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申请/专利权人：北京乐普医疗科技有限责任公司

摘要：基于氧化石墨烯‑壳聚糖纳米金的电化学免疫传感器的制备方法及应用，主要解决电化学法检测心肌标记物测试问题，以氧化石墨烯‑壳聚糖纳米金为基底，通过结和抗原和抗体，制备电化学免疫传感器，通过结合标记抗体上的辣根过氧化物酶对过氧化氢的电化学检测，实现了对不同浓度的抗原进行检测。本发明可以快速，准确的检测不同浓度的心肌标记物，制备的电化学免疫传感器简单有效，不仅有效实现了检测不同浓度的心肌标记物，而且由于基底材料简单，为后续构建其他标记物电化学免疫传感器研究提供了模型。

主权项：1.基于氧化石墨烯-壳聚糖纳米金的电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1配制1.0～5.0mgmL的氧化石墨烯的固体颗粒分散液和质量分数为0.25％～2％的壳聚糖溶液；2取所述固体颗粒分散液和所述壳聚糖溶液进行混合，混合液经超声分散均匀形成滴涂液，所述滴涂液中的氧化石墨烯的固体颗粒分散液浓度为0.9～4.5mgmL，滴涂液中的壳聚糖溶液的质量分数为0.23％～1.8％；3将所述滴涂液超声分散并取5～8μL滴涂液于金电极上，隔夜干燥；4将滴涂有滴涂液的所述金电极放入20～40nm的胶体金溶液中并吸附至饱和，制得氧化石墨烯-壳聚糖纳米金修饰电极，氧化石墨烯-壳聚糖纳米金修饰电极记为GO-ChitsAuNPs修饰电极，隔夜干燥；5配制pH为7.0～9.0的磷酸盐缓冲溶液，用配置好的磷酸盐缓冲溶液稀释心肌标记物的包被抗体Ab1，稀释后包被抗体Ab1浓度为0.2～1.0mgml；6取5～8μL配置好的所述包被抗体Ab1滴涂于GO-ChitsAuNPs修饰电极表面上，孵育6～12h，制得GO-ChitsAuNPsAb1修饰电极；7取所述磷酸盐缓冲溶液配制质量分数为0.5％～5.0％的牛血清白蛋白BSA溶液，取配制好的所述牛血清白蛋白BSA溶液5～8μL滴涂于GO-ChitsAuNPsAb1修饰电极表面上，孵育6～12h，制得GO-ChitsAuNPsAb1BSA修饰电极干燥储存备用；8在GO-ChitsAuNPsAb1BSA修饰电极表面上滴涂5～8μL心肌标记物抗原Ag，孵育0.5～1h，制备成GO-ChitsAuNPsAb1BSAAg修饰电极；9取所述配置好的磷酸盐缓冲溶液稀释心肌标记物的酶标抗体Ab2，稀释后酶标抗体Ab2浓度为0.1～0.3mgml；10在GO-ChitsAuNPsAb1BSAAg电极表面滴涂5～8μL对应的酶标抗体Ab2，孵育0.5～1h，构成心肌标记物免疫传感器，心肌标记物免疫传感器记为GO-ChitsAuNPsAb1BSAAgAb2。

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