含6至20个碳原子，例如芳基烷基的烷基部分包括烷基、烯基或炔基为1至6个碳原子并且芳基部分为5至14个碳原子。[0145]“杂芳基烷基”是指其中一个键合于碳原子通常为末端或Sp3碳原子的氢原子被杂芳基置换的无环烷基。典型杂芳基烷基包括但不限于2-苯并咪唑基甲基、2-呋喃基乙基等。杂芳基烷基包含6至20个碳原子，例如杂芳基烷基的烷基部分包括烷基、烯基或炔基）为1至6个碳原子并且杂芳基部分为5至14个碳原子以及1至3个选自Ν、0、Ρ和S的杂原子。杂芳基烷基的杂芳基部分可为具有3至7个环成员（2至6个碳原子的单环或具有7至10个环成员4至9个碳原子和1至3个选自N、0、P和S的杂原子的双环，例如:双环[4，5]、[5，5]、[5，6]或[6,6]系统。[0146]“取代的烷基”、“取代的芳基”和“取代的芳基烷基”分别意指一个或多个氢原子各自独立地被取代基置换的烷基、芳基和芳基烷基。典型取代基包括但不限于-XcR、-。'-OR、-SR、-S—、-NR2、-NR3、=NR、-CX3、-CN、-OCN、-SCN、-N=C=0、-NCS、-NO、-NO2、=N2、-N3、NC=0R、-C=0R、-C=0nr2、-s〇3—、-s〇3h、-s=02R、-〇S=02〇R、_S=02NR、-S=0R、-〇P=0OR2、_P=0OR2、_P0—3、-P〇3H2、-C=0R、-C=0X、-C=SR、-C02R、-C〇2—、-C=SOR、-C=0SR、-C=SSR、-C=0NR2、-C=SNR2、-C=NRNR2，其中各X独立地为卤素:F、Cl、Br或I;并且各R独立地为-H、C2-C18烷基、C6-C2Q芳基、C3-C14杂环、保护基或前药部分。如上所述的亚烷基、亚烯基和亚炔基也可类似地被取代。[0147]“杂芳基”和“杂环”是指一个或多个环原子为杂原子例如氮、氧和硫）的环系统。杂环基团包含3至20个碳原子和1至3个选自Ν、0、Ρ和S的杂原子。杂环可为具有3至7个环成员（2至6个碳原子和1至3个选自Ν、0、Ρ和S的杂原子）的单环或具有7至10个环成员（4至9个碳原子和1至3个选自N、0、P和S的杂原子）的双环，例如:双环[4，5]、[5，5]、[5，6]或[6，6]系统。[0148]不例性杂环例如描述于Paque11e，Le〇A·，“PrincipIes〇fModerηHeterocyclicChemistry”（W.A.Benjamin，NewYork，1968，具体是第1、3、4、6、7和9章；“TheChemistryofHeterocyclicCompounds,AseriesofMonographs”（JohnWiley5〇118，恥¥¥〇4，1950至现今），具体是第13、14、16、19和28卷；和了.八111.〇16111.5〇3.196082:5566中。[0149]杂环的实例例如而非限制地包括吡啶基、二氢吡啶基、四氢吡啶基昵啶基）、噻唑基、四氢噻吩基、硫氧化四氢噻吩基、嘧啶基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、四唑基、苯并呋喃基、噻萘基、吲哚基、吲哚烯基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、昵啶基、4-昵啶酮基、吡咯烷基、2-吡咯烷酮基、啦咯啉基、四氢呋喃基、双-四氢呋喃基、四氢吡喃基、双-四氢吡喃基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、十氢喹啉基、八氢异喹啉基、吖辛基、三嗪基、6H-1，2,5-噻二嗪基、2!1，6!1-1，5,2-二噻嗪基、噻吩基、噻蒽基、吡喃基、异苯并呋喃基、苯并吡喃基、吨基、吩噁噻基、2H-吡咯基、异噻唑基、异噁唑基、吡嗪基、哒嗪基、吲哚嗪基、异吲哚基、3H-吲哚基、IH-吲唑基、嘌呤基、4H-喹嗪基、酞嗪基、萘啶基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、蝶啶基、4aH-咔唑基、咔唑基、β-咔啉基、菲啶基、吖啶基、嘧啶基、菲咯啉基、吩嗪基、吩噻嗪基、呋咱基、吩噁嗪基、异苯并二氢吡喃基、二氢吡喃基、咪唑烷基、咪唑啉基、吡唑烷基、吡唑啉基、昵嗪基、吲哚啉基、异吲哚啉基、奎宁环基、吗啉基、噁唑烷基、苯并三唑基、苯并异噁唑基、羟吲哚基、苯并噁唑啉基和靛红酰基。[0150]举例而言而非限制，碳键合杂环是在以下位置处键合:吡啶的2、3、4、5或6位;哒嗪的3、4、5或6位;嘧啶的2、4、5或6位;吡嗪的2、3、5或6位;呋喃、四氢呋喃、硫呋喃、噻吩、吡咯或四氢吡咯的2、3、4或5位;噁唑、咪唑或噻唑的2、4或5位;异噁唑、吡唑或异噻唑的3、4或5位;氮丙啶的2或3位;氮杂环丁烷的2、3或4位;喹啉的2、3、4、5、6、7或8位;或异喹啉的1、3、4、5、6、7或8位。更通常地，碳键合杂环包括2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、5-吡啶基、6-吡啶基、3-哒嗪基、4-哒嗪基、5-哒嗪基、6-哒嗪基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、6-嘧啶基、2-吡嗪基、3-吡嗪基、5-吡嗪基、6-吡嗪基、2-噻唑基、4-噻唑基或5-噻唑基。[0151]举例而言而非限制，氮键合杂环是在以下位置处键合:氮丙啶、氮杂环丁烷、吡咯、吡咯烷、2-吡咯啉、3-吡咯啉、咪唑、咪唑烷、2-咪唑啉、3-咪唑啉、吡唑、吡唑啉、2-吡唑啉、3-吡唑啉、昵啶、昵嗪、吲哚、吲哚啉、IH-吲唑的1位;异吲哚或异吲哚啉的2位；吗啉的4位；和咔唑或β-咔啉的9位。更通常地，氮键合杂环包括i-氮丙啶基、卜氮杂环丁烷基U-吡咯基、1-咪唑基、1-吡唑基和1-昵啶基。[0152]“C3-C8杂环”是指芳族或非芳族C3-C8碳环，其中一至四个环碳原子独立地被来自由0、S和N组成的组的杂原子置换。C3-C8杂环的代表性实例包括但不限于苯并呋喃基、苯并噻吩、吲哚基、苯并吡唑基、香豆素基、异喹啉基、吡咯基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、三唑基、喹啉基、嘧啶基、吡啶基、吡啶酮基、吡嗪基、哒嗪基、异噻唑基、异噁唑基和四唑基。C3-C8杂环可以是未取代的或被多达七个包括但不限于以下的基团取代^C1-C8烷基、-〇-：1-〇8烷基）、-芳基、-^〇1?’、-〇：〇1?’、-^〇〇1?’、-^〇冊2、-^〇冊1?’、-^〇0R’）2-NHC⑼R’、-S⑼2R’、-S⑼R’、-0H、-卤素、-N3、-NH2、-NHR’）、-NR’）2和-CN;其中各R’独立地选自K1-C8烷基和芳基。[0153]“C3-C8杂环基”是指以上定义的C3-C8杂环基团，其中杂环基团的一个氢原子被一键置换。C3-C8杂环可以是未取代的或被多达六个包括但不限于以下的基团取代:ϋ8烷基、-〇-：1-〇8烷基）、-芳基、-^〇1?’、-〇：〇1?’、-^〇〇1?’、-^〇冊2、-^〇冊1?’、-^〇0R’）2-NHC⑼R’、-S⑼2R’、-S⑼R’、-0Η、-卤素、-N3、-NH2、-NHR’）、-NR’）2和-CN;其中各R’独立地选自K1-C8烷基和芳基。[0154]“C3-C2q杂环”是指芳族或非芳族C3-C8碳环，其中一至四个环碳原子独立地被来自由0、S和N组成的组的杂原子置换。C3-C2q杂环可以是未取代的或被至多七个包括但不限于以下的基团取代^C1-C8经基、-KC1-C8烃基）、-芳基、-C⑼R’、-OC⑼R’、-C⑼OR’、-C⑼NH2、-C0NHR’、-C0NR’）2-NHC0R’、-S02R’、_S0R’、-0H、_卤素、-N3、-NH2、-NHR’）、-NR’）2和-CN;其中各R’独立地选自HcC1-C8烃基和芳基。[0155]uC3-C2q杂环基”是指以上定义的C3-C2q杂环基团，其中杂环基团的一个氢原子被一键置换。[0156]“碳环”意指具有3至7个碳原子，呈单环形式，或具有7至12个碳原子，呈双环形式的饱和或不饱和环。单环碳环具有3至6个环原子，更通常具有5或6个环原子。双环碳环具有例如以双环[4，5]、[5，5]、[5，6]或[6，6]系统形式排列的7至12个环原子、或以双环[5，6]或[6，6]系统形式排列的9或10个环原子。单环碳环的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、1-环戊-1-稀基、1-环戊-2-稀基、I-环戊稀基、环己基、I-环己稀基、I-环己稀基、I-环己-3-烯基、环庚基和环辛基。[0157]uC3-C8碳环”为3、4、5、6、7或8元饱和或不饱和非芳族碳环。代表性C3-C8碳环包括但不限于-环丙基、-环丁基、-环戊基、-环戊二烯基、-环己基、-环己烯基、-1，3-环己二烯基、-1，4-环己二烯基、-环庚基、-1，3-环庚二烯基、-1，3,5-环庚三烯基、-环辛基和-环辛二烯基。C3-C8碳环基团可以是未取代的或被一个或多个包括但不限于以下的基团取代:-C1-C8烷基、-0-Ci-C8烷基）、_芳基、-C⑼R’、-OC0R’、-C⑼OR’、-C⑼NH2、-C⑼NHR’、-C0NR’）2-NHC⑼R’、-S⑼2R’、-S⑼R’、-0H、-卤素、-N3、-NH2、-NHR’）、-NR’）2和-CN;其中各R’独立地选自K1-C8烷基和芳基。[0158]uC3-C8碳环”是指以上定义的C3-C8碳环基团，其中碳环基团的一个氢原子被一键置换。[0159]“接头”是指包含共价键或原子链的使抗体共价连接于药物部分的化学部分。在各种实施方案中，接头包括二价基团，诸如烷基二基、芳基二基、杂芳基二基、诸如-CR2nOCR2n-的部分、烷氧基的重复单元例如聚乙烯氧基、PEG、聚亚甲基氧基和烷基氨基的重复单元例如聚乙烯氨基，Jeffamine™;和二酸酯和酰胺，包括琥珀酸酯、琥珀酰胺、二乙醇酯、丙二酸酯和己酰胺。在各种实施方案中，接头可包含一个或多个氨基酸残基，诸如缬氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸和高赖氨酸。[0160]术语“手性”是指分子具有与镜像搭配物不可重叠的特性，而术语“非手性”是指分子可重叠在其镜像搭配物上。[0161]术语“立体异构体”是指具有相同化学组成，但在原子或基团在空间中的排列方面不同的化合物。[0162]“非对映异构体”是指具有两个或更多个手性中心并且分子不互为镜像的立体异构体。非对映异构体具有不同物理特性，例如熔点、沸点、光谱特性和反应性。非对映异构体的混合物可在诸如电泳和色谱法的高分辨率分析程序下分离。[0163]“对映异构体”是指化合物的互为不可重叠镜像的两种立体异构体。[0164]本文使用的立体化学定义和惯例通常遵循S.P.Parker编，McGraw-HillDictionaryofChemicalTerms1984McGraw-HillBook公司，NewYork;和Eliel，Ε·和ffilen,S.,StereochemistryofOrganicCompounds1994JohnWileySons公司，NewYork。许多有机化合物以光学活性形式存在，即其能够使平面偏振光的平面旋转。在描述光学活性化合物时，前缀D和L或R和S用于表示分子围绕其手性中心的绝对构型。前缀d和1或+和㈠用于指定由化合物实现的平面偏振光的旋转方向，其中㈠或1意指化合物为左旋的。前缀为⑴或d的化合物为右旋的。对于给定化学结构，这些立体异构体为相同的，例外之处为其互为镜像。特定立体异构体也可称为对映异构体，并且这类异构体的混合物常称为对映异构混合物。对映异构体的50:50混合物称为外消旋混合物或外消旋物，其可在化学反应或过程中无立体选择性或立体特异性时存在。术语“外消旋混合物”和“外消旋物”是指两种对映异构物质的缺乏光学活性的等摩尔混合物。[0165]“离去基团”是指可被另一官能基取代的官能团。某些离去基团在本领域是众所周知的，并且实例包括但不限于卤基例如氯基、溴基、碘基）、甲烷磺酰基（甲磺酰基）、对甲苯磺酰基（甲苯磺酰基）、三氟甲基磺酰基三氟甲磺酸酯基和三氟甲基磺酸酯基。[0166]术语“保护基”是指通常用于在使化合物上的其它官能团反应时阻隔或保护特定官能团的取代基。例如，“氨基保护基”为连接于氨基的阻隔或保护化合物中的氨基官能团的取代基。适合氨基保护基包括但不限于乙酰基、三氟乙酰基、叔丁氧基羰基BOC、苯甲基氧基羰基CBZ和9-芴基亚甲基氧基羰基Fmoc。对于保护基及其使用的一般性描述，参见T.ff.Greene,ProtectiveGroupsinOrganicSynthesisjJohnffileySons,NewYork,1991或后期版本。[0167]II.组合物和方法[0168]在一方面，本发明部分地基于结合PMEL17的抗体和包含这类抗体的免疫缀合物。本发明的抗体和免疫缀合物例如适用于诊断或治疗PMELl7阳性癌症。[0169]A.示例性抗PMEL17抗体[0170]在一些实施方案中，本发明提供结合PMEL17的分离抗体。PMEL17为一种短暂存在于黑素细胞的细胞表面处的整合膜蛋白。如本文所说明，PMEL17表达于大多数所检查的人黑素瘤试样中。[0171]具有信号序列（氨基酸1-24的示例性天然存在的人PMEL17前蛋白原序列提供于SEQIDN0:26中，并且相应PMEL17前蛋白序列显示于SEQIDN0:27对应于SEQIDN0:26的氨基酸25-661中。[0172]在某些实施方案中，抗PMEL17抗体结合SEQIDNO:26的氨基酸105至125内的表位，或结合SEQIDNO:26的氨基酸25至45内的表位。非限制性示例性这类抗体包括17A9、8G3和31D1。在一些实施方案中，抗PMEL17抗体结合人PMEL17。在一些实施方案中，抗PMEL17抗体结合选自人、食蟹猴、小鼠和大鼠PMELl7的PMEL。[0173]在一些实施方案中，抗PMEL17抗体结合SEQIDNO:26的氨基酸105至125内的表位。在一些这类实施方案中，抗PMEL17抗体结合PMEL17的亲和力彡5nM或彡4nM或彡3nM或彡2nM或彡InM，并且任选地彡0.OOOlnM或彡0.OOlnM或彡O.OlnM。非限制性示例性这类抗体包括本文所述的17A9和8G3。在一些实施方案中，结合SEQIDN0:26的氨基酸105至125内的表位的抗PMEL17抗体结合人PMEL17。在一些实施方案中，结合SEQIDN0:26的氨基酸105至125内的表位的抗PMELl7抗体结合人PMELl7和或食蟹猴PMELl7。[0174]在一些实施方案中，抗PMEL17抗体结合SEQIDNO:26的氨基酸25至45内的表位。在一些这类实施方案中，抗PMELl7抗体结合PMELl7的亲和力彡5nM或彡4nM或彡3nM或彡2nM或彡InM，并且任选地彡0.OOOlnM或彡0.OOlnM或彡O.OlnM。非限制性示例性此抗体为本文所述的31D1。在一些实施方案中，结合SEQIDN0:26的氨基酸25至45内的表位的抗PMEL17抗体结合人PMEL17。在一些实施方案中，结合SEQIDN0:26的氨基酸105至125内的表位的抗PMELl7抗体结合人PMELl7和或食蟹猴PMELl7。[0175]提供结合PMEL17的其它抗体。非限制性示例性抗PMEL17抗体为本文所述的15F2。在一些实施方案中，抗PMEL17抗体结合PMEL17的亲和力彡5nM或彡4nM或彡3nM或彡2nM或彡InM，并且任选地彡O.OOOlnM或彡O.OOlnM或彡O.OlnM。在一些实施方案中，抗PMEL17抗体结合人PMELl7。在一些实施方案中，抗PMELl7抗体结合人PMELl7和或食蟹猴PMELl7。[0176]分析[0177]为确定抗PMEL17抗体是否“结合SEQIDNO:26的氨基酸105至125内的表位”或“结合SEQIDNO:26的氨基酸25至45内的表位”，使具有N末端和C末端缺失的PMEL17多肽在293细胞中表达并且如实例D中所述，通过FACS测试抗体与截短多肽的结合，其中相对于与在293细胞中表达的全长PMEL17的结合，抗体与截短多肽的结合的实质性降低（多70%降低）或消除指示抗体不结合截短多肽。[0178]抗PMEL17抗体是否“以亲和力彡5nM或彡4nM或彡3nM或彡2nM或彡InM进行结合”是根据BIAcore15分析来测定。例如，利用BIACORE®-3000BIAc〇re公司，Piscataway，NJ，使用表面等离子体共振分析来测量Kd。根据供应商说明书用1-乙基-3-3-二甲基氨基丙基碳化二亚胺EDC和N-羟基琥珀酰亚胺NHS试剂活化BIAcore™研究级CM5芯片。使山羊抗人FeIgG偶合于芯片以实现各流动槽中有约10,000反应单位RU。未反应偶合基团用IM乙醇胺封端。对于动力学测量，捕获抗PMEL17抗体以实现约300RU。在25°C下以流速30μ1min注射人PMEL17E⑶例如在杆状病毒系统中表达的融合于C末端Fe的氨基酸25至291、或融合于Fc的氨基酸22-558;125nM至0·49nM于HBS-P缓冲液（0·01MHEPESpH7·4、0.15MNaCl、0.005%表面活性剂P20中的两倍连续稀释液。使用1:1朗缪尔Langmuir结合模型（BIAcore™评估软件第3.2版计算缔合速率k纟給和离解速率½¾。平衡解离常数Kd计算为比率kM«k纟給。若根据以上表面等离子体共振分析的缔合速率超过IO^T1iT1,则可通过使用荧光淬灭技术来测定缔合速率，该技术测量在如在分光计诸如停流配备分光光度计AvivInstruments或具有搅拌比色皿的8000系列ST.M-Am彳nm®_分光光度计ThermoSpectronic中测量的递增浓度的抗原存在下，在25°C下于PBSpH7.2中的20nM抗抗原抗体Fab形式）的焚光发射强度激发=295nm;发射=340nm，16nm带通）的增加或降低。[0179]抗体17A9及其它实施方案[0180]在一些实施方案中，本发明提供一种包含至少一个、两个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR的抗PMEL17抗体：（a包含氨基酸序列SEQIDN0:3的HVR-H1;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:4的HVR-H2;c包含氨基酸序列SEQIDN0:5的HVR-H3;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:6的HVR-Ll;e包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2;和f包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3。