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申请/专利权人：浙江海洋大学

摘要：本发明提供了一种制备鳗鱼鱼鳔胶原蛋白‑壳聚糖‑复合海藻酸钠水凝胶的方法。本发明通过单因素试验及响应面优化得到酸法提取鳗鱼鱼鳔胶原蛋白的最佳条件为醋酸浓度0.42molL、酸解时间21h、液料比为58mlg。本发明从鳗鱼鱼鳔中分离的酸溶性胶原蛋白可以作为合适的药物载体系统，是良好的药用生物材料，同时具体有独特的多孔纤维结构，可以用来吸收大量水分，支撑肌肤表面，对保湿和抗皱有着重要作用；可作为创伤赋形剂或药物载体，对小鼠皮肤伤口具有促愈合作用，在生物医学工程和医学上具有巨大的应用潜力。

主权项：1.一种制备鳗鱼鱼鳔胶原蛋白-壳聚糖-复合海藻酸钠水凝胶的方法，其特征在于包括如下步骤：1预处理：将新鲜鳗鱼鱼鳔清洗干净，除去鱼鳔上覆盖的非鱼鳔组织，血管，脂肪以及表层的膜，去离子水清洗干净后剪成0.5×0.5cm小块，用氢氧化钠溶液在20℃左右条件下浸泡并搅拌48小时，以除去鱼鳔中的杂蛋白，每6h更换氢氧化钠溶液1次，然后将鱼鳔用蒸馏水清洗直至鱼鳔呈现中性；再将鱼鳔放入正丁醇溶液中，同样在20℃左右条件下浸泡并搅拌48小时，以除去鱼鳔中的脂质，每6h更换正丁醇溶液1次，再用蒸馏水将鱼鳔中的正丁醇清洗干净；将清洗好的鳗鱼鱼鳔置于-20℃保存，备用；2取经过预处理后的鳗鱼鱼鳔，放入乙酸溶液中，在24℃恒温摇床上进行酸解处理21h；取纱布过滤未酸解完全的鱼鳔，取滤液；将滤液装入透析袋置于纯水中透析3天，每天更换透析液2次，透析过程中对透析液温和搅拌，直到透析液pH显中性；然后对透析过的胶原蛋白进行冷冻干燥处理，即得酸溶性胶原蛋白，置于-20℃冰箱储存备用；3取步骤2制备得到的胶原蛋白，卡波姆，海藻酸钠；胶原蛋白用0.50molL的乙酸溶液超声溶解均匀，置于纯化水中透析至中性，取出胶原蛋白为原料液1；卡波姆加入纯化水和甘油，于60℃水浴锅中溶胀40min，再用0.01molL的NaOH溶液调节其PH为6.5-7，充分搅拌得原料液2；海藻酸钠加入纯化水充分溶胀，搅拌均匀得原料液3；将原料液1、2、3全部混合，充分搅拌均匀，放入4℃冰箱脱泡2h，由于溶胀使得凝胶液体积增大，共制得200ml凝胶液；4交联液制备:制备CaCl2溶液和壳聚糖溶液，将两种溶液混合均匀，即得交联液，密封保存备用；5CCA水凝胶交联:将步骤3制备得到的凝胶液倒入培养皿中，平铺均匀薄薄一层即可，放入4℃冰箱冷存2h后取出，将交联剂溶液倒入上述培养皿中，使之充分交联后，即得鱼鳔胶原蛋白-壳聚糖-复合海藻酸钠水凝胶，取出水凝胶片，用蒸馏水冲洗干净后，备用。

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