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申请/专利权人：米迪缪尼有限公司
申请日：2013-09-24
公开（公告）日：2019-08-30
公开（公告）号：CN105026574B
专利技术分类：...提高表达的一般方法[2006.01]
专利摘要：尤其提供了用于使真核细胞系稳定化的方法，该真核细胞系表达PylRS和tRNAPyl并且适于掺入编码靶蛋白的基因，该靶蛋白包含一个或多个由无义密码子编码的非天然氨基酸，该方法包括在tRNAPyl表达对细胞生活力和或细胞生长的不利影响被减小或被消除的条件下培养所述细胞系。
专利权项：1.一种用于使真核细胞系稳定化的方法，该真核细胞系表达PylRS和tRNAPyl并且适于掺入对包含一个或多个由无义密码子编码的非天然氨基酸的靶蛋白质进行编码的基因，该方法包括在tRNAPyl表达对细胞生活力和或细胞生长的不利影响被减小或被消除的条件下培养所述细胞系，其中tRNAPyl对细胞生活力和或细胞生长的不利影响被减小或消除的条件包括如下条件：培养该细胞系的培养基中存在诱饵氨基酸，该诱饵氨基酸是PylRS的底物但不能掺入延伸的蛋白质链中，其中所述诱饵氨基酸选自： 式VIIB.1； 式VIIB.2；和 式VIIB.4。
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