[0181]在一方面，本发明提供一种包含至少一个、至少两个或全部三个选自以下的VHHVR序列的抗体：（a包含氨基酸序列SEQIDN0:3的HVR-Hl;b包含氨基酸序列SEQIDN0:4的HVR-H2;和c包含氨基酸序列SEQIDN0:5的HVR-H3。在一个实施方案中，抗体包含含有氨基酸序列SEQIDNO:5的HVR-H3。在另一实施方案中，抗体包含含有氨基酸序列SEQIDN0:5的HVR-H3和含有氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3。在另一实施方案中，抗体包含含有氨基酸序列SEQIDNO:5的HVR-H3、含有氨基酸序列SEQIDNO:8的HVR-L3、和含有氨基酸序列SEQIDN0:4的HVR-H2。在另一实施方案中，抗体包含a包含氨基酸序列SEQIDN0:3的HVR-Hl;b包含氨基酸序列SEQIDN0:4的HVR-H2;和（c包含氨基酸序列SEQID恥：5的狀1?-!13。[0182]在另一方面，本发明提供一种包含至少一个、至少两个或全部三个选自以下的VLHVR序列的抗体：（a包含氨基酸序列SEQIDN0:6的HVR-Ll;b包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2;和c包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3。在一个实施方案中，抗体包含a包含氨基酸序列SEQIDN0:6的HVR-L1;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2;和c包含氨基酸序列SEQIDNO:8的HVR-L3。[0183]在另一方面，本发明的抗体包含a包含至少一个、至少两个或全部三个选自以下的VHHVR序列的VH结构域：⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:3的HVR-H1，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:4的HVR-H2,和（iii包含选自SEQID勵:5的氨基酸序列的狀1?-!13;和〇3包含至少一个、至少两个或全部三个选自以下的VLHVR序列的VL结构域：⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:6的HVR-Ll，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2,和c包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3。[0184]在另一方面，本发明提供一种抗体，其包含（a包含氨基酸序列SEQIDN0:3的HVR-Hl;b包含氨基酸序列SEQIDN0:4的HVR-H2;c包含氨基酸序列SEQIDN0:5的HVR-H3;d包含氨基酸序列SEQIDN0:6的HVR-Ll;e包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2;和f包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3。[0185]在一些实施方案中，本发明提供一种包含至少一个、两个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR的抗PMEL17抗体：（a包含氨基酸序列SEQIDNO:17的HVR-Hl;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:18的HVR-H2;c包含氨基酸序列SEQIDN0:5的HVR-H3;d包含氨基酸序列SEQIDN0:19的HVR-Ll;e包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2;和f包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3。[0186]在一方面，本发明提供一种包含至少一个、至少两个或全部三个选自以下的VHHVR序列的抗体：（a包含氨基酸序列SEQIDN0:17的HVR-H1;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:18的HVR-H2;和c包含氨基酸序列SEQIDN0:5的HVR-H3。在另一实施方案中，抗体包含含有氨基酸序列SEQIDN0:5的HVR-H3、含有氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3、和含有氨基酸序列SEQIDNO:18的HVR-H2。在另一实施方案中，抗体包含a包含氨基酸序列SEQIDN0:17的HVR-Hl;b包含氨基酸序列SEQIDN0:18的HVR-H2;和c包含氨基酸序列SEQIDN0:5的HVR-H3。[0187]在另一方面，本发明提供一种包含至少一个、至少两个或全部三个选自以下的VLHVR序列的抗体：（a包含氨基酸序列SEQIDN0:19的HVR-L1;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2;和c包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3。在一个实施方案中，抗体包含a包含氨基酸序列SEQIDN0:19的HVR-L1;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2;和c包含氨基酸序列SEQIDNO:8的HVR-L3。[0188]在另一方面，本发明的抗体包含a包含至少一个、至少两个或全部三个选自以下的VHHVR序列的VH结构域：⑴包含氨基酸序列SEQIDNO:17的HVR-Hl，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:18的HVR-H2，和（iii包含选自SEQIDN0:5的氨基酸序列的HVR-H3;和b包含至少一个、至少两个或全部三个选自以下的VLHVR序列的VL结构域：⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:19的HVR-Ll，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2,和c包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3。[0189]在另一方面，本发明提供一种抗体，其包含a包含氨基酸序列SEQIDNO:17的HVR-Hl;⑹包含氨基酸序列SEQIDNO:18的HVR-H2;c包含氨基酸序列SEQIDNO:5的HVR-H3;⑹包含氨基酸序列SEQIDNO:19的HVR-Ll;e包含氨基酸序列SEQIDNO:7的HVR-L2;和f包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3。[0190]在一些实施方案中，SEQID冊：17中的父1是选自厶找、1^8、6111、厶811、617和厶1。在一些实施方案中，SEQIDNO:17中的X1是选自Arg、Lys、Gly和Ala。在一些实施方案中，SEQIDNO:17中的X1是选自Arg和Gly。在一些实施方案中，SEQIDNO:18中的X2是选自Tyr、Trp、Phe、Thr、Ser、Ile、Leu、Val、Met、Ala和正亮氨酸。在一些实施方案中，SEQIDN0:18中的X2是选自Tyr、Phe、Ile、Leu和Val。在一些实施方案中，SEQIDN0:18中的X2是选自Tyr和Ile。在一些实施方案中，SEQIDNO:19中的X3是选自Ser、Thr和Val。在一些实施方案中，SEQIDNO:19中的X3是选自Ser和Thr。在一些实施方案中，SEQIDNO:19中的X4是选自Ser、Thr和Val。在一些实施方案中，SEQIDNO:19中的X4是选自Ser和Thr。[0191]在任何以上实施方案中，抗PMEL17抗体是人源化的。在一个实施方案中，抗PMEL17抗体包含如任何以上实施方案中的HVR，并且进一步包含人受体框架，例如人免疫球蛋白框架或人共有框架。在某些实施方案中，人受体框架为人VUlVLki框架和或VH框架VH1。在一些实施方案中，人源化抗PMEL17抗体包含a包含氨基酸序列SEQIDNO:3的HVR-Hl;b包含氨基酸序列SEQIDN0:4的HVR-H2;c包含氨基酸序列SEQIDN0:5的HVR-H3;d包含氨基酸序列SEQIDN0:6的HVR-Ll;e包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2;和（f包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3。在一些实施方案中，人源化抗PMEL17抗体包含a包含氨基酸序列SEQIDN0:17的HVR-H1;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:18的HVR-H2;c包含氨基酸序列SEQIDNO:5的HVR-H3;⑹包含氨基酸序列SEQIDNO:19的HVR-Ll;e包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2;和f包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3。[0192]在另一方面，抗PMEL17抗体包含与氨基酸序列SEQIDNO:1或50具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的重链可变结构域VH序列。在某些实施方案中，相对于参照序列，与氨基酸序列SEQIDNO:1或50具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%—致性的VH序列含有取代（例如保守性取代）、插入或缺失，但包含该序列的抗PMELl7抗体保留结合PMELl7的能力。在某些实施方案中，在SEQIDNO:1或50中，总计1至10个氨基酸已被取代、插入和或缺失。在某些实施方案中，在SEQIDNO:1或50中，总计1至5个氨基酸已被取代、插入和或缺失。在某些实施方案中，取代、插入或缺失发生在HVR外部区域中（即在FR中）。任选地，抗PMEL17抗体包含VH序列SEQIDNO:1或50,包括该序列的转译后修饰。在具体实施方案中，VH包含一个、两个或三个选自以下的HVR:a包含氨基酸序列SEQIDN0:3的HVR-Hl，（b包含氨基酸序列SEQIDN0:4的HVR-H2,和c包含氨基酸序列SEQIDN0:5的HVR-H3。在一些实施方案中，VH包含一个、两个或三个选自以下的HVR:a包含氨基酸序列SEQIDN0:17的HVR-Hl，（b包含氨基酸序列SEQIDNO:18的HVR-H2,和c包含氨基酸序列SEQIDNO:5的HVR-H3。[0193]在一些实施方案中，提供一种抗PMEL17抗体，其中所述抗体包含与氨基酸序列SEQID勵:2具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的轻链可变结构域VL。在某些实施方案中，相对于参照序列，与氨基酸序列SEQID勵:2具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%—致性的¥1^序列含有取代例如保守性取代）、插入或缺失，但包含该序列的抗PMEL17抗体保留结合PMEL17的能力。在某些实施方案中，在SEQIDN0:2中，总计1至10个氨基酸已被取代、插入和或缺失。在某些实施方案中，在SEQIDNO:2中，总计1至5个氨基酸已被取代、插入和或缺失。在某些实施方案中，取代、插入或缺失发生在HVR外部区域中（即在FR中）。任选地，抗PMEL17抗体包含VL序列SEQIDNO:2,包括该序列的转译后修饰。在具体实施方案中，VL包含一个、两个或三个选自以下的HVR:a包含氨基酸序列SEQIDN0:6的HVR-Ll;b包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2;和c包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3。在一些实施方案中，VL包含一个、两个或三个选自以下的HVR:a包含氨基酸序列SEQIDNO:19的HVR-L1;⑹包含氨基酸序列SEQIDNO:7的HVR-L2;和c包含氨基酸序列SEQIDNO:8的HVR-L3。[0194]在另一方面，提供一种抗PMEL17抗体，其中所述抗体包含如以上提供的任何实施方案中的VH、和如以上提供的任何实施方案中的VL。在一个实施方案中，抗体包含分别于SEQIDNO:1和SEQIDNO:2中的VH序列和VL序列，包括那些序列的转译后修饰。在一些实施方案中，抗体包含分别于SEQIDN0:50和SEQIDN0:2中的VH序列和VL序列，包括那些序列的转译后修饰。[0195]在另一方面，本发明提供一种与本文提供的抗PMEL17抗体结合相同表位的抗体。例如，在某些实施方案中，提供一种与包含VH序列SEQIDNO:1或50和VL序列SEQIDN0:2的抗PMEL17抗体结合相同表位的抗体。在某些实施方案中，提供一种结合SEQIDN0:26的来自氨基酸105至125、在氨基酸105至125内或与氨基酸105至125重叠的表位的抗体。[0196]在本发明的另一方面，根据任何以上实施方案的抗PMEL17抗体为单克隆抗体，包括嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。在一个实施方案中，抗PMEL17抗体为抗体片段，例如Fv、Fab、Fab’、scFv、双抗体或Fab’）2片段。在另一实施方案中，抗体为实质上全长抗体，例如IgGl抗体或如本文定义的其它抗体类别或同种型。[0197]在另一方面，根据任何以上实施方案的抗PMEL17抗体可并有单一或呈组合形式的如以下章节1-7中所述的任何特征。[0198]抗体8G3及其它实施方案[0199]在一些实施方案中，本发明提供一种包含至少一个、两个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR的抗PMEL17抗体：（a包含氨基酸序列SEQIDNO:13的HVR-Hl;⑹包含氨基酸序列SEQIDNO:14的HVR-H2;c包含氨基酸序列SEQIDNO:15的HVR-H3;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:16的HVR-Ll;e包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2;和f包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3。[0200]在一方面，本发明提供一种包含至少一个、至少两个或全部三个选自以下的VHHVR序列的抗体：（a包含氨基酸序列SEQIDN0:13的HVR-H1;⑹包含氨基酸序列SEQIDNO:14的HVR-H2;和c包含氨基酸序列SEQIDNO:15的HVR-H3。在一个实施方案中，抗体包含含有氨基酸序列SEQIDNO:15的HVR-H3。在另一实施方案中，抗体包含含有氨基酸序列SEQIDN0:15的HVR-H3和含有氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3。在另一实施方案中，抗体包含含有氨基酸序列SEQIDN0:15的HVR-H3、含有氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3、和含有氨基酸序列SEQIDNO:14的HVR-H2。在另一实施方案中，抗体包含a包含氨基酸序列SEQIDN0:13的HVR-H1;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:14的HVR-H2;和c包含氨基酸序列SEQID从：15的狀1?-!13。[0201]在另一方面，本发明提供一种包含至少一个、至少两个或全部三个选自以下的VLHVR序列的抗体：（a包含氨基酸序列SEQIDN0:16的HVR-L1;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2;和c包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3。在一个实施方案中，抗体包含a包含氨基酸序列SEQIDN0:16的HVR-L1;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2;和c包含氨基酸序列SEQIDNO:8的HVR-L3。[0202]在另一方面，本发明的抗体包含a包含至少一个、至少两个或全部三个选自以下的VHHVR序列的VH结构域：⑴包含氨基酸序列SEQIDNO:13的HVR-Hl，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:14的HVR-H2，和（iii包含选自SEQIDN0:15的氨基酸序列的HVR-H3;和b包含至少一个、至少两个或全部三个选自以下的VLHVR序列的VL结构域：⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:16的HVR-Ll，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2,和c包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3。[0203]在另一方面，本发明提供一种抗体，其包含a包含氨基酸序列SEQIDNO:13的HVR-H1;⑹包含氨基酸序列SEQIDNO:14的HVR-H2;c包含氨基酸序列SEQIDNO:15的HVR-H3;⑹包含氨基酸序列SEQIDNO:16的HVR-Ll;e包含氨基酸序列SEQIDNO:7的HVR-L2;和f包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3。