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一种通过敲除spo11基因创制多倍体鱼类的方法 

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申请/专利权人:华中农业大学

摘要:本发明公开了一种创制多倍体鱼类的方法,利用CRISPRCas9基因敲除技术对spo11基因进行敲除,通过基因型鉴定和选育获得spo11纯合敲除个体;利用spo11纯合敲除二倍体雌性能够产生部分不减数卵子的特性,可获得三倍体,进而筛选获得spo11纯合敲除三倍体3Nspo11‑‑‑;利用3Nspo11‑‑‑雌性能够产生部分不减数卵子的特性,进而筛选获得杂合敲除四倍体4Nspo11+‑‑‑;利用4Nspo11+‑‑‑能产生大量二倍体配子的特性,进而制备大量的三倍体子代。与其他多倍体育种方法相比,本发明有普适性和遗传可控性,为人工诱导鱼类多倍体提供了重要的技术支持。

主权项:1.一种通过敲除spo11基因创制多倍体鱼类的方法,其特征在于包括以下步骤:1利用CRISPRCas9系统对野生型二倍体鱼的spo11基因进行敲除,通过基因型鉴定和选育获得spo11纯合敲除二倍体2Nspo11--和spo11杂合敲除二倍体2Nspo11+-;2将雌性2Nspo11--与雄性2Nspo11+-交配,获得的子代发育至三月龄时,通过基因型鉴定和流式检测,筛选获得spo11纯合敲除三倍体3Nspo11---;3将雌性3Nspo11---与野生型二倍体雄性交配,获得的子代发育至三月龄时,通过基因型鉴定和流式检测,筛选获得spo11杂合敲除四倍体4Nspo11+---;4将4Nspo11+---与野生型二倍体异性交配,繁殖获得大量子代,这些子代即为遗传可控的三倍体鱼。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 华中农业大学 一种通过敲除spo11基因创制多倍体鱼类的方法

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