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申请/专利权人：鲁东大学

摘要：本发明公开了一种利用橡胶树幼嫩茎段离体培养试管苗的方法，包括以下步骤：获得橡胶树幼嫩茎段外植体‑消毒灭菌‑初代培养‑继代壮苗生根培养‑驯化移栽。本发明的有益之处在于：1通过橡胶树幼嫩茎段离体培养试管苗，不经过发生愈伤组织而再生，不仅保持了优良橡胶树种苗的遗传稳定性，而且不受时间季节限制，整个生长季，只要有新梢萌发生长，随时可以就地取材，外植体取材的周期长；2从选取幼嫩茎段到获得可以移栽的橡胶树试管苗，整个培养周期为60d左右，培养周期短。

主权项：1.一种利用橡胶树幼嫩茎段离体培养试管苗的方法，其特征在于，包括以下步骤：第1步：获得橡胶树幼嫩茎段外植体从田间或者温室大棚内选取橡胶树的幼嫩茎段，将其剪成1.5～2.0cm大小的小茎段，每个小茎段上带有1～2片叶子，将带有叶子的叶柄从叶柄基部抹掉，将抹掉叶柄的小茎段放入盛有无菌水的小烧杯中，待用；第2步：消毒灭菌将切割好的小茎段切口朝下，让其悬空流完乳汁，然后用流动的自来水冲洗半个小时以上，之后于超净工作台上对抹掉叶柄的小茎段进行常规的消毒灭菌；第3步：初代培养将经过消毒灭菌的橡胶树幼嫩茎段外植体接种在初代培养基上，初代培养基的配方如下：WPM+6-BA0.2mgL+NAA0.1mgL+蔗糖30gL+琼脂7.5gL，然后放置于培养室内进行初代培养；第4步：继代壮苗生根培养待萌发的新芽长到2cm大小时，从新芽连接茎段处切下新芽，然后将新芽接种在壮苗培养基上，壮苗培养基的配方如下：WPM+6-BA2mgL+IBA0.1mgL+蔗糖30gL+琼脂7.5gL，之后放置于培养室内进行20d壮苗培养；壮苗培养20d后，将无菌苗转移到生根培养基上，生根培养基的配方如下：WPM+6-BA6mgL+TDZ0.05mgL+IBA0.1mgL+蔗糖30gL+活性炭5gL+琼脂7.5gL，之后继续放置于培养室内进行生根培养；第5步：驯化移栽待橡胶树试管苗长出3～5条须根，并且平均根长大于4cm时，从生根培养基中取出橡胶树试管苗，用流动的自来水将根部培养基冲洗干净，再将其移栽到盛有蛭石草炭土混合基质的小营养钵中，在培养室内生长15d后移栽到装有大田土的塑料花盆中，之后进行粗放管理即可。

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权利要求：

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