[0204]在一些实施方案中，本发明提供一种包含至少一个、两个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR的抗PMEL17抗体：（a包含氨基酸序列SEQIDNO:17的HVR-Hl;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:18的HVR-H2;c包含氨基酸序列SEQIDN0:15的HVR-H3;d包含氨基酸序列SEQIDN0:19的HVR-Ll;e包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2;和f包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3。[0205]在一方面，本发明提供一种包含至少一个、至少两个或全部三个选自以下的VHHVR序列的抗体：（a包含氨基酸序列SEQIDN0:17的HVR-H1;⑹包含氨基酸序列SEQIDNO:18的HVR-H2;和c包含氨基酸序列SEQIDNO:15的HVR-H3。在另一实施方案中，抗体包含含有氨基酸序列SEQIDN0:15的HVR-H3，含有氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3、和含有氨基酸序列SEQIDNO:18的HVR-H2。在另一实施方案中，抗体包含a包含氨基酸序列SEQIDN0:17的HVR-Hl;b包含氨基酸序列SEQIDN0:18的HVR-H2;和c包含氨基酸序列SEQID恥：15的狀1?-!13。[0206]在另一方面，本发明提供一种包含至少一个、至少两个或全部三个选自以下的VLHVR序列的抗体：（a包含氨基酸序列SEQIDN0:19的HVR-L1;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2;和c包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3。在一个实施方案中，抗体包含a包含氨基酸序列SEQIDN0:19的HVR-L1;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2;和c包含氨基酸序列SEQIDNO:8的HVR-L3。[0207]在另一方面，本发明的抗体包含a包含至少一个、至少两个或全部三个选自以下的VHHVR序列的VH结构域：⑴包含氨基酸序列SEQIDNO:17的HVR-Hl，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:18的HVR-H2，和（iii包含选自SEQIDN0:15的氨基酸序列的HVR-H3;和b包含至少一个、至少两个或全部三个选自以下的VLHVR序列的VL结构域：⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:19的HVR-Ll，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2,和c包含氨基酸序列SEQID从：8的狀1?-1^3。[0208]在另一方面，本发明提供一种抗体，其包含a包含氨基酸序列SEQIDNO:17的HVR-H1;⑹包含氨基酸序列SEQIDNO:18的HVR-H2;c包含氨基酸序列SEQIDNO:15的HVR-H3;⑹包含氨基酸序列SEQIDNO:19的HVR-Ll;e包含氨基酸序列SEQIDNO:7的HVR-L2;和f包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3。[0209]在一些实施方案中，SEQID冊：17中的父1是选自厶找、1^8、6111、厶811、617和厶13。在一些实施方案中，SEQIDNO:17中的X1是选自Arg、Lys、Gly和Ala。在一些实施方案中，SEQIDNO:17中的X1是选自Arg和Gly。在一些实施方案中，SEQIDNO:18中的X2是选自Tyr、Trp、Phe、Thr、Ser、Ile、Leu、Val、Met、Ala和正亮氨酸。在一些实施方案中，SEQIDN0:18中的X2是选自Tyr、Phe、Ile、Leu和Val。在一些实施方案中，SEQIDN0:18中的X2是选自Tyr和Ile。在一些实施方案中，SEQIDNO:19中的X3是选自Ser、Thr和Val。在一些实施方案中，SEQIDNO:19中的X3是选自Ser和Thr。在一些实施方案中，SEQIDNO:19中的X4是选自Ser、Thr和Val。在一些实施方案中，SEQIDNO:19中的X4是选自Ser和Thr。[0210]在任何以上实施方案中，抗PMEL17抗体是人源化的。在一个实施方案中，抗PMEL17抗体包含如任何以上实施方案中的HVR，并且进一步包含人受体框架，例如人免疫球蛋白框架或人共有框架。在一些实施方案中，人源化抗PMEL17抗体包含a包含氨基酸序列SEQIDN0:13的HVR-Hl;b包含氨基酸序列SEQIDN0:14的HVR-H2;c包含氨基酸序列SEQIDN0:15的HVR-H3;d包含氨基酸序列SEQIDN0:16的HVR-Ll;e包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2;和f包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3。在一些实施方案中，人源化抗PMEL17抗体包含a包含氨基酸序列SEQIDN0:17的HVR-Hl;b包含氨基酸序列SEQIDN0:18的HVR-H2;c包含氨基酸序列SEQIDN0:15的HVR-H3;d包含氨基酸序列SEQIDN0:19的HVR-Ll;e包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2;和f包含氨基酸序列SEQID从：8的狀1?-1^3。[0211]在另一方面，抗PMEL17抗体包含与氨基酸序列SEQIDN0:9或49具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的重链可变结构域VH序列。在某些实施方案中，相对于参照序列，与氨基酸序列SEQIDNO:9或49具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的VH序列含有取代例如保守性取代）、插入或缺失，但包含该序列的抗PMELl7抗体保留结合PMELl7的能力。在某些实施方案中，在SEQIDN0:9或49中，总计1至10个氨基酸已被取代、插入和或缺失。在某些实施方案中，在SEQIDN0:9或49中，总计1至5个氨基酸已被取代、插入和或缺失。在某些实施方案中，取代、插入或缺失发生在HVR外部区域中（即在FR中）。任选地，抗PMEL17抗体包含VH序列SEQIDNO:9或49,包括该序列的转译后修饰。在具体实施方案中，VH包含一个、两个或三个选自以下的HVR:a包含氨基酸序列SEQIDN0:13的HVR-H1，⑹包含氨基酸序列SEQIDNO:14的HVR-H2,和（c包含氨基酸序列SEQIDNO:15的HVR-H3。在一些实施方案中，VH包含一个、两个或三个选自以下的HVR:a包含氨基酸序列SEQIDN0:17的HVR-H1，⑹包含氨基酸序列SEQIDNO:18的HVR-H2,和（c包含氨基酸序列SEQIDNO:15的HVR-H3〇[0212]在一些实施方案中，提供一种抗PMEL17抗体，其中所述抗体包含与氨基酸序列SEQID勵：10具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的轻链可变结构域VL。在某些实施方案中，相对于参照序列，与氨基酸序列SEQID勵：10具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的¥1^序列含有取代例如保守性取代）、插入或缺失，但包含该序列的抗PMEL17抗体保留结合PMEL17的能力。在某些实施方案中，在SEQIDNO:10中，总计1至10个氨基酸已被取代、插入和或缺失。在某些实施方案中，在SEQIDNO:10中，总计1至5个氨基酸已被取代、插入和或缺失。在某些实施方案中，取代、插入或缺失发生在HVR外部区域中（即在FR中）。任选地，抗PMEL17抗体包含VL序列SEQIDNO:10,包括该序列的转译后修饰。在具体实施方案中，VL包含一个、两个或三个选自以下的HVR:a包含氨基酸序列SEQIDN0:16的HVR-L1;⑹包含氨基酸序列SEQIDNO:7的HVR-L2;和c包含氨基酸序列SEQIDNO:8的HVR-L3。在一些实施方案中，VL包含一个、两个或三个选自以下的HVR:a包含氨基酸序列SEQIDN0:19的HVR-Ll;b包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2;和c包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3〇[0213]在另一方面，提供一种抗PMEL17抗体，其中所述抗体包含如以上提供的任何实施方案中的VH和如以上提供的任何实施方案中的VL。在一个实施方案中，抗体包含分别于SEQIDN0:9和SEQIDNO:10中的VH序列和VL序列，包括那些序列的转译后修饰。在一些实施方案中，抗体包含分别于SEQIDN0:49和SEQIDNO:10中的VH序列和VL序列，包括那些序列的转译后修饰。[0214]在另一方面，本发明提供一种与本文提供的抗PMELl7抗体结合相同表位的抗体。例如，在某些实施方案中，提供一种与包含VH序列SEQIDN0:9或49和VL序列SEQIDNO:10的抗PMEL17抗体结合相同表位的抗体。在某些实施方案中，提供一种结合SEQIDN0:26的来自氨基酸105至125、在氨基酸105至125内或与氨基酸105至125重叠的表位的抗体。[0215]在本发明的另一方面，根据任何以上实施方案的抗PMEL17抗体为单克隆抗体，包括嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。在一个实施方案中，抗PMEL17抗体为抗体片段，例如Fv、Fab、Fab’、scFv、双抗体或Fab’）2片段。在另一实施方案中，抗体为实质上全长抗体，例如IgGl抗体或如本文定义的其它抗体类别或同种型。[0216]在另一方面，根据任何以上实施方案的抗PMEL17抗体可并有单一或呈组合形式的如以下章节1-7中所述的任何特征。[0217]抗体15F2及其它实施方案[0218]在一些实施方案中，本发明提供一种包含至少一个、两个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR的抗PMEL17抗体：（a包含氨基酸序列SEQIDNO:20的HVR-Hl;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:21的HVR-H2;c包含氨基酸序列SEQIDN0:22的HVR-H3;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:23的HVR-Ll;e包含氨基酸序列SEQIDN0:24的HVR-L2;和（f包含氨基酸序列SEQID从：25的狀1?-1^3。[0219]在一方面，本发明提供一种包含至少一个、至少两个或全部三个选自以下的VHHVR序列的抗体：（a包含氨基酸序列SEQIDN0:20的HVR-Hl;b包含氨基酸序列SEQIDN0:21的HVR-H2;和c包含氨基酸序列SEQIDN0:22的HVR-H3。在一个实施方案中，抗体包含含有氨基酸序列SEQIDNO:22的HVR-H3。在另一实施方案中，抗体包含含有氨基酸序列SEQIDNO:22的HVR-H3和含有氨基酸序列SEQIDNO:25的HVR-L3。在另一实施方案中，抗体包含含有氨基酸序列SEQIDNO:22的HVR-H3、含有氨基酸序列SEQIDNO:25的HVR-L3、和含有氨基酸序列SEQIDNO:21的HVR-H2。在另一实施方案中，抗体包含a包含氨基酸序列SEQIDN0:20的HVR-H1;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:21的HVR-H2;和（c包含氨基酸序列SEQID从：22的狀1?-!13。[0220]在另一方面，本发明提供一种包含至少一个、至少两个或全部三个选自以下的VLHVR序列的抗体：（a包含氨基酸序列SEQIDN0:23的HVR-L1;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:24的HVR-L2;和c包含氨基酸序列SEQIDN0:25的HVR-L3。在一个实施方案中，抗体包含a包含氨基酸序列SEQIDN0:23的HVR-L1;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:24的HVR-L2;和c包含氨基酸序列SEQID从:25的狀1?-1^3。[0221]在另一方面，本发明的抗体包含a包含至少一个、至少两个或全部三个选自以下的VHHVR序列的VH结构域：⑴包含氨基酸序列SEQIDNO:20的HVR-Hl，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:21的HVR-H2,和（iii包含选自SEQIDN0:22的氨基酸序列的HVR-H3;和⑹包含至少一个、至少两个或全部三个选自以下的VLHVR序列的VL结构域：⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:23的HVR-Ll，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:24的HVR-L2,和（c包含氨基酸序列SEQID从：25的狀1?-1^3。[0222]在另一方面，本发明提供一种抗体，其包含：（a包含氨基酸序列SEQIDN0:20的HVR-H1;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:21的HVR-H2;c包含氨基酸序列SEQIDN0:22的HVR-H3;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:23的HVR-Ll;e包含氨基酸序列SEQIDN0:24的HVR-L2;和f包含氨基酸序列SEQID从:25的狀1?-1^3。[0223]在任何以上实施方案中，抗PMELl7抗体是人源化的。在一个实施方案中，抗PMELl7抗体包含如任何以上实施方案中的HVR，并且进一步包含人受体框架，例如人免疫球蛋白框架或人共有框架。在一些实施方案中，人源化抗PMEL17抗体包含a包含氨基酸序列SEQIDN0:20的HVR-H1;⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:21的HVR-H2;c包含氨基酸序列SEQIDN0:22的HVR-H3;d包含氨基酸序列SEQIDN0:23的HVR-Ll;e包含氨基酸序列SEQIDN0:24的HVR-L2;和（f包含氨基酸序列SEQIDN0:25的HVR-L3。[0224]在另一方面，抗PMEL17抗体包含与氨基酸序列SEQIDNO:11或51具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的重链可变结构域VH序列。在某些实施方案中，相对于参照序列，与氨基酸序列SEQIDNO:11或51具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的VH序列含有取代例如保守性取代）、插入或缺失，但包含该序列的抗PMELl7抗体保留结合PMELl7的能力。在某些实施方案中，在SEQIDNO:11或51中，总计1至10个氨基酸已被取代、插入和或缺失。在某些实施方案中，在SEQIDNO:11或51中，总计1至5个氨基酸已被取代、插入和或缺失。在某些实施方案中，取代、插入或缺失发生在HVR外部区域中（即在FR中）。任选地，抗PMEL17抗体包含VH序列SEQIDNO:11或51，包括该序列的转译后修饰。在具体实施方案中，VH包含一个、两个或三个选自以下的HVR:a包含氨基酸序列SEQIDN0:20的HVR-H1，⑹包含氨基酸序列SEQIDN0:21的HVR-H2，和c包含氨基酸序列SEQIDN0:22的HVR-H3。[0225]在一些实施方案中，提供一种抗PMEL17抗体，其中所述抗体包含与氨基酸序列SEQID勵：12具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的轻链可变结构域VL。在某些实施方案中，相对于参照序列，与氨基酸序列SEQID勵：12具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的¥1^序列含有取代例如保守性取代）、插入或缺失，但包含该序列的抗PMEL17抗体保留结合PMEL17的能力。在某些实施方案中，在SEQIDNO:12中，总计1至10个氨基酸已被取代、插入和或缺失。在某些实施方案中，在SEQIDNO:12中，总计1至5个氨基酸已被取代、插入和或缺失。在某些实施方案中，取代、插入或缺失发生在HVR外部区域中（即在FR中）。任选地，抗PMEL17抗体包含VL序列SEQIDNO:12,包括该序列的转译后修饰。在具体实施方案中，VL包含一个、两个或三个选自以下的HVR:a包含氨基酸序列SEQIDN0:23的HVR-L1;⑹包含氨基酸序列SEQIDNO:24的HVR-L2;和c包含氨基酸序列SEQIDNO:25的HVR-L3。[0226]在另一方面，提供一种抗PMEL17抗体，其中所述抗体包含如以上提供的任何实施方案中的VH和如以上提供的任何实施方案中的VL。在一个实施方案中，抗体包含分别于SEQIDNO:11和SEQIDNO:12中的VH序列和VL序列，包括那些序列的转译后修饰。在一些实施方案中，抗体包含分别于SEQIDNO:51和SEQIDNO:12中的VH序列和VL序列，包括那些序列的转译后修饰。[0227]在另一方面，本发明提供一种与本文提供的抗PMEL17抗体结合相同表位的抗体。例如，在某些实施方案中，提供一种与包含VH序列SEQIDNO:11或51和VL序列SEQIDNO:12的抗PMELl7抗体结合相同表位的抗体。