买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

申请/专利权人：泸州品创科技有限公司;江南大学

摘要：本发明要解决的技术问题是目前没有既能生产短链脂肪酸，也能生产4‑甲基苯酚的梭状芽孢杆菌。本发明解决技术问题的技术方案是提供一种老窖梭状芽孢杆菌Clostridiumfermenticellae，该老窖梭状芽孢杆菌可代谢产生短链脂肪酸和4‑甲基苯酚。该老窖梭状芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC17037，其在厌氧条件下发酵培养，培养基成分不同，该菌株的主要代谢产物不同，当培养基中添加乙酸钠和乙醇时，以短链脂肪酸为主；添加L‑酪氨酸时，以产4‑甲基苯酚为主。该菌株在发酵产生短链脂肪酸等白酒风味物质，以及生产4‑甲基苯酚等方面具有好的应用价值。

主权项：1.一种老窖梭状芽孢杆菌（Clostridiumfermenticellae）菌株，其特征在于，可代谢产生短链脂肪酸和4-甲基苯酚；所述短链脂肪酸为乙酸、丁酸、戊酸或己酸中的至少一种；所述老窖梭状芽孢杆菌菌株的保藏编号为：CGMCCNO.17037。

全文数据：老窖梭状芽孢杆菌及其用途技术领域本发明属于发酵微生物领域，具体涉及一株老窖梭状芽孢杆菌以及使用该菌株发酵生产短链脂肪酸和4-甲基苯酚的用途。背景技术短链脂肪酸是白酒风味物质的重要组成成分，也是白酒中酯类风味物质形成的前体。浓香型白酒窖泥微生物中的一些梭菌Clostridia种类是产生短链脂肪酸的重要微生物。另外，有些梭菌会代谢产生4-甲基苯酚，如梭状芽孢杆菌属Clostridium中某些种Clostridiumdifficile、Clostridiumtyrobutyricum和Clostridiumultunense等。4-甲基苯酚是白酒中窖泥味的主要来源，也是一种重要的抗氧化剂，在医药，农药，塑料工业中等有着重要的应用，但目前传统的化工合成法其生产过程往往伴随着大量的环境污染。目前还未见有既代谢产生短链脂肪酸，也能代谢产生4-甲基苯酚的梭状芽孢杆菌的报道。发明内容本发明要解决的技术问题是目前没有既能生产短链脂肪酸，也能生产4-甲基苯酚的梭状芽孢杆菌。本发明解决技术问题的技术方案是提供一种老窖梭状芽孢杆菌Clostridiumfermenticellae，该老窖梭状芽孢杆菌可代谢产生短链脂肪酸和4-甲基苯酚。其中，上述所述短链脂肪酸为乙酸、丁酸、戊酸或己酸中的至少一种。其中，上述的老窖梭状芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC17037。其中，上述老窖梭状芽孢杆菌的16SrDNA序列如SEQIDNO：l所示。本发明提供了上述的老窖梭状芽孢杆菌在制备短链脂肪酸和或4-甲基苯酚中的用途。本发明还提供了上述的老窖梭状芽孢杆菌制备短链脂肪酸或4-甲基苯酚的方法。该方法的步骤为将产4-甲基苯酚培养基或产短链脂肪酸培养基灭菌后，接种上述的老窖梭状芽孢杆菌，在厌氧条件下发酵培养即得4-甲基苯酚或短链脂肪酸。其中，上述方法中所述的厌氧条件为N2﹕CO2﹕H2＝8～10﹕0～1﹕0～1。优选的，所述的厌氧条件为N2﹕CO2﹕H2＝8﹕1﹕1。其中，上述方法中20～40℃静置培养。优选的，所述的培养条件为37℃。其中，上述方法中所述的接种的菌株量为按体积比为2％～5％。优选的，所述的接种的菌株量为按体积比为5％。