买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

申请/专利权人：北京市农林科学院

摘要：本发明公开了核定位信号F4NLS在高效创制水稻除草剂抗性材料中的应用。所述核定位信号F4NLS由核定位信号甲和核定位信号乙组成，所述核定位信号甲包括3*Flag2标签蛋白和NLS2蛋白；所述核定位信号乙包括所述NLS2蛋白。本发明还公开了一种ACCase抑制除草剂抗性水稻的制备方法。所述方法包括使受体水稻中表达esgRNA、腺嘌呤脱氨酶、Cas9核酸酶、核定位信号甲和核定位信号乙的步骤；所述腺嘌呤脱氨酶、所述Cas9核酸酶、所述核定位信号甲和所述核定位信号乙在所述esgRNA的向导下，可将受体水稻基因组中OsACC1基因靶点序列的第7位由A突变为G，从而获得ACCase抑制除草剂抗性水稻。

主权项：1.一种ACCase抑制除草剂抗性水稻的制备方法，包括使受体水稻中表达esgRNA、腺嘌呤脱氨酶、Cas9核酸酶、核定位信号甲和核定位信号乙的步骤；所述esgRNA靶向OsACC1基因靶点序列；所述OsACC1基因靶点序列含有目标位点；所述目标位点为序列14第6295位所示碱基T的互补碱基A；所述腺嘌呤脱氨酶、所述Cas9核酸酶、所述核定位信号甲和所述核定位信号乙在所述esgRNA的向导下，可将受体水稻基因组中所述目标位点由碱基A突变为碱基G，从而获得OsACC1蛋白第2099位由半胱氨酸突变为精氨酸的ACCase抑制除草剂抗性水稻；所述使受体水稻中表达esgRNA、腺嘌呤脱氨酶、Cas9核酸酶、核定位信号甲和核定位信号乙的方法为将转录esgRNA的DNA分子、ecTadA蛋白质的编码基因、ecTadA*蛋白质的编码基因、Cas9n蛋白质的编码基因、核定位信号甲的编码基因和核定位信号乙的编码基因导入受体水稻中；所述转录esgRNA的DNA分子、所述ecTadA蛋白质的编码基因、所述ecTadA*蛋白质的编码基因、所述Cas9n蛋白质的编码基因、所述核定位信号甲的编码基因和所述核定位信号乙的编码基因通过重组表达载体导入受体水稻中；所述重组表达载体包括依次由启动子、所述核定位信号甲的编码基因、所述ecTadA蛋白质的编码基因、所述ecTadA*蛋白质的编码基因、所述Cas9n蛋白质的编码基因和所述核定位信号乙的编码基因和终止子组成的表达盒；所述核定位信号甲包括1个3*Flag2标签蛋白和4个NLS2蛋白；所述核定位信号乙包括4个NLS2蛋白；所述核定位信号甲的氨基酸序列如序列10所示；所述核定位信号乙的氨基酸序列如序列11所示；所述转录esgRNA的DNA分子的核酸序列如序列1的第1946-2051位所示，启动所述DNA分子的启动子的核酸序列如序列1的第1204-1945位所示。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 北京市农林科学院 核定位信号F4NLS在高效创制水稻除草剂抗性材料中的应用