[0228]在本发明的另一方面，根据任何以上实施方案的抗PMEL17抗体为单克隆抗体，包括嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。在一个实施方案中，抗PMEL17抗体为抗体片段，例如Fv、Fab、Fab’、scFv、双抗体或Fab’）2片段。在另一实施方案中，抗体为实质上全长抗体，例如IgGl抗体或如本文定义的其它抗体类别或同种型。[0229]在另一方面，根据任何以上实施方案的抗PMEL17抗体可并有单一或呈组合形式的如以下章节1-7中所述的任何特征。[0230]抗体31D1及其它实施方案[0231]在一方面，本发明提供一种抗PMELl7抗体，其包含通过称为“750931D1.6.7”并且于2012年4月24日寄存在ATCC处并具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤产生的抗体的至少一个、两个、三个、四个、五个或六个HVR。出于此章节的目的，HVR是由对应于CDR的氨基酸范围描绘，所述⑶R即存在于轻链可变区的氨基酸残基24-34、50-56和89-97以及重链可变区的氨基酸残基31-35B、50-65和95-102处的CDR分别为CDR-Ll、CDR-L2、CDR-L3、CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3。参见Kabat等，SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第5版PublicHealthService,NationalInstitutesofHealth，Bethesda，MD1991〇[0232]在一方面，本发明提供一种抗体，其包含通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的至少一个、至少两个或全部三个VHHVR序列。在一个实施方案中，抗体包含通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的HVR-H3。在另一实施方案中，抗体包含通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的HVR-H3和HVR-L3。在另一实施方案中，抗体包含通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的HVR-H3、HVR-L3和HVR-H2。在另一实施方案中，抗体包含通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的HVR-Hl、HVR-H2和HVR-H3。[0233]在另一方面，本发明提供一种抗体，其包含通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的至少一个、至少两个或全部三个VLHVR序列。在一个实施方案中，抗体包含通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的HVR-Ll、HVR-L2和HVR-L3。[0234]在另一方面，本发明的抗体包含a包含通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的至少一个、至少两个或全部三个VHHVR序列的VH结构域;和⑹包含通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的至少一个、至少两个或全部三个VLHVR序列的VL结构域。[0235]在另一方面，本发明提供一种抗体，其包含通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的HVR-H1、HVR-H2、HVR-H3、HVR-L1、HVR-L2*HVR-L3。[0236]在任何以上实施方案中，抗PMEL17抗体是人源化的。在一个这种实施方案中，抗体为通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的人源化形式。在另一实施方案中，抗PMEL17抗体包含如任何以上实施方案中的HVR，并且进一步包含受体人框架，例如人免疫球蛋白框架或人共有框架。[0237]在另一方面，抗PMEL17抗体包含与通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的VH具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的重链可变结构域VH序列。在某些实施方案中，相对于参照序列，VH序列含有取代例如保守性取代）、插入或缺失，但包含该序列的抗PMEL17抗体保留结合PMEL17的能力。在某些实施方案中，在通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的VH中，总计1至10个氨基酸已被取代、插入和或缺失。在某些实施方案中，取代、插入或缺失发生在HVR外部区域中（即在FR中）。任选地，抗PMEL17抗体包含通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的VH序列，包括该序列的转译后修饰。在具体实施方案中，VH包含一个、两个或三个选自以下的HVR:通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的HVR-Hl、HVR-H2和HVR-H3。[0238]在另一方面，提供一种抗PMEL17抗体，其中所述抗体包含与通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的VL具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的轻链可变结构域VL。在某些实施方案中，相对于参照序列，具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的VL序列含有取代例如保守性取代）、插入或缺失，但包含该序列的抗PMEL17抗体保留结合PMEL17的能力。在某些实施方案中，在通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的VL中，总计1至10个氨基酸已被取代、插入和或缺失。在某些实施方案中，取代、插入或缺失发生在HVR外部区域中（即在FR中）。任选地，抗PMEL17抗体包含通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的VL序列，包括该序列的转译后修饰。在具体实施方案中，VL包含一个、两个或三个选自以下的HVR:通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的HVR-Ll、HVR-L2和HVR-L3。[0239]在另一方面，提供一种抗PMEL17抗体，其中所述抗体包含如以上提供的任何实施方案中的VH和如以上提供的任何实施方案中的VL。在一个实施方案中，抗体包含分别通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的VH序列和VL序列，包括那些序列的转译后修饰。[0240]在另一方面，本发明提供一种与本文提供的抗PMELl7抗体结合相同表位的抗体。例如，在某些实施方案中，提供一种与通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体结合相同表位的抗体。[0241]在本发明的另一方面，根据任何以上实施方案的抗PMEL17抗体为单克隆抗体，包括嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。在一个实施方案中，抗PMEL17抗体为抗体片段，例如Fv、Fab、Fab’、scFv、双抗体或Fab’）2片段。在另一实施方案中，抗体为实质上全长抗体，例如IgG2b抗体或如本文定义的其它抗体类别或同种型。[0242]在另一方面，根据任何以上实施方案的抗PMEL17抗体可并有单一或呈组合形式的如以下章节1-7中所述的任何特征。[0243]1.抗体亲和力[0244]在某些实施方案中，本文提供的抗体的解离常数Kd彡ΙμΜ、彡ΙΟΟηΜ、彡10nM、彡InM、彡O.lnM、彡O.OlnM或彡O.OOlnM，并且任选地彡10—13M。（例如10—8M或10—8M以下，例如10—8M至KT13M，例如10—9M至IT13M。[0245]在一个实施方案中，Kd是如以下分析所述，通过用相关抗体的Fab型式及其抗原进行放射性标记抗原结合分析RIA来测量。Fab对抗原的溶液结合亲和力是通过在一滴定系列的未标记抗原存在下，用最小浓度的125I标记抗原使Fab平衡，接着用抗Fab抗体包被的板捕获所结合抗原来测量参见例如Chen等，J.Mol.Biol.293:865-8811999。为建立分析条件，将]ViicrOTITERk多孔板（ThermoScientific用含5ygml捕获抗Fab抗体CappelLabs的50mM碳酸钠pH9.6包被过夜，并且随后在室温约23°C下用含2%wV牛血清白蛋白的PBS阻断2至5小时。在一非吸附板Nunc#269620中，将IOOpM或26pM[125I]-抗原与相关Fab的连续稀释液混合（例如与Presta等，CancerRes.57:4593-45991997中对抗VEGF抗体Fab-12的评定一致）。接着将相关Fab孵育过夜;然而，孵育可持续较长时期例如约65小时）以确保达到平衡。此后，将混合物转移至捕获板中以在室温下孵育例如1小时）。接着移除溶液并且用含0.1%聚山梨醇酯2TWEEN-20I5可导致某些抗体-药物缀合物的聚集、不溶、毒性或细胞渗透性损失。在某些实施方案中，ADC的平均药物负载量在1至约8;约2至约6;或约3至约5的范围内。实际上，已显示对于某些ADC，每个抗体所对应的药物部分的最佳比率可小于8,并且可为约2至约5US7498298。[0564]在某些实施方案中，使少于理论最大值的药物部分在结合反应期间缀合抗体。抗体可含有例如不与如下论述的药物-接头中间体或接头试剂反应的赖氨酸残基。一般而言，抗体不含有许多可连接于药物部分的游离和反应性半胱氨酸硫醇基;实际上，抗体中的大多数半胱氨酸硫醇残基以二硫桥键形式存在。在某些实施方案中，抗体可用诸如二硫苏糖醇DTT或三羰基乙基膦TCEP的还原剂在部分或完全还原条件下还原以产生反应性半胱氨酸硫醇基。在某些实施方案中，使抗体经受变性条件以显示反应性亲核基团，诸如赖氨酸或半胱氨酸。[0565]ADC的负载量药物抗体比率可以不同方式并且例如通过以下加以控制：（i限制药物-接头中间体或接头试剂相对于抗体的摩尔过量，（ii限制缀合反应时间或温度，和iii部分或限制用于半胱氨酸硫醇改性的还原性条件。[0566]应了解当多于一个亲核基团与药物-接头中间体或接头试剂反应时，则所得产物为分布有一个或多个连接于抗体的药物部分的ADC化合物的混合物。每个抗体所对应的药物的平均数可通过对抗体具有特异性并且对药物具有特异性的双重ELISA抗体分析从混合物计算。可通过质谱法鉴别混合物中的个别ADC分子并且通过HPLC例如疏水性相互作用色谱法）分离（参见例如McDonagh等（2006Prot.Engr.DesignSelection197:299-307;Hamblett等（2004Clin.CancerRes.10:7063_7070;Hamblett，K.J·等“Effectofdrugloadingonthepharmacology,pharmacokinetics,andtoxicityofananti—CD30antibody-drugconjugate，’’摘要编号624，AmericanAssociationforCancer1^861'：11，2004厶1111皿1]\1661:;[1^，2004年3月27-31日，？1'00661;[1^80;1^1:116厶厶0?，第45卷，2004年3月；Alley，S·C·等“ControlIingthelocationofdrugattachmentinantibody-drugconjugates，’’摘要编号627，AmericanAssociationforCancerResearch，2004AnnualMeeting,2004年3月27-31日，ProceedingsoftheAACR，第45卷，2004年3月）。在某些实施方案中，具有单一负载量值的均质ADC可通过电泳或色谱法从结合混合物分离。[0567]d某些制备免疫缀合物的方法[0568]式I的ADC可采用本领域技术人员已知的有机化学反应、条件和试剂，通过若干途径制备，包括：（1使抗体的亲核基团与二价接头试剂反应以经共价键形成Ab-L，随后与药物部分D反应;和2使药物部分的亲核基团与二价接头试剂反应以经共价键形成D-L，随后与抗体的亲核基团反应。经后一途径制备式I的ADC的示例性方法描述于US7498298中，该专利以引用的方式明确并入本文。[0569]抗体上的亲核基团包括但不限于：（iN末端胺基，（ii侧链胺基，例如赖氨酸，iii侧链硫醇基，例如半胱氨酸，和iv糖羟基或氨基在抗体经糖基化的情况下）。氨基、硫醇基和羟基具有亲核性并且能够与包括以下的接头部分和接头试剂上的亲电子基团反应形成共价键：⑴活性酯，诸如NHS酯、HOBt酯、卤基甲酸酯和酸卤化物；（ii烷基和苯甲基卤化物，诸如卤基乙酰胺;和（iii醛、酮、羧基和马来酰亚胺基团。某些抗体具有可还原链间二硫化物，即半胱氨酸桥。可通过用诸如DTT二硫苏糖醇或三羰基乙基膦TCEP的还原剂处理以使抗体完全或部分还原来使抗体具有用于与接头试剂结合的反应性。各半胱氨酸桥因此将在理论上形成两个反应性硫醇亲核体。其它亲核基团可通过修饰赖氨酸残基，例如通过使赖氨酸残基与2-亚胺基硫杂环戊烧特劳特氏试剂Traut’sreagent反应，从而使得胺转化成硫醇，而引入抗体中。反应性硫醇基也可通过引入一个、两个、三个、四个或更多个半胱氨酸残基而引入抗体中（例如通过制备包含一个或多个非天然半胱氨酸氨基酸残基的变异抗体来实现）。[0570]本发明的抗体-药物缀合物也可通过抗体上的亲电子基团（诸如醛或酮羰基与接头试剂或药物上的亲核基团之间的反应来产生。接头试剂上的适用亲核基团包括但不限于酰肼、肟、氨基、肼、胺苯硫脲、肼羧酸酯和芳基酰肼。在一个实施方案中，修饰抗体以引入能够与接头试剂或药物上的亲核取代基反应的亲电子部分。在另一实施方案中，糖基化抗体的糖可例如用过碘酸盐氧化试剂氧化以形成可与接头试剂或药物部分的氨基反应的醛或酮基团。所得亚胺希夫碱Schiffbase基团可形成稳定键，或可例如通过硼氢化物试剂还原以形成稳定胺键。在一个实施方案中，糖基化抗体的碳水化合物部分与半乳糖氧化酶或偏高碘酸钠的反应可在抗体中产生可与药物上的适当基团反应的羰基（醛和酮）Hermanson,BioconjugateTechniques。在另一实施方案中，含有N末端丝氨酸或苏氨酸残基的抗体可与偏高碘酸钠反应，从而产生醛而非第一氨基酸Geoghegan和Stroh，（1992BioconjugateChem.3:138-146;US5362852。可使这种醛与药物部分或接头亲核体反应。[0571]药物部分上的示例性亲核基团包括但不限于:胺、硫醇、羟基、酰肼、肟、肼、胺苯硫脲、肼羧酸酯和芳基酰肼基团，其能够与包括以下的接头部分和接头试剂上的亲电子基团反应形成共价键：⑴活性酯，诸如NHS酯、HOBt酯、卤基甲酸酯和酸卤化物；（ii烷基和苯甲基卤化物，诸如卤基乙酰胺；（iii醛、酮、羧基和马来酰亚胺基团。[0572]可用于制备ADC的非限制性示例性交叉接头试剂在本文中描述于标题为“示例性接头”的章节中。使用这类交叉接头试剂来连接两个部分包括蛋白质部分和化学部分）的方法在本领域是已知的。在一些实施方案中，可例如通过重组技术或肽合成来制备包含抗体和细胞毒性剂的融合蛋白。重组DNA分子可包含编码缀合物的抗体和细胞毒性部分的区域，所述区域彼此邻近或由编码不破坏缀合物的所需特性的接头肽的区域分开。[0573]在另一实施方案中，抗体可缀合于“受体”（诸如抗生蛋白链菌素）以用于肿瘤预靶向中，其中向患者施用抗体-受体缀合物，随后使用清除剂从循环移除未结合的缀合物并且接着施用缀合于细胞毒性剂例如药物或放射性核苷酸的“配体”（例如抗生蛋白）。[0574]E.用于诊断和检测的方法和组合物[0575]在某些实施方案中，本文提供的任何抗PMEL17抗体都适用于检测生物样品中PMEL17的存在。如本文所用的术语“检测”涵盖定量或定性检测。“生物样品”包含例如细胞或组织例如活检材料，包括癌性或潜在癌性皮肤组织，包括可能或确认的黑素瘤;来自诸如皮肤T细胞淋巴瘤的淋巴瘤的活检材料;和来自肾脏肿瘤的活检材料）。[0576]在一个实施方案中，提供一种用于诊断或检测方法的抗PMEL17抗体。在另一方面，提供一种检测生物样品中PMEL17的存在的方法。在某些实施方案中，所述方法包括使生物样品与如本文所述的抗PMEL17抗体在容许所述抗PMEL17抗体结合PMEL17的条件下接触，和检测在所述抗PMEL17抗体与所述生物样品中的PMEL17之间是否形成复合物。此方法可以是体外或体内方法。在一个实施方案中，抗PMEL17抗体用于选择适于用抗PMEL17抗体进行的疗法的受试者，例如当PMEL17为用于选择患者的生物标记时。在另一实施方案中，生物样品为细胞或组织癌性或潜在癌性皮肤组织，包括可能或确认的黑素瘤;来自诸如皮肤T细胞淋巴瘤的淋巴瘤的活检材料;和来自肾脏肿瘤的活检材料）。[0577]在另一实施方案中，例如出于诊断、预测或分级癌症;确定适当疗法过程;或监测癌症对疗法的反应的目的，在体内使用抗PMEL17抗体例如通过体内成像来检测受试者的PMEL17阳性癌症。本领域已知的一种用于体内检测的方法为免疫正电子发射断层摄影术免疫PET，如例如vanDongen等，TheOncologist12:1379-13892007和Verel等，J.Nucl.Med.44:1271-12812003中所述。在这类实施方案中，提供一种用于检测受试者的PMEL17阳性癌症的方法，所述方法包括向患有或疑似患有PMEL17阳性癌症的个体施用经标记抗PMEL17抗体，和检测所述受试者中的所述经标记抗PMEL17抗体，其中检测到所述经标记抗PMELl7抗体指示在所述受试者中存在PMELl7阳性癌症。在某些这类实施方案中，经标记抗PMEL17抗体包含缀合于诸如680、18?