进一步的，上述方法中所述的产4-甲基苯酚培养基的配方为葡萄糖2～5gL，胰蛋白胨5～10gL，酵母粉1～5gL，牛肉膏5～10gL，氯化钠1～5gL，无水乙酸钠1～5gL，L-半胱氨酸盐酸盐0.5gL，可溶性淀粉1～3gL，FeCl2·4H2O0～3gL，CuCl2·2H2O2.0mgL，D+-生物素0～40mgL，pH4.5～8。优选的，所述的产4-甲基苯酚培养基的配方为：葡萄糖5gL，胰蛋白胨10gL，酵母粉3gL，牛肉膏10gL，氯化钠3gL，无水乙酸钠3gL，L-半胱氨酸盐酸盐0.5gL，可溶性淀粉1gL，FeCl2·4H2O1.50gL，CuCl2·2H2O2.00mgL，D+-生物素20.00mgL，pH5.0。进一步的，上述的产4-甲基苯酚培养基中还添加有L-酪氨酸。优选的，上述的产4-甲基苯酚培养基中L-酪氨酸的添加量为10～400。优选的，产4-甲基苯酚培养基中L-酪氨酸的添加量为50～400mgL。其中，上述方法生产4-甲基苯酚时，所述发酵培养采用恒化发酵。进一步的，上述方法中所述的产短链脂肪酸培养基的配方为：乙酸钠3～5gL,酵母膏1～5gL,磷酸氢二钾0.1～1gL，硫酸铵0.2～1gL，硫酸镁0.1～0.5gL,硫酸钙0～0.5gL，乙醇0～10％，L-半胱氨酸盐0.5gL，pH4.5～8。优选的，上述方法中所述的产短链脂肪酸培养基的配方为乙酸钠5gL,酵母膏1gL,磷酸氢二钾0.4gL，硫酸铵0.5gL，硫酸镁0.2gL,硫酸钙0.1gL，乙醇0～10％，L-半胱氨酸盐0.5gL，pH5.0。其中，上述方法生产短链脂肪酸采用静置发酵。静置发酵的温度优选为37℃。本发明的有益效果在于：本发明从窖泥中分离出一株老窖梭状芽孢杆菌，该菌株在不同的培养条件下其主要代谢产物不同。在培养基中添加乙酸钠和乙醇时，该菌株主要代谢产物为乙酸、丁酸、戊酸、己酸等短链脂肪酸。改变培养条件，该菌株主要代谢产物为4-甲基苯酚，且在培养基中添加L-酪氨酸可以进一步提高其4-甲基苯酚产量，可达81.11mgL以上。本发明株梭菌一方面能代谢产生短链脂肪酸为白酒提供风味物质，另一方面其为微生物发酵法清洁生产4-甲基苯酚提供了一种可能。生物保藏说明：本发明涉及的老窖梭状芽孢杆菌Clostridiumfermenticellae于2018年12月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，保藏编号为CGMCCNo.17037,保藏地中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。分类命名为老窖梭菌Clostridiumfermenticellae。具体实施方式本发明主要涉及一株老窖梭状芽孢杆菌Clostridiumfermenticellae，该菌株筛选自泸州老窖股份有限公司白酒酿造窖泥中，于2018年12月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，保藏编号为CGMCC17037。获取所述菌株16SrDNA序列，在GenBank中进行BLAST比对确定其种属，该菌株的16SrDNA全长序列为1381bp，16SrDNA序列见SEQIDNO：1。该菌株可利用的主要碳源包括D-果糖、L-海藻糖、帕拉金糖和L-鼠李糖，在厌氧条件下培养可代谢产生短链脂肪酸和4-甲基苯酚。该菌株能发酵生产的短链脂肪酸包括乙酸、丁酸、戊酸和己酸。所述的厌氧条件为N2﹕CO2﹕H2＝8～10：0～1﹕0～1。优选的，所述的厌氧条件为N2﹕CO2