、64：11、86¥、7^、8!^和1241的正电子发射体的抗PMELl7抗体。在具体实施方案中，正电子发射体为89Zr。[0578]在其它实施方案中，诊断或检测方法包括使固定于基质的第一抗PMEL17抗体与欲测试PMEL17的存在的生物样品接触，使所述基质暴露于第二抗PMEL17抗体，和检测所述第二抗PMEL17是否缀合于所述第一抗PMEL17抗体与所述生物样品中的PMEL17之间的复合物。基质可以是任何支撑性介质，例如玻璃、金属、陶瓷、聚合珠粒、载片、芯片和其它基质。在某些实施方案中，生物样品包含细胞或组织癌性或潜在癌性皮肤组织，包括可能或确认的黑素瘤;来自诸如皮肤T细胞淋巴瘤的淋巴瘤的活检材料;和来自肾脏肿瘤的活检材料）。在某些实施方案中，第一或第二抗PMELl7抗体为本文所述的任何抗体。[0579]可根据任何以上实施方案诊断或检测的示例性病症包括PMEL17阳性癌症，诸如PMEL17阳性皮肤癌诸如黑素瘤）；PMEL17阳性淋巴瘤诸如皮肤T细胞淋巴瘤）；和PMEL17阳性肾脏肿瘤。在一些实施方案中，PMEL17阳性癌症为得到大于“0”的抗PMEL17免疫组织化学IHC计分的癌症，计分“0”对应于在本文于实施例K中所述的条件下，在90%的肿瘤细胞中染色极微弱或无染色。在一些实施方案中，PMEL17阳性癌症以如在本文于实施例K中所述的条件下使用31D1抗体31D1表达杂交瘤于2012年4月24日以750931D1.6.7寄存在ATCC处所定义的1+、2+或3+级表达PMEL17。在一些实施方案中，PMEL17阳性癌症为根据原位杂交ISH分析，表达PMEL17的癌症。在一些这类实施方案中，使用与用于IHC的计分系统类似的计分系统。在一些实施方案中，PMEL17阳性癌症为根据检测PMEL17mRNA的逆转录酶PCRRT-PCI?分析，表达PMEL17的癌症。在一些实施方案中，RT-PCR为定量RT-PCR。[0580]在某些实施方案中，提供经标记抗PMEL17抗体。标记包括但不限于直接检测的标记或部分诸如荧光标记、发色标记、电子密集标记、化学发光标记和放射性标记）以及例如经酶促反应或分子相互作用间接检测的部分，诸如酶或配体。示例性标记包括但不限于放射性同位素3平、14：、1251、3!1和1311、荧光团诸如稀土螯合物或荧光素及其衍生物）、若丹明及其衍生物、丹酰基、伞形酮、荧光素酶例如萤火虫荧光素酶和细菌荧光素酶美国专利号4，737，456、荧光素、2，3-二氢呔嗪二酮、辣根过氧化酶HRP、碱性磷酸酶、β-半乳糖苷酶、葡糖淀粉酶、溶菌酶、糖氧化酶例如葡萄糖氧化酶、半乳糖氧化酶和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶）、与采用过氧化氢以氧化染料前体的酶诸如HRP、乳过氧化酶或微过氧化酶偶合的杂环氧化酶诸如尿酸酶uricase和黄嘌呤氧化酶）、生物素抗生蛋白、自旋标记、噬菌体标记、稳定自由基等。在另一实施方案中，标记为正电子发射体。正电子发射体包括但不限于68Ga、18F、64Cu、86Y、76Br、89Zr和124I。在具体实施方案中，正电子发射体为89Zr。[0581]F.药物制剂[0582]如本文所述的抗PMEL17抗体或免疫缀合物的药物制剂是通过混合具有所需纯度的此抗体或免疫缀合物与一种或多种任选的药学上可接受的载体（Remington’sPharmaceuticalSciences第16版,Osol，Α·编（1980以冻干制剂或水溶液形式来制备。药学上可接受的载体通常在所用剂量和浓度下对接受者无毒，并且包括但不限于:缓冲剂，诸如磷酸盐、柠檬酸盐和其它有机酸;抗氧化剂，包括抗坏血酸和甲硫氨酸;防腐剂诸如十八烷基二甲基苯甲基氯化铵;氯化六羟季铵;氯化苯甲烃铵;苄索氯铵;苯酚、丁醇或苯甲醇；对羟基苯甲酸烷酯，诸如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯；儿茶酚；间苯二酚;环己醇;3-戊醇;和间甲酚）；低分子量小于约10个残基多肽;蛋白质，诸如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水性聚合物，诸如聚乙烯吡咯烷酮;氨基酸，诸如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸或赖氨酸;单糖、双糖和其它碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精;螯合剂，诸如EDTA;糖，诸如蔗糖、甘露糖醇、海藻糖或山梨糖醇;成盐相对离子，诸如钠;金属络合物例如Zn-蛋白质络合物）；和或非离子表面活性剂，诸如聚乙二醇PEG。本文的示例性药学上可接受的载体进一步包括间质药物分散剂，诸如可溶性中性-活性透明质酸酶糖蛋白（sHASEGP，例如人可溶性PH-20透明质酸酶糖蛋白，诸如rHuPH20HYLENEX',BaxterInternational公司）。某些示例性sHASEGP包括rHuPH20和使用方法描述于美国专利公布号20050260186和20060104968中。在一方面，sHASEGP与一种或多种其它葡糖胺聚糖酶，诸如软骨素酶组合。[0583]示例性冻干抗体或免疫缀合物制剂描述于美国专利号6，267，958号中。水性抗体或免疫缀合物制剂包括美国专利号6，171，586和W02006044908中所述的那些，后述制剂包括组氨酸-乙酸盐缓冲剂。[0584]本文的制剂也可含有多于一种如为所治疗的特定适应症所必需的活性成分，优选为具有不会不利地影响彼此的互补活性的活性成分。[0585]活性成分可包埋在例如通过凝聚技术或通过界面聚合所制备的微囊中，例如分别于胶态药物递送系统例如脂质体、白蛋白微球、微乳液、纳米颗粒和纳米囊）中或于巨乳液中的羟甲基纤维素或明胶-微囊和聚（甲基丙烯酸甲酯微囊。这类技术公开于Remington’sPharmaceuticalSciences第16版，Osol，Α·编（1980中。[0586]可制备持续释放制剂。持续释放制剂的适合实例包括含有抗体或免疫缀合物的固体疏水性聚合物的半透性基质，所述基质呈定形物品，例如薄膜或微囊形式。[0587]欲用于体内给药的制剂通常是无菌的。无菌性可易于例如通过经无菌过滤膜过滤来实现。[0588]G.治疗方法和组合物[0589]本文提供的任何抗PMEL17抗体或免疫缀合物都可用于例如治疗方法的方法。[0590]在一方面，本文提供的抗PMEL17抗体或免疫缀合物用于抑制PMEL17阳性细胞增殖的方法，所述方法包括在容许所述抗PMEL17抗体或免疫缀合物结合该细胞的表面上的PMEL17的条件下使所述细胞暴露于所述抗PMEL17抗体或免疫缀合物，借此抑制所述细胞的增殖。在某些实施方案中，所述方法为体外或体内方法。在一些实施方案中，细胞为黑素瘤细胞。在一些实施方案中，细胞为淋巴瘤细胞，诸如皮肤T细胞淋巴瘤细胞。在一些实施方案中，细胞为肾脏肿瘤细胞。[0591]可使用可自PromegaMadison，WI购得的CellTiter-Glo™发光细胞活力分析来分析体外细胞增殖抑制。该分析基于对存在的ATP定量来测定培养物中的活细胞数，ATP为具有代谢活性的细胞的指标。参见Crouch等（1993J.Immunol.Meth.160:81-88;美国专利号6602677。分析可以96或384孔形式进行，从而使得可经受自动高通量筛选HTS。参见Cree等（1995AntiCancerDrugs6:398-404。分析程序涉及向培养细胞中直接添加单一试剂（Ce丨丨Titer-Gbui试剂）。这导致细胞溶解和生成通过荧光素酶反应所产生的发光信号。发光信号与存在的ATP的量成比例，存在的ATP的量与培养物中存在的活细胞数成正比。数据可由亮度计或CCD摄影机成像装置记录。发光输出表示为相对光单位RLU。[0592]在另一方面，提供一种用作药剂的抗PMEL17抗体或免疫缀合物。在其它方面，提供一种用于治疗方法中的抗PMEL17抗体或免疫缀合物。在某些实施方案中，提供一种用于治疗PMEL17阳性癌症的抗PMEL17抗体或免疫缀合物。在某些实施方案中，本发明提供一种用于治疗患有PMEL17阳性癌症的个体的方法中的抗PMEL17抗体或免疫缀合物，所述方法包括向所述个体施用有效量的所述抗PMEL17抗体或免疫缀合物。在一个这种实施方案中，所述方法进一步包括向个体施用有效量的至少一种例如如下所述的其它治疗剂。[0593]在另一方面，本发明提供抗PMEL17抗体或免疫缀合物用于制造或制备药剂的用途。在一个实施方案中，药剂是用于治疗PMEL17阳性癌症。在另一实施方案中，药剂是用于治疗PMEL17阳性癌症的方法中，所述方法包括向患有PMEL17阳性癌症的个体施用有效量的所述药剂。在一个这种实施方案中，所述方法进一步包括向个体施用有效量的至少一种例如如下所述的其它治疗剂。[0594]在另一方面，本发明提供一种用于治疗PMEL17阳性癌症的方法。在一个实施方案中，所述方法包括向患有此PMEL17阳性癌症的个体施用有效量的抗PMEL17抗体或免疫缀合物。在一个这种实施方案中，所述方法进一步包括向个体施用有效量的至少一种如下所述的其它治疗剂。[0595]根据任何以上实施方案的PMELl7阳性癌症可为例如PMELl7阳性皮肤癌包括黑素瘤）；PMEL17阳性淋巴瘤储如皮肤T细胞淋巴瘤）；和PMEL17阳性肾脏肿瘤。在一些实施方案中，PMEL17阳性癌症为得到大于“0”的抗PMEL17免疫组织化学（IHC或原位杂交（ISH计分的癌症，计分“0”对应于在本文于实施例K中所述的条件下，在90%的肿瘤细胞中染色极微弱或无染色。在另一实施方案中，PMEL17阳性癌症以如在本文于实施例K中所述的条件下使用31D1抗体31D1表达杂交瘤于2012年4月24日以750931D1.6.7寄存在ATCC处所定义的1+、2+或3+级表达PMEL17。在一些实施方案中，PMEL17阳性癌症为根据检测PMEL17mRNA的逆转录酶PCROTT-PCI?分析，表达PMELl7的癌症。在一些实施方案中，RT-PCR为定量RT-PCR。[0596]在一些实施方案中，提供治疗患有PMEL17阳性癌症的个体的方法，其中所述PMEL17阳性癌症对第一治疗剂具有抗性。在一些实施方案中，所述方法包括向个体施用有效量的包含结合PMEL17的抗体的免疫缀合物。在一些实施方案中，PMEL17阳性癌症为黑素瘤。在一些实施方案中，第一治疗剂包含结合除PMEL17以外的抗原的第一抗体。在一些实施方案中，第一治疗剂为包含结合除PMEL17以外的抗原的第一抗体和一细胞毒性剂的第一免疫缀合物。在一些实施方案中，第一抗体结合选自内皮素B受体ETBR、酪氨酸酶相关蛋白质ITYRPl、细胞毒性T淋巴细胞抗原4CTLA-4和糖蛋白NMBGPNMB的抗原。在一些实施方案中，第一抗体结合ETBR。在一些这类实施方案中，第一免疫缀合物包含抗ETBR抗体hu5E9·vl，诸如免疫缀合物hu5E9·vl-MC-val-cit-PAB-MMAE。参见美国公布号US2011的高变区（HVR在本文中例如显示于SEQIDNO:33至38中。hu5E9.vl的重链可变区和轻链可变区在本文中例如分别显示于SEQIDN0:40和39中。在一些实施方案中，第一细胞毒性剂与包含结合PMEL17的抗体的免疫缀合物的细胞毒性剂不同。在一些这类实施方案中，第一细胞毒性剂为MMAE诸如当第一免疫缀合物为hu5E9.Vl-MC-val-cit-PAB-MMAE时并且包含结合PMEL17的抗体的免疫缀合物的细胞毒性剂选自卡里奇霉素、吡咯并苯并二氮杂卓和奈莫柔比星衍生物。在一些实施方案中，包含结合PMEL17的抗体的免疫缀合物的细胞毒性剂选自吡咯并苯并二氮杂卓和奈莫柔比星衍生物。[0597]在一些实施方案中，提供治疗患有癌症的个体的方法，其中所述癌症对第一治疗剂具有抗性。在一些实施方案中，第一治疗剂为包含经第一接头连接于第一细胞毒性剂的第一抗体的第一免疫缀合物。在一些实施方案中，治疗患有对第一治疗剂诸如第一免疫缀合物具有抗性的癌症的个体的方法包括施用包含经第二接头连接于第二细胞毒性剂的第二抗体的第二免疫缀合物。在一些实施方案中，第一抗体和第二抗体结合不同抗原并且第一细胞毒性剂与第二细胞毒性剂相同或不同。在一些实施方案中，第一抗体和第二抗体结合存在于至少一些相同细胞上的不同抗原。在一些实施方案中，第一抗体和第二抗体结合不同抗原并且第一细胞毒性剂与第二细胞毒性剂不同。在一些实施方案中，第一抗体和第二抗体结合相同抗原，并且第一细胞毒性剂与第二细胞毒性剂不同。在任何上述实施方案中，第一接头与第二接头可相同或不同。在一些实施方案中，第一抗体和二抗体结合不同抗原，第一接头与第二接头不同，并且第一细胞毒性剂与第二细胞毒性剂不同。[0598]根据任何以上实施方案的“个体”可为人。[0599]在另一方面，本发明提供包含本文提供的任何抗PMEL17抗体或免疫缀合物的例如用于任何以上治疗方法中的药物制剂。在一个实施方案中，药物制剂包含本文提供的任何抗PMEL17抗体或免疫缀合物和药学上可接受的载体。在另一实施方案中，药物制剂包含本文提供的任何抗PMEL17抗体或免疫缀合物和至少一种例如如下所述的其它治疗剂。[0600]本发明的抗体或免疫缀合物可单独或与其它药剂组合用于疗法中。例如，本发明的抗体或免疫缀合物可与至少一种其它治疗剂共同施用。[0601]在一些实施方案中，治疗癌症的方法包括与第二免疫缀合物组合施用本文所述的免疫缀合物，所述第二免疫缀合物包含结合选自内皮素B受体ETBR、酪氨酸酶相关蛋白质ITYRPl、细胞毒性T淋巴细胞抗原4CTLA-4和糖蛋白NMBGPNMB的抗原的抗体。在一些这类实施方案中，第二免疫缀合物的细胞毒性剂选自MMAE、卡里奇霉素、奈莫柔比星衍生物和吡咯并苯并二氮杂卓。本文所述的免疫缀合物的细胞毒性剂与第二免疫缀合物的细胞毒性剂可相同或不同。在一些实施方案中，细胞毒性剂不同。在一些实施方案中，各细胞毒性剂选自MMAE、奈莫柔比星衍生物和吡咯并苯并二氮杂卓。[0602]在一些实施方案中，治疗癌症的方法包括与包含结合ETBR的抗体的第二免疫缀合物组合施用本文所述的免疫缀合物。在一些这类实施方案中，癌症为PMEL17阳性癌症也是ETBR阳性癌症。确定癌症是否也为ETBR阳性可通过包括但不限于以下的任何方法进行:本文所述的用于确定癌症是否为PMEL17阳性的方法和美国公布号US20110206702中所述的方法。在一些实施方案中，结合ETBR的抗体为hu5E9.vl，其例如描述于美国公布号US20110206702中。在一些实施方案中，结合ETBR的抗体包含含有序列SEQIDN0:33的HVRH1、含有序列SEQIDN0:34的HVRH2、含有序列SEQIDN0:35的HVRH3、含有序列SEQIDN0:36的HVRLI、含有序列SEQIDNO:37的HVRL2、和含有序列SEQIDNO:38的HVRL3。在一些实施方案中，结合ETBR的抗体包含含有序列SEQIDN0:40的重链可变区和含有序列SEQIDNO:39的轻链可变区。[0603]在一些实施方案中，治疗癌症的方法包括与包含抗PMEL17抗体诸如本文所述的那些）的免疫缀合物组合施用抗ETBR-MC-val-cit-PAB-MMAE免疫缀合物，诸如hu5E9.vl-MC-val-cit-PAB-MMAE参见例如美国公布号US20110206702。包含抗PMEL17抗体的免疫缀合物可与包含抗ETBR抗体的免疫缀合物包含相同或不同的细胞毒性剂。在一些实施方案中，例如当抗ETBR免疫缀合物包含MMAE时，包含抗PMEL17抗体的免疫缀合物包含不同的细胞毒性剂，诸如奈莫柔比星衍生物或吡咯并苯并二氮杂卓。[0604]“组合”给药涵盖联合给药其中两种或更多种治疗剂包括在同一或单独制剂中）和分开给药，在该情况下，本发明的抗体或免疫缀合物的给药可发生在其它治疗剂诸如抗ETBR免疫缀合物和或佐剂的给药之前、同时和或之后。在一些实施方案中，抗PMEL17免疫缀合物的给药和抗ETBR免疫缀合物的给药发生在彼此的约一个月内、或约一周、两周或三周内、或约一天、两天、三天、四天、五天或六天内。本发明的抗体或免疫缀合物也可与放射疗法组合使用。[0605]本发明的抗体或免疫缀合物和任何其它治疗剂可通过任何适合手段施用，包括肠胃外、肺内和鼻内给药，并且在需要用于局部治疗时，包括病灶内给药。肠胃外输注包括肌肉内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下给药。给药可通过任何适合途径进行，例如通过注射，诸如静脉内或皮下注射，这在某种程度上取决于给药是短期的抑或是长期的。本文涵盖各种给药方案，包括但不限于单次给药或历经各个时间点多次给药、大剂量给药和脉冲输注。[0606]本发明的抗体或免疫缀合物将以符合良好医学规范的方式配制、给药和施用。在此情形下的考虑因素包括所治疗的具体病症、所治疗的具体哺乳动物、个别患者的临床病状、病症的病因、药剂递送部位、给药方法、给药方案和医学从业者已知的其它因素。抗体或免疫缀合物无须但任选地与一种或多种当前用于预防或治疗所述病症的药剂一起配制。这类其它药剂的有效量取决于制剂中存在的抗体或免疫缀合物的量、病症或治疗类型、和以上论述的其它因素。这类药剂通常以与如本文所述相同的剂量和用如本文所述的给药途径，或以本文所述的剂量的约1%至99%，或以凭经验临床上确定为适当的任何剂量并且通过凭经验临床上确定为适当的任何途径进行使用。[0607]对于预防或治疗疾病，本发明的抗体或免疫缀合物（当单独或与一种或多种其它额外治疗剂组合使用时）的适当剂量将取决于欲治疗疾病的类型、抗体或免疫缀合物的类型、疾病的严重性和病程、施用抗体或免疫缀合物是出于预防目的抑或治疗目的、先前疗法、患者的临床病史和对抗体或免疫缀合物的反应、和主治医师的判断。抗体或免疫缀合物适合一次性或历经一系列治疗施用于患者。取决于疾病的类型和严重性，约lygkg至15mgkg例如0.lmgkg-10mgkg的抗体或免疫缀合物可为用于向患者施用的初始候选剂量，无论例如通过一或多次分开给药或通过连续输注。依据以上提及的因素，一种典型每日剂量可能在约lygkg至100mgkg或更多的范围内。对于历经数天或更长时间的重复给药，依据病状，治疗将通常持续直至出现所需疾病症状抑制。抗体或免疫缀合物的一种示例性剂量将在约0·05mgkg至约10mgkg的范围内。因此，可向患者施用约0·5mgkg、2·Omgkg、4.0mgkg或10mgkg的一种或多种剂量域其任何组合）。这类剂量可间歇施用，例如每周或每三周一次例如以使患者接受约两剂至约二十剂，或例如约六剂抗体）。最初可施用较高的负荷剂量，接着施用一种或多种较低剂量。然而，其它剂量方案可能适用。此疗法的进展易于通过常规技术和分析加以监测。[0608]应了解任何以上制剂或治疗方法都可使用本发明的免疫缀合物与抗PMEL17抗体两者进行。[0609]H.制品[0610]在本发明的另一方面，提供一种含有适用于治疗、预防和或诊断上述病症的材料的制品。制品包含容器和在该容器上或与该容器相伴的标签或包装说明书。适合容器包括例如瓶、小瓶、注射器、静脉内溶液袋等。容器可由诸如玻璃或塑料的多种材料形成。容器容纳单独或与有效治疗、预防和或诊断病症的另一组合物组合的组合物并且可具有无菌进入孔例如容器可为具有可由皮下注射针刺穿的塞的静脉内溶液袋或小瓶）。组合物中的至少一种活性剂为本发明的抗体或免疫缀合物。标签或包装说明书指示组合物用于治疗所选病状。此外，制品可包含a其中含有组合物的第一容器，其中所述组合物包含本发明的抗体或免疫缀合物;和b其中含有组合物的第二容器，其中所述组合物包含另一种细胞毒性剂或另外治疗剂。本发明的此实施方案中的制品可进一步包括指示组合物可用于治疗特定病状的包装说明书。或者或另外，制品可进一步包括第二或第三容器，其包含药学上可接受的缓冲剂，诸如注射用抑菌水（BWFI、磷酸盐缓冲生理盐水、林格氏溶液（Ringer’ssolution或右旋糖溶液。其可进一步包括自商业和使用者观点看来合乎需要的其它材料，包括其它缓冲剂、稀释剂、过滤器、针和注射器。[0611]I.生物材料的寄存[0612]以下生物材料已经寄存在美国典型培养物中心（AmericanTypeCultureCollection,10801UniversityBoulevard,Manassas,VA20110-2209,USAATCC：[0613][0614]以上参照的寄存杂交瘤产生本文提及的31DI抗体。[0615]此寄存是根据布达佩斯条约关于出于专利程序目的进行微生物寄存的国际承认的规定和据此的法规布达佩斯条约而作出的。这保证自寄存日期起维持寄存物的活培养物30年并且在最新近请求供给寄存物样品之后维持至少五5年。寄存物将可根据布达佩斯条约的条款通过ATCC而获得，并且服从Genentech公司与ATCC之间的协议，该协议保证由寄存人关于寄存材料对公众的可得性所施加的所有限制都将在授予相关美国专利后不可撤销地移除，保证在颁予相关美国专利后或在任何美国专利申请或外国专利申请公诸于众无论哪个首先实现后寄存物的培养物的子代可持久并且不受限制地为公众所获得，并且保证子代可为由美国专利和商标委员根据35U.S.C.§122和依据其的委员准则（包括37C.F.R.§1.14,其中特别参照8860G638所确定对其授权者所获得。[0616]III.实施例[0617]以下为本发明的方法和组合物的实施例。应了解鉴于以上提供的一般性描述，可实践各种其它实施方案。[0618]A.人PMELl7基因表达[0619]对于PMEL17mRNA在多个人肿瘤和正常活检样品中的表达的分析，使用自GeneLogic公司^Gaithersburg,MD获得的Affymetrix数据进行分析。所示分析是针对探针组ID209848_s_at，该分析使用HGU133Plusv2GeneChip对3879个正常人组织样品、1605个人癌症组织样品（1291个原发性样品和314个转移性样品）和3872个人非癌症疾病组织样品来进行。使用AffymetrixMAS微阵列分析套件）第5.0版软件，以样品表达值相对于截尾均值500定标来标准化微阵列数据。以类似方式对培养的细胞系进行分析。[0620]结果显示在图IA和图IB中。y轴上的尺度指示基于杂交信号强度的基因表达水平。在图IA中，点出现在从各所列组织的名称延伸的线条的上方和下方。出现在线条上方的点表示正常组织中的基因表达，而出现在线条下方的点表示肿瘤和患病组织中的基因表达。如图IA中所示，PMEL17mRNA的高水平表达主要局限于源于皮肤的赘生物，并且所有这类赘生物都分类为黑素瘤。也为阳性的少量良性肾脏肿瘤分类为类上皮血管肌脂瘤，并且少数阳性淋巴瘤经鉴别为皮肤T细胞淋巴瘤。图IB显示PMEL17在许多黑素瘤细胞系中过度表达，而在源于其它人癌症的细胞系中有少许表达或无表达。BC，乳癌;CRC，结肠直肠癌;GB，胶质母细胞瘤;NSCLC，非小细胞肺癌;SC，小细胞肺癌;NHL，非霍奇金氏淋巴瘤;MEL，黑素瘤;MM，多发性骨髓瘤;OVCA，卵巢癌;PANC，胰腺癌;PROS，前列腺癌。在所分析的487个不同细胞系中，仅5%在图上进行鉴别。[0621]B.小鼠单克隆抗体产生[0622]使用以下程序产生针对人PMEL17的单克隆抗体。使用先前描述的方案参见例如Herweijer，H.和Wolff,J.A.2003GeneTher106,453-458;Liu，F·，Song,YjPLiu，D.1999GeneTher67,1258-1266;和Zhang等（1999HumGeneTher1010,1735-1737的修改版本，经流体动力学尾静脉HTV注射用含纯化的人PMEL17ECD在CHO细胞中表达的具有C末端Fc的氨基酸25至591的Ribi佐剂组1或用编码全长PMEL17的质体DNA组2使两组单独BalbC小鼠（CharlesRiverLaboratories,Hollister,CA超免疫。在融合之前3天用蛋白质（组1或过度表达PMEL17的PC3细胞组2最终加强免疫之后，使来自两个组的根据FACS显示强烈特异性结合PC3细胞的小鼠B细胞以1:1比率与X63-Ag8.653小鼠骨髓瘤细胞（美国典型培养物中心，Rockwille,MD电融合BTXECM2001，HarvardApparatus，以100，000个细胞孔铺在含有IX重氮丝氨酸和次黄嘌呤HA，Sigma-Aldrich，St.Louis，MO的培养基中，并且在37°C、7%C02下孵育。[0623]在10-14天之后，收集上清液并且通过ELISA和FACS加以筛选。对于FACS分析，使黑素瘤细胞系SK_MEL_23由CenterforCancerResearch,TumorImmunologySection的PaulRobbins提供）、1300mel由CenterforCancerResearch,TumorImmunologySection的PaulRobbins提供）、SKMEL5ATCCHTB-70和UACC257NationalCancerInstitute、正常黑素细胞Invitrogen,Carlsbad,CA和稳定表达人PMEL17的前列腺癌细胞系PC3与抗体接触。根据荧光活化细胞拣选FACS，一种来自PMEL17免疫小鼠的抗体称为17A9与活黑素瘤细胞、正常人黑素细胞和稳定表达PMEL17cDNA的PC3细胞系强烈反应，但不与亲本PC3细胞系强烈反应。根据FACS，自DNA免疫小鼠获得的另一抗体77E6也为阳性，但77E6与表达PMEL17的活细胞系的反应与17A9稍微不一致并且比17A9更微弱。[0624]接着扩增并且通过限制性稀释来亚克隆根据FACS显示强烈PMEL17特异性结合的阳性克隆。在两轮亚克隆和筛选之后，在生物反应器（IntegraBiosciences,Chur，Switzerland中培养最终克隆并且如先前Hongo，等2000Hybridoma19⑷，303-315所述通过蛋白质A亲和色谱法纯化上清液。选择三个抗体克隆863、15?2、17六9、和来自PMEL17E⑶免疫小鼠的31D1、和来自DNA免疫小鼠的一个抗体克隆77E6进行进一步分析。[0625]C.小鼠单克隆抗体克隆[0626]使用标准方法从产生鼠8G3、15F2和17A9的杂交瘤细胞提取总RNA。用针对重链和轻链的简并引物，使用RT-PCR扩增可变轻VL结构域和可变重VH结构域。正向引物对VL和VH区的N末端氨基酸序列具有特异性。分别设计LC和HC反向引物以与在物种之间高度保守的恒定轻结构域CL和恒定重结构域ICHl中的区域退火。使用常规测序方法测定插入物的聚核苷酸序列。17A9VH和VL氨基酸序列分别显示于SEQIDNO:50和2中。重链高变区HVRH1、H2和H3分别显示于SEQIDN0:3、4和5中。轻链高变区（HVRL1、L2和L3分别显示于SEQIDN0:6、7和8中。8G3VH和VL氨基酸序列分别显示于SEQIDN0:49和10中。重链高变区HVRH1、H2和H3分别显示于SEQIDN0:13、14和15中。轻链高变区（HVRL1、L2和L3分别显示于SEQIDNO:16、7和8中。15F2VH和VL氨基酸序列分别显示于SEQIDNO:51和12中。重链高变区（HVRH1、H2和H3分别显示于SEQIDN0:20、21和22中。轻链高变区（HVRL1、L2和L3分别显示于SEQIDNO:23、24和25中。[0627]抗体8G3、17A9和15F2的轻链和重链可变区的比对分别显示于图2A和图2B中。[0628]D.单克隆抗体表位定位[0629]用于表位定位的所有构建体都通过PCR扩增各片段并亚克隆入具有N末端gD标记的pRKtkneo载体或具有N末端gD标记和C末端GPI锚的pRKtkneo载体中来制备。使用FuGene6RocheAppliedScience进行转染，并且空载体用作对照。将全长人PMEL17亚克隆入具有N末端gD标记的pRKtkneo载体中。[0630]使信号序列和gD表位标记融合于一系列缺失突变体的N末端序列，接着序列在哺乳动物细胞中表达并且通过免疫印迹法分析溶解产物与17A9或77E6的反应性。测试的N末端缺失包括A1〇〇、A255、Δ292、Δ315、Δ444、Δ515和Δ567。[0631]此外，将具有N末端gD标记和C末端GPI锚的C末端缺失物短暂转染入293细胞中并且通过FACS分析抗体结合。测试的C末端缺失物包括PMEL1725—125、PMEL1725—1Q5、PMEL1725—85、PMEL1725-65和PMEL1725-45。最后，通过免疫印迹法分析包含从氨基酸515直至跨膜结构域的区域，但缺乏细胞质区域的PMEL17片段（“Δ515-C”）和仅包含具有N末端gD标记和C末端GPI锚的细胞质结构域的PMEL17片段与77E6的反应性。[0632]该实验的结果显示于图3中。图3A示出N末端PMEL17缺失突变体、以及显示与抗gD抗体和77E6的反应性的免疫印迹的图。77E6与所有测试的N末端缺失物反应。图3B示出Δ515-C片段和细胞质结构域片段、以及显示与抗gD抗体和77Ε6的反应性的免疫印迹的图。77E6结合含有细胞质结构域的所有缺失突变体，但不结合缺乏细胞质结构域的Δ515-C突变体。这些结果确认77E6结合PMELl7的细胞质结构域内的表位。[0633]图3C示出免疫印迹，其显示与抗gD抗体和17A6的反应性。17A6仅结合全长PMELl7而非Δ225或Δ100突变体。图3D示出C末端PMEL17缺失突变体、和对抗gD、17A9和31D1抗体与那些突变体的结合的FACS分析的图。17A9仅结合PMEL1725-125，而非包括PMEL1725-1Q5在内的任何其它突变体，这表明17A9结合PMEL17的氨基酸105至125的区域内的表位。31D1结合所有测试的片段，包括PMEL1725-45,表明31D1结合PMEL17的氨基酸25至45的区域内的表位。[0634]E.PMELl7表位的亚细胞定位[0635]已知PMEL17在其定向至黑素体期间经受相当复杂的加工，其中一些涉及最终导致有限含RPT结构域片段沉积入成熟细胞器内的原纤结构中的蛋白水解裂解。此加工涉及由前蛋白转化酶在Arg-469处裂解，从而产生通过二硫键保持系链的N末端Ma和C末端Μβ片段。Μβ片段进一步由金属蛋白酶在Gln-583处裂解和由γ-分泌酶在跨膜区域中裂解。因此，PMELl7的含有细胞质和N末端表位的区域在此加工期间解离。[0636]因为PMEL17经受此复杂加工，所以使用用Cy3荧光体标记的77Ε6和用Alexa488标记的14C10测定PMEL17抗体表位在固定的透性化928mel细胞（由CenterforCancerResearch，TumorImmunologySection的PaulRobbins提供）中的亚细胞分布。抗体14C10与17A9结合相同的缺失片段。一大池含有细胞质表位通过77E6检测）与N末端表位通过14C10检测）两者的PMEL17存在于可能为内质网的核周结构中。然而，在朝向细胞周边延伸时，通过77E6实现的染色强度的下降梯度明显，随后为包括在细胞膜处的反应性的14C10染色的梯度上升。这些结果表明由77E6识别的细胞质表位在PMEL17迀移至质膜期间被移除，而N末端表位前进至细胞表面。[0637]与细胞质结构在分泌加工期间释放一致，从条件培养基回收的PMEL17也未能与77E6反应。当从非还原性SDS凝胶切除时，此分泌的PMEL17产生源于Ma与Μβ两者而非源于细胞质区域的肽序列，如通过质谱法所测定。在用2-巯基乙醇还原后，分泌的PMEL17展现出在SDS凝胶上的运动性增强并且自此切除的亮带产生Ma序列而非Μβ序列。这些结果表明分泌的PMELl7含有通过二硫化物系链的Ma和卵区域，但缺乏细胞质序列。[0638]相对于细胞质表位，N末端表位在细胞表面处占优势与用17Α9观测的FACS信号强于77Ε6—致。然而，似乎细胞质区域的某一部分存在于细胞表面处以解释用77Ε6观测的FACS信号。为对此进行阐明，使活细胞与分别直接用AlexaFluor555和488标记的77Ε6和17A9抗体反应。为证明抗体不彼此竞争结合活细胞，将928mel细胞与单独任一经标记抗体或两者一起孵育并且进行FACS分析，闸控个别荧光体。个别抗体的结合不受其它抗体的存在的影响。对经标记活细胞的观察揭示用17A9实现均一细胞表面染色，此与可在质膜处接近充足N末端表位一致。相反，77E6染色更孤立和不规则并且大部分不与17A9反应性重叠。此外，尽管17A9均一并且一致地使所有细胞染色，但77E6染色在细胞与细胞之间可变并且总体染色程度在各制备物之间变化。随后实验证明细胞的悬浮极大地增强细胞表面处77E6染色的存在，表明培养条件可解释此可变性。总之，17A9对黑素瘤细胞的均一和强烈反应性使得此抗体成为用于药物缀合的良好候选物。[0639]F.物种交叉反应性[0640]测试抗体17A9以确定其是否与来自除人以外的物种的PMEL17交叉反应。图9示出人PMEL17SEQIDN0:26、食蟹猴PMEL17SEQIDN0:28、大鼠PMEL17SEQIDN0:29和小鼠PMEL17SEQIDN0:31之间的比对。除食蟹猴PMEL17之外，所有序列都包括信号序列。在所有四个物种之中相同的残基用星号*指示。在大鼠序列具有缺失的区域中，在其余三个物种之中相同的残基用加号⑴指示。使用用N末端gD标记的PMEL17人、食蟹猴、大鼠或小鼠PMEL17稳定转染；用10ygml17A9抗体染色;并且用R-藻红素缀合的山羊抗小鼠抗体检测的293S细胞，通过FACS分析来测定与各物种PMEL17的结合。未转染293细胞通常不表达PMELl7。发现17A9结合所有测试的四个物种PMELl7:人、食蟹猴、大鼠和小鼠PMELl7。[0641]G·抗PMELl7抗体的内化[0642]ADC目标的一种所需属性是能够使抗体内化到细胞中的降解性区室中。将1300me1黑素瘤细胞接种在Lab-TekII细胞培养物处理的4孔腔室载片（NalgeNuncInternational中，并且在分别在50nM和5nM下的溶酶体蛋白酶抑制剂亮肽素（Ieupeptin和抑肽素ApepstatinASigma-Aldrich存在下与2ygmlPMEL17mAb—起在37°C孵育箱中在5%⑶2下孵育2小时或20小时。接着用PBS洗涤细胞，并且在室温下于4%多聚甲醛Polysciences公司）中固定5分钟并在37°C下用含0.05%阜素saponinSigma-Aldrich的具有0.5%BSA的I3BS渗透5分钟;接着将细胞与2ygml兔多克隆抗LAMPlSigma-Aldrich一种针对溶酶体标志物的抗体）一起孵育1小时，随后将Cy3标记的抗小鼠IgGJacksonTmmunoResearchLaboratories公司）和Alexa-488标记的抗兔IgGInvitrogenLifeTechnology孵育1小时。还直接用AlexaFluro555或AlexaFluro488InvitrogenLifeTechnology标记PMEL17抗体，并且在如上固定并且渗透细胞之后对细胞染色。LeicaSP5共焦显微镜LeicaMicrosystems用于成像。[0643]如图4中所示，在细胞内，17A9染色和LAMPl染色的可观重叠为明显的。一致地观测到17A9快速摄取到其它PMEL17+黑素瘤细胞系，包括526mel、SK-MEL-5和UACC257中。这些结果预测17A9ADC应有效内化、经受降解并且释放药物以杀死黑素瘤细胞。[0644]H.产生抗PMEL17抗体药物缀合物[0645]对于较大规模的抗体产生，在CHO细胞中产生抗体。将编码VL和VH的载体转染入CHO细胞中并且通过蛋白质A亲和色谱法从细胞培养基纯化IgG。[0646]通过使17A9或chl7A9参见例如SEQIDNO:47和48缀合于本文所述的药物-接头部分MC-vc-PAB-MMAE来产生包含蛋白酶可裂解val-cit接头和药物MMAE的抗PMEL17抗体-药物缀合物ADC。通过使ch5E9参见例如SEQIDNO:43和44或hu5E9.vl参见例如SEQIDNO:45和46缀合于药物-接头部分MC-vc-PAB-MMAE来产生包含蛋白酶可裂解val-cit接头和药物MMAE的抗ETBRADC。为方便起见，药物-接头部分MC-vc-PAB-MMAE在这些实施例中和在图中有时称为“vcMMAE”或“VCE”。[0647]在结合之前，根据WO2004010957A2中所述的方法，使用标准方法用TCEP部分地还原抗体。根据例如Doronina等（2003Nat·Biotechnol·21:778-784和US20050238649Al中所述的方法，使用标准方法使部分还原的抗体缀合于药物-接头部分。简言之，部分还原的抗体与药物-接头部分组合以使药物-接头部分缀合于抗体的还原半胱氨酸残基。通过添加过量N-乙酰基-半胱氨酸来与任何游离接头-药物部分反应以淬灭缀合反应，并且纯化ADC13ADC的药物负载量每个抗体所对应的药物部分的平均数经测定为2.78。包含val-cit-MMAE接头-药物的ADC也称为MC-val-cit-PAB-MMAE的结构显示于图15A中。[0648]实质上如上所述，通过使chl7A9缀合于药物-接头部分MC-vc-PAB-PNU-159682来产生包含蛋白酶可裂解val-cit接头和药物PNU-159682的抗PMEL17抗体-药物缀合物ADC。实质上如上所述，通过使ch5E9缀合于药物-接头部分MC-vc-PAB-PNU-159682来产生包含蛋白酶可裂解val-cit接头和药物PNU-159682的抗ETBRADC。包含MC-val-cit-PAB-PNU-159682的ADC的结构显示于图15C中。[0649]实质上如上所述，通过使chl7A9缀合于药物-接头部分MC-缩醛-PNU-159682来产生包含酸不稳定性缩醛接头和药物PNU-159682的抗PMEL17抗体-药物缀合物ADC。实质上如上所述，通过使ch5E9缀合于药物-接头部分MC-缩醛-PNU-159682来产生包含酸不稳定性缩醛接头和药物PNU-159682的抗ETBRADC。包含MC-缩醛-PNU-159682的ADC的结构显示于图15B中。[0650]实质上如上所述，通过使chl7A9缀合于药物-接头部分MC-PNU-159682来产生包含非可裂解接头和药物PNU-159682的抗PMEL17抗体-药物缀合物ADC。实质上如上所述，通过使ch5E9缀合于药物-接头部分MC-PNU-159682来产生包含非可裂解接头和药物PNU-159682的抗ETBRADC。包含PNU-159682的ADC的结构显示于图15E中。[0651]实质上如上所述，通过使抗体缀合于药物-接头部分MC-val-cit-PAB-PBD来产生包含蛋白酶可裂解val-cit接头和PBD二聚体药物的抗体药物缀合物ADC。抗体-MC-val-cit-PAB-PBD的结构显示于图I®中。[0652]I.通过抗PMEL17抗体药物缀合物抑制体外细胞增殖[0653]使用于50yL正常生长培养基中以每孔2,000个细胞铺在96孔透明底部板PerkinElmer中的PMEL17+黑素瘤细胞和稳定表达PMEL17的PC3细胞评估在17A9ADC存在下的增殖。24小时后，添加额外50yL培养基和17A9ADC连续稀释液至一式三份孔中。3或5天后，使用CellTiter-GloIIPromega公司）并且用EnVision2101多标记读取器PerkinElmer测定细胞数目。[0654]如图5中所示，用17A9ADC滴定一组PMEL17+黑素瘤细胞导致有效杀死细胞，其中IC50在10至100ngmlADC的范围内。稳定表达PMEL17的前列腺癌细胞系PC3被有效杀死，但注意到在超出l〇ygmlADC的情况下，无载体对照PC3亲本细胞系被杀死。[0655]尽管不意欲受任何特定理论束缚，但ADC针对黑素瘤细胞系的IC50值的变化可反映可为ADC所及的PMEL17的含量变化，但其它因素也有可能起作用。例如，1300mel细胞系比SK-MEL-5细胞系表达显著更多细胞表面PMEL17,但ADC针对1300mel的IC50略微较高。此外，细胞系对释放的MMAE药物产物的反应的变化可以是另一起作用因素。游离MMAE在8个黑素瘤细胞系之间的IC50值在约0.1至0.5nM的范围内。尽管在对游离药物的反应与对17A9ADC的反应之间无严格关联，但在一些情况下，游离药物敏感性的数倍差异可解释对ADC的敏感性的变化。实际上，SK-MEL-5比1300mel对游离MMAE更敏感，这可弥补比1300mel具有更低细胞表面PMEL17含量。包括相对抗体内化速率的其它因素也可能影响对ADC的反应。因此，比较4个不同黑素瘤细胞系随时间累积和内化抗体的能力。如所预期，细胞表面PMELl7含量较高的细胞累积更多抗体，但该内化量的百分比似乎类似，从而指示相对摄取效率存在少许差异。[0656]J.抗PMELl7ADC在正常黑素细胞中的毒性[0657]为评估靶向正常黑素细胞上的PMEL17的潜在倾向性，通过免疫组织化学评估此目标在正常人皮肤中的表达水平。对封装于玻璃载片上的4μπι厚福尔马林固定的石蜡包埋组织切片进行免疫组织化学（IHC。所有IHC步骤都在VentanaDiscoveryXTVentanaMedicalSystems;Tucson,AZ自动染色器上进行。用细胞调节剂1标准时间）进行预处理。在10ygml浓度下使用一级抗体PMEL17克隆31D1并且在37°C下于载片上孵育1小时。VentanaMouseOmniMapVentanaMedicalSystems;AZ用作检测系统。VentanaDAB和苏木精IIHematoxylinII用于显色检测和对比染色。[0658]该实验的结果显示于图6A中。用PMEL17抗体31D1进行的染色揭示沿真皮基底层之间歇反应性，此与黑素细胞在皮肤中的分布一致。[0659]使正常人黑素细胞和SK-MEL-5黑素瘤细胞与嵌合17A9反应或不与一级抗体反应，随后与Alexa488标记的抗人IgG反应并且通过流式细胞术进行分析。如图6B中所示，培养的正常人黑素细胞就抗体17A9而言也为FACS+并且强度与用黑素瘤细胞系SK-MEL-5观测大到的强度相当。[0660]最后，将SK-MEL-5和SK-MEL-23黑素瘤细胞或正常人黑素细胞与17A9ADC连续稀释液一起孵育并且5天后使用CellTiter-Gl0II测定细胞数目。如图6C中所示，用17A9ADC滴定正常黑素细胞导致杀死细胞，其中IC50比用黑素瘤细胞系观测到的IC50高接近100倍。这些结果与抗有丝分裂药物MMAE的作用机制和正常黑素细胞相对于黑素瘤细胞的增殖能力降低一致。[0661]K.PMEL17在人黑素瘤组织试样上的表达[0662]使用17A9与31D1两者，通过实质上如上所述的免疫组织化学来评估PMEL17在一组人黑素瘤组织试样之间的表达。根据在0针对不存在至3+针对最强烈）的范围内的任意尺度对染色计分：[0663]0负性）：在90%黑素瘤细胞中染色极微弱或无染色[0664]1+轻度）：主要染色样式微弱[0665]2+中度）：在大多数50%黑素瘤细胞中主要染色型式中等强烈[0666]3+强烈）：在大多数50%黑素瘤细胞中主要染色型式强烈[0667]尺度的各值的示例性染色显示于图7A左图中。[0668]自30个原发性和28个转移性黑素瘤获得58个试样。如在图7B处的表中所示，在58个人黑素瘤试样之间观测到完全染色谱，其中大多数就任一抗体而言为正性计分。当用31D1检测时，83%4858的人黑素瘤试样为PMEL17+，并且当用17A9检测时，64%3758为PMEL17+。相对于17A9,用31D1进行的染色更高度偏斜向尺度的上端。还将固定的石蜡包埋黑素瘤细胞系丸粒切片并且沿着组织试样将其染色以相对于实际黑素瘤计量其染色强度。参见图7A右图。[0669]L.抗PMEL17抗体药物缀合物在SK-MEL-23黑素瘤细胞系异种移植物中的功效[0670]所有研究都根据实验室动物照护和使用指南GuidefortheCareandUseofLaboratoryAnimalsRef-InstituteofLaboratoryAnimalResources，“GuidefortheCareandUseofLaboratoryAnimals”，（NIHPublication#85-23.WashingtonDC:NationalAcademyPress;1996进行D[0671]使用SK-MEL-23黑素瘤细胞系异种移植物模型研究抗PMEL17ADC的功效。用在含基质胶的HBSS中的500万个SK-MEL-23细胞在背侧右侧侧腹中皮下接种来自CharlesRiverLaboratories的雌性CRLNuNu小鼠c^SK-MEL-23细胞展现2+至3+的染色强度当肿瘤体积达到约200mm3第0天时，将动物随机分入各自具有10个动物的各组中并且施用2或6mgkg17A9ADC的单次静脉内注射液。缀合于抗GP120抗体的MMAE用作对照。每周两次测量肿瘤体积直至研究结束。利用式LXWXW2,使用数字卡尺FredV.Fowler公司）测量肿瘤体积。肿瘤生长抑制（％TGI计算为每天各别剂量组相对于媒介物的拟合曲线下面积AUC百分比，以使％TGI=100X[I-AUC^m天AAUC_天]。使用Rv2.10.1中的R套件nlme第3.1-96版，利用线性混合效应模型将曲线拟合应用于Log2转换的个别肿瘤体积数据。[0672]如图8中所示，发现6mgkg剂量的17A9ADC使肿瘤生长延迟数周，而两种剂量的对照ADC均不对肿瘤生长具有明显效应。这些结果证明靶向人黑素瘤肿瘤异种移植物上的PMELl7的ADC具有稳固且特定的功效。[0673]M.抗PMEL17抗体药物缀合物在对抗ETBR-vc-MMAE具有抗性的UACC-257X2.2黑素瘤细胞中的功效[0674]为测定抗PMELl7ADC在已对另一治疗剂显现抗性的黑素瘤中的功效，在体内和体外产生对包含val-cit接头和MMAE药物的抗内皮素B受体ETBR免疫缀合物抗ETBR-VC-MMAE，也称为抗EDNRB-vc-MMAE、抗ETBR-MC-val-cit-PAB-MMAE等；参见例如美国公布号US20110206702具有抗性的UACC-257X2.2黑素瘤细胞。[0675]对于在体内显现的抗性，用在含基质胶的HBSS中的500万个UACC-257X2.2细胞在背侧右侧侧腹中皮下接种NCr裸小鼠（Taconic,Hudson,NYWACC-257X2.2细胞源于UACC-257细胞NationalCancerInstitute并且如下针对体内生长进行优化。在雌性NCr裸小鼠的右侧侧腹中皮下注射UACC-257细胞以诱导肿瘤生长。收集一个肿瘤并且使其在体外生长（称为UACC-257X1.2细胞系）。在雌性NCr裸小鼠的右侧侧腹中再次皮下注射UACC-257X1.2细胞系以改进细胞系在体内的生长。收集来自第二轮注射的肿瘤并且再次针对体外生长加以改适以产生UACC-257X2.2WACC-257X2.2细胞系和源于此细胞系的肿瘤以与亲本细胞系UACC-257类似的水平表达ETBR。[0676]用UACC-257X2.2细胞接种的10只小鼠在第0天用3mgkghu5E9.vl-MC-vc-PAB-MMAE静脉内给药hu5E9.vl的重链和轻链序列分别显示于SEQIDN0:46和45中）。为确定何时将再次对小鼠给药和在什么剂量下给药，考虑以下因素:肿瘤在初始治疗之后是否再生长（即肿瘤生长回在第0天时的初始肿瘤体积尺寸和再生长速率。施用的剂量的频率随时间变化但不超过2剂周。静脉内剂量不超过300yL。施用的剂量的范围为3mgkg、6mgkg、8mgkg和10mgkg。一旦肿瘤不再对一系列递增剂量起反应（即其显示对一系列递增剂量具有抗性），即中断给药。[0677]如图10A中所示，UACC-257X2.2肿瘤#359在约120天之后对抗ETBR-vc-MMAE显现抗性，而肿瘤#368显现抗性更缓慢。收集肿瘤#359并且使细胞解离以在体外生长在本文中称为体内源性抗性UACC-257X2.2细胞）。[0678]对于在体外显现的抗性，历经两个月的过程在培养皿中针对递增浓度的抗ETBR-vc-MMAE改适UACC-257X2.2细胞。图10B示出体外源性抗性UACC-257X2.2细胞系（在本文中称为体外源性抗性UACC-257X2.2细胞），其相对不受多达至少10ygml的抗ETBR-vc-MMAE浓度影响。图IOB还示出与对照ADCa-gD-vc-MMAE—起孵育的体外源性抗性UACC-257X2.2细胞、和与a-ETBR-vc-MMAE—起孵育的亲本UACC-257X2·2细胞。[0679]接着通过FACS测定ETBR和PMEL17在体内和体外源性抗性UACC-257X2.2细胞和亲本UACC-257X2.2细胞的表面上的表达。细胞用抗ETBR抗体（hu5E9.vl或ch5E9或用抗PMEL17抗体（chl7A9染色，随后用抗人Alexa488抗体缀合物染色。如图IlA和图IlB中所示，相对于亲本细胞系，体内源性抗性UACC-257X2.2细胞与体外源性抗性UACC-257X2.2细胞两者在细胞表面上的ETBR表达均降低。相较于亲本细胞，在抗性细胞中PMEL17的表面表达未变化。参见图IlC和图11D。各图中的对照峰显示仅用二级抗体进行的染色。[0680]接着分析体内和体外源性抗性UACC-257X2.2细胞对递增浓度的抗ETBR-vc-MMAE、抗PMEL17-vc-MMAE和对照ADC抗gD-vc-MMAE的敏感性。参见实施例H和图15A。[0681]评定细胞系在免疫缀合物存在下的体外细胞增殖。以每孔1，500个细胞将细胞于50yL正常生长培养基中铺在96孔透明底部板中。24小时后，添加额外50yL培养基和免疫缀合物连续稀释液至一式三份孔中。5天后，利用EnVision2101多标记读取器（？64;[11-Elmer，Waltham，MA，使用CellTiter-Glo发光细胞活力试剂（G7572,Promega公司，Madison,WI测定细胞存活率。[0682]该实验的结果显示于图12中。亲本UACC-257X2.2细胞系对抗ETBR-vc-MMAE与抗PMEL17-vc-MMAE两者敏感，其中EC50分别为45ngmL和33ngmL。参见图12A。亲本细胞系还对接头-药物（无抗体；MC-vc-PAB-MMAE;在图12中称为“游离药物”）敏感，其中EC50为0.28nM。体内源性抗性UACC-257X2.2细胞对抗PMEL17-vc-MMAE稍微较不敏感并且对抗ETBR-vc-MMAE显著较不敏感，其中EC50分别为119ngmL和235ngmL。参见图12B。体内源性抗性UACC-257X2.2细胞对接头-药物无抗体也较不敏感，其中EC50为0.77nM。体外源性抗性UACC-257X2.2细胞对抗PMEL17-vc-MMAE显著较不敏感，其中EC50为764ngmL，并且对抗ETBR-vc-MMAE不敏感。参见图12C。体外源性抗性UACC-257X2.2细胞对接头-药物无抗体）也较不敏感，其中EC50为3.5nM。这些结果表明可对ADC的抗体部分与药物部分两者显现抗性。[0683]为测定ADC的抗体部分对UACC-257X2.2细胞中的抗性的效应，分析体内和体外源性抗性UACC-257X2.2细胞对具有与用于产生抗性细胞的接头和药物不同的接头和不同的药物的ADC的敏感性。此实验中测试的ADC为通过非可裂解接头连接于PNU-159682的抗ETBR抗ETBR-PNU和通过非可裂解接头连接于PNU-159682的抗PMEL17抗PMEL17-PNU。参见实施例H和图15E。通过非可裂解接头连接于PNU-159682的无关抗体抗gD抗gD-PNU用作对照。[0684]该实验的结果显示于图13中。亲本UACC-257X2.2细胞系对抗ETBR-PNU与抗PMEL17-PNU两者敏感，其中EC50分别为4.2ngmL和5.5ngmL。参见图13A。亲本细胞系还对接头-药物无抗体;MC-PNU-159682;在图13中称为“游离药物”）敏感，其中此实验中的EC50为0.18nM。体内源性抗性UACC-257X2.2细胞对抗PMEL17-PNU的敏感性与亲本细胞系相同，但对抗ETBR-PNU稍微较不敏感，其中EC50分别为4.7ngmL和14.3ngmL。参见图13B。体内源性抗性UACC-257X2.2细胞对接头-药物无抗体）的敏感性也与亲本细胞系相同，其中EC50为0.133nM。与体内源性抗性UACC-257X2.2细胞类似，体外源性抗性UACC-257X2.2细胞同样对抗PMEL17-PNU敏感，但对抗ETBR-PNU稍微较不敏感，其中EC50分别为4.8ngmL和14.6ngmL。参见图13C。体外源性抗性UACC-257X2.2细胞对接头-药物无抗体的敏感性也与亲本细胞系相同，其中EC50为0.15nM。这些结果说明体内和体外源性抗性UACC-257X2.2细胞中的抗性程度，抗性程度可归因于ADC的抗体部分（例如由于ETBR的表达降低），与对ADC的MMAE药物部分的抗性相反。用通过酸不稳定性接头连接于PNU-159682的抗ETBR和抗PMEL17获得类似结果。[0685]分析体内和体外源性抗性UACC-257X2.2细胞对通过MMAE免疫缀合物中使用的vc接头连接于PNU-159682的抗ETBR抗ETBR-vc-PNU和通过vc接头连接于PNU-159682的抗PMEL17抗PMEL17-vc-PNU的敏感性。参见实施例H和图15C。通过vc接头连接于PNU-159682的无关抗体抗gD抗gD-vc-PNU用作对照。[0686]该实验的结果显示于图14中。亲本UACC-257X2.2细胞系对抗ETBR-vc-PNU与抗PMEL17-vc-PNU两者敏感，其中EC50分别为3ngmL和2.5ngmL。参见图14A。亲本细胞系还对接头-药物无抗体;MC-vc-PAB-PNU-159682敏感，其中此实验中的EC50为2nM。体内源性抗性UACC-257X2.2细胞对抗PMEL17-vc-PNU的敏感性略微小于亲本细胞系，并且对抗ETBR-vc-PNU较不敏感，其中EC50分别为6.4ngmL和23ngmL。参见图14B。体内源性抗性UACC-257X2.2细胞对接头-药物无抗体的敏感性也略微小于亲本细胞系，其中EC50为4.2nM。类似地，体外源性抗性UACC-257X2.2细胞对抗PMEL17-PNU和抗ETBR-PNU较不敏感，其中EC50分别为11.6ngmL和41ngmL。参见图14C。体外源性抗性UACC-257X2.2细胞对接头-药物无抗体的敏感性也略微小于亲本细胞系，其中EC50为6.6nM。这些结果表明ADC的接头组分可有助于体内和体外源性抗性UACC-257X2.2细胞中的抗性。比较例如亲本细胞系和体外源性抗性细胞系对抗PMELl7-vc-PNU其具有与用于产生抗性细胞系的ADC不同的抗体和药物但相同的接头）的敏感性EC50分别为2.5ngml和11.6ngml与亲本细胞系和体外源性抗性细胞系对抗PMEL17-PNU其具有不同抗体、药物和接头）的敏感性EC50分别为5.5ngml和4.8ngml〇[0687]分析体内和体外源性抗性UACC-257X2.2细胞对通过MMAE免疫缀合物中使用的vc接头连接于I3BD二聚体的抗ETBR抗ETBR-vc-PBD的敏感性。vc-PBD具有本文显示为“PBD二聚体-val-cit-PAB-Ab”的结构。也参见实施例H和图15D。在该实验中，与用抗ETBR-vc-PNU获得的结果类似，抗性细胞系对抗ETBR-vc-PBD的敏感性小于亲本细胞系，但其不具有完全抗性，表明一些抗性是归因于抗体和接头部分，但一些敏感性可通过改变免疫缀合物的药物部分来恢复。[0688]尽管出于清楚理解的目的已通过说明和实施例的方式在一定程度上详细描述了上述本发明，但描述和实施例不应解释为限制本发明的范围。本文引用的所有专利和科学文献的公开内容皆以全文引用的方式明确并入本文。[0689]序列表

权利要求：1.一种结合PMEL17的分离单克隆抗体，其中所述抗体结合SEQIDN0:26的氨基酸105至125内的表位，或结合SEQIDNO:26的氨基酸25至45内的表位。2.如权利要求1所述的抗体，其为人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。3.如权利要求1所述的抗体，其为结合PMEL17的抗体片段。4.如权利要求1所述的抗体，其中PMEL17为人PMEL17。5.如权利要求4所述的抗体，其中人PMEL17具有序列SEQIDN0:26或SEQIDN0:27。6.如权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包含：a⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:5的HVR-H3，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3,和（iii包含氨基酸序列SEQIDN0:4的HVR-H2;或b⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:15的HVR-H3，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3,和（iii包含氨基酸序列SEQID从：14的狀1?-!12;或c通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的HVR-H3、HVR-L3和HVR-H2。7.如权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包含：a⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:3的HVR-Hl，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:4的HVR-H2,和（iii包含氨基酸序列SEQIDN0:5的HVR-H3;或b⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:13的HVR-Hl，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:14的HVR-H2,和（iii包含氨基酸序列SEQID从：15的狀1?-!13;或c通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的HVR-Hl、HVR-H2和HVR-H3。8.如权利要求7所述的抗体，其中所述抗体包含：a⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:3的HVR-Hl，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:4的HVR-H2，（iii包含氨基酸序列SEQIDN0:5的HVR-H3，（iv包含氨基酸序列SEQIDN0:6的HVR-Ll，（v包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2，（vi包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3;或b⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:13的HVR-Hl，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:14的HVR-H2,和（iii包含氨基酸序列SEQIDN0:15的HVR-H3，（iv包含氨基酸序列SEQIDNO:16的HVR-Ll，（v包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2，（vi包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3;或c通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的HVR-Hl、HVR-H2、HVR-H3、HVR-Ll、HVR-L2和HVR-L3。9.如权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包含：a⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:6的HVR-Ll，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2，（iii包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3;或b⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:16的HVR-Ll，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:7的HVR-L2，（iii包含氨基酸序列SEQIDN0:8的HVR-L3;或c通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的HVR-Ll、HVR-L2和HVR-L3。10.如权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包含：a与氨基酸序列SEQIDNO:1具有至少95%序列同一性的VH序列;或b与氨基酸序列SEQIDN0:2具有至少95%序列同一性的VL序列;或c如a中的VH序列和如⑹中的VL序列;或d与氨基酸序列SEQIDN0:9具有至少95%序列同一性的VH序列;或e与氨基酸序列SEQIDNO:10具有至少95%序列同一性的VL序列;或f如d中的VH序列和如e中的VL序列;或g与通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的VH序列具有至少95%序列同一性的VH序列;或h与通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的VL序列具有至少95%序列同一性的VL序列;或i如g中的VH序列和如⑹中的VL序列。11.如权利要求10所述的抗体，其包含具有氨基酸序列SEQIDNO:1的VH序列、具有氨基酸序列SEQIDN0:9的VH序列、或通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的VH序列。12.如权利要求10所述的抗体，其包含具有氨基酸序列SEQIDN0:2的VL序列、具有氨基酸序列SEQIDNO:10的VL序列、或通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的VL序列。13.—种分离抗体，其包含a具有氨基酸序列SEQIDNO:1的VH序列和具有氨基酸序列SEQIDNO:2的VL序列;或⑹具有氨基酸序列SEQIDNO:9的VH序列和具有氨基酸序列SEQIDNO:10的VL序列；或（c通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的VH序列和通过具有ATCC登录号PTA-12862的杂交瘤750931D1.6.7产生的抗体的VL序列。14.一种结合PMEL17的分离抗体，其中所述抗体包含：a⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:22的HVR-H3，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:25的HVR-L3,和（iii包含氨基酸序列SEQID从:21的狀1?-!12;或b⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:20的HVR-Hl，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:21的HVR-H2,和（iii包含氨基酸序列SEQID从:22的狀1?-!13;或c⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:23的HVR-Ll，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:24的HVR-L2，（iii包含氨基酸序列SEQIDN0:25的HVR-L3;或d⑴包含氨基酸序列SEQIDN0:20的HVR-Hl，（ii包含氨基酸序列SEQIDN0:21的HVR-H2,和（iii包含氨基酸序列SEQIDN0:22的HVR-H3，（iv包含氨基酸序列SEQIDNO:23的HVR-Ll，（v包含氨基酸序列SEQIDN0:24的HVR-L2，（vi包含氨基酸序列SEQIDN0:25的HVR-L3;或e与氨基酸序列SEQIDNO:11具有至少95%序列同一性的VH序列;或f与氨基酸序列SEQIDNO:12具有至少95%序列同一性的VL序列;或g如e中的VH序列和如f中的VL序列;或h具有氨基酸序列SEQIDNO:11的VH序列;或i具有氨基酸序列SEQIDNO:12的VL序列;或j如⑹中的VH序列和如⑴中的VL序列。15.如权利要求1至14中任一项所述的抗体，其为IgGI、IgG2a或IgG2b抗体。16.—种分离核酸，其编码如权利要求1至15中任一项所述的抗体。17.—种宿主细胞，其包含如权利要求16所述的核酸。18.—种产生抗体的方法，其包括培养如权利要求17所述的宿主细胞以使所述抗体得以产生。19.一种免疫缀合物，其包含如权利要求1至15中任一项所述的抗体且包含细胞毒性剂。20.如权利要求19所述的免疫缀合物，其具有式Ab-L-Dp，其中：aAb为如权利要求1至15中任一项所述的抗体；⑹L为接头；cD为选自美登木素、奥瑞斯他汀、卡里奇霉素、吡咯并苯并二氮杂卓和奈莫柔比星衍生物的药物;并且dp在1-8的范围内。21.如权利要求20所述的免疫缀合物，其中D为奥瑞斯他汀。22.如权利要求21所述的免疫缀合物，其中D具有式De并且其中R2和R6各自为甲基，R3和R4各自为异丙基，R5为H，R7为仲丁基，各R8独立地选自CH3、O-CH3、OH和H;R9为H;并且R18为-CR82-CR82-芳基。23.如权利要求20所述的免疫缀合物，其中所述药物为MMAE。24.如权利要求21所述的免疫缀合物，其中D为式A的吡咯并苯并二氮杂卓：其中点线指示任选地在Cl与C2或C2与C3之间存在双键；R2独立地选自H、OH、=0、=CH2、CN、R、OR、=CH-Rd、=CRd2、O-SO2-R、CO2R和COR，并且任选地进一步选自卤基或二卤基，其中Rd独立地选自R、CO2R、COR、CHO、CO2H和卤基；R6和R9独立地选自H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR’、NO2、Me3Sn和卤基；R7独立地选自H、R、OH、OR、SH、SR、NH2、NHR、NRR’、N〇2、Me3Sr^P*S;Q独立地选自0、S和NH;R11为H或R或其中Q为0、SO3M，其中M为金属阳离子；R和R’各自独立地选自任选取代的C1-S烷基、C3-8杂环基和C5-2Q芳基，并且任选地就基团NRR’而言，R和R’连同其所连接的氮原子一起形成任选取代的4、5、6或7元杂环；R12、R16、R19和R17分别是如对于R2、R6、R9和R7所定义；R〃为C3-12亚烷基，该链可间杂有一个或多个杂原子和或任选取代的芳环;并且X和X’独立地选自0、S和N⑻。25.如权利要求24所述的免疫缀合物，其中D具有结构：其中η为0或1。26.如权利要求24所述的免疫缀合物，其中D具有选自以下的结构：其中妒和妒’’各自独立地选自H或Rd，其中Rd独立地选自R、CO2R、COR、CHO、CO2H和卤基；其中Ar1和Ar2各自独立地为任选取代的C5—2Q芳基;并且其中η为0或1。27.如权利要求20所述的免疫缀合物，其中D为式B的吡咯并苯并二氮杂卓：其中水平波形线指示与该接头的共价连接位点；Rvi和Rv2独立地选自Η、甲基、乙基、苯基、氟取代的苯基和CV6杂环基;并且η为0或1。28.如权利要求20所述的免疫缀合物，其中D为奈莫柔比星衍生物。29.如权利要求28所述的免疫缀合物，其中D具有选自以下的结构：30.如权利要求20至29中任一项所述的免疫缀合物，其中所述接头可由蛋白酶裂解。31.如权利要求30所述的免疫缀合物，其中所述接头包含val-cit二肽或Phe-Lys二肽。32.如权利要求20至29中任一项所述的免疫缀合物，其中所述接头具有酸不稳定性。33.如权利要求32所述的免疫缀合物，其中所述接头包含腙。34.如权利要求22所述的免疫缀合物，其具有式：其中S为硫原子。35.如权利要求25所述的免疫缀合物，其具有式：36.如权利要求29所述的免疫缀合物，其具有选自以下的式：37.如权利要求20至36中任一项所述的免疫缀合物，其中p在2-5的范围内。38.如权利要求20至37中任一项所述的免疫缀合物，其包含如权利要求8所述的抗体。39.如权利要求20至37中任一项所述的免疫缀合物，其包含如权利要求13所述的抗体。40.—种药物制剂，其包含如权利要求20至39中任一项所述的免疫缀合物和药学上可接受的载体。41.如权利要求40所述的药物制剂，其进一步包含另一种治疗剂。42.如权利要求19至39中任一项所述的免疫缀合物在制造用于在个体中治疗PMEL17阳性癌症的药物中的用途。43.如权利要求42所述的用途，其中所述PMEL17阳性癌症为黑素瘤。44.如权利要求43所述的用途，其进一步包括向所述个体施用另一种治疗剂。45.如权利要求19至39中任一项所述的免疫缀合物在制造用于抑制PMEL17阳性细胞增殖的药物中的用途。46.如权利要求45所述的用途，其中所述细胞为黑素瘤细胞。47.如权利要求1至15中任一项所述的抗体，其缀合于标记。48.如权利要求47所述的抗体，其中所述标记为正电子发射体。49.如权利要求48所述的抗体，其中所述正电子发射体为89Zr。50.如权利要求1至15中任一项所述的抗PMEL17抗体在制造用于检测生物样品中的人PMELl7的试剂或试剂盒中的用途。51.如权利要求50所述的用途，其中所述抗PMEL17抗体为如权利要求8或权利要求14所述的抗体。52.如权利要求50所述的用途，其中所述生物样品为黑素瘤样品。53.经标记抗PMEL17抗体在制造用于检测PMEL17阳性癌症的试剂或试剂盒中的用途，其中所述经标记抗PMELl7抗体包含如权利要求1至15中任一项所述的抗PMELl7抗体。54.如权利要求53所述的用途，其中所述经标记抗PMEL17抗体为经标记的如权利要求8或权利要求14所述的抗体。55.如权利要求53或权利要求54所述的用途，其中所述经标记抗PMEL17抗体包含缀合于正电子发射体的抗PMEL17抗体。56.如权利要求55所述的用途，其中所述正电子发射体为89Zr。57.如权利要求19至39中任一项所述的免疫缀合物在制造用于治疗患有PMEL17阳性癌症的个体的药物中的用途，其中所述PMELl7阳性癌症对第一治疗剂具有抗性。58.如权利要求57所述的用途，其中所述PMEL17阳性癌症为黑素瘤。59.如权利要求57或权利要求58所述的用途，其中所述第一治疗剂包含结合除PMEL17以外的抗原的第一抗体。60.如权利要求59所述的用途，其中所述第一治疗剂为包含结合除PMEL17以外的抗原的第一抗体和第一细胞毒性剂的第一免疫缀合物。61.如权利要求59或权利要求60所述的用途，其中所述第一抗体结合选自内皮素B受体ETBR、酪氨酸酶相关蛋白质ITYRPl、细胞毒性T淋巴细胞抗原4CTLA-4和糖蛋白NMBGPNMB的抗原。62.如权利要求61所述的用途，其中所述第一抗体结合ETBR。63.如权利要求62所述的用途，其中所述第一抗体为hu5E9.vl。64.如权利要求63所述的用途，其中所述第一免疫缀合物为huSELvl-MC-val-cit-pAB-MMAEo65.如权利要求60至64中任一项所述的用途，其中所述第一细胞毒性剂与如权利要求19至39中任一项所述的免疫缀合物的所述细胞毒性剂不同。66.如权利要求65所述的用途，其中所述第一细胞毒性剂为MMAE并且如权利要求19至39中任一项所述的免疫缀合物的所述细胞毒性剂选自卡里奇霉素、吡咯并苯并二氮杂卓和奈莫柔比星衍生物。67.如权利要求66所述的用途，其中如权利要求19至39中任一项所述的免疫缀合物的所述细胞毒性剂选自吡咯并苯并二氮杂卓和奈莫柔比星衍生物。68.如权利要求19至39中任一项所述的第一免疫缀合物在制造用于与包含结合ETBR的抗体的第二免疫缀合物组合治疗患有PMELl7阳性癌症的个体的药物中的用途。69.如权利要求68所述的用途，其中结合ETBR的所述抗体包含含有序列SEQIDNO:33的HVRHl、含有序列SEQIDNO:34的HVRH2、含有序列SEQIDNO:35的HVRH3、含有序列SEQIDN0:36的HVRL1、含有序列SEQIDN0:37的HVRL2、和含有序列SEQIDN0:38的HVRL3〇70.如权利要求68所述的用途，其中结合ETBR的所述抗体包含含有序列SEQIDN0:40的重链可变区和含有序列SEQIDNO:39的轻链可变区。71.如权利要求68至70中任一项所述的用途，其中所述第一免疫缀合物包含选自奥瑞斯他汀、吡咯并苯并二氮杂卓和奈莫柔比星衍生物的细胞毒性剂，并且所述第二免疫缀合物包含选自奥瑞斯他汀、吡咯并苯并二氮杂卓和奈莫柔比星衍生物的细胞毒性剂。72.如权利要求68至71中任一项所述的用途，其中所述第一免疫缀合物包含选自吡咯并苯并二氮杂卓和奈莫柔比星衍生物的细胞毒性剂，并且所述第二免疫缀合物包含奥瑞斯他汀。73.如权利要求72所述的用途，其中所述第二免疫缀合物包含MMAE。74.如权利要求68至73中任一项所述的用途，其中所述第二免疫缀合物包含含有MC-val-cit-PAB-MMAE的接头-药物部分。75.如权利要求68至74中任一项所述的用途，其中所述第二免疫缀合物为hu5E9.Vl-MC-val-cit-ΡΑΒ-ΜΜΑΕ〇76.如权利要求68至75中任一项所述的用途，其中所述PMEL17阳性癌症为黑素瘤。77.如权利要求68至76中任一项所述的用途，其中所述PMEL17阳性癌症也为ETBR阳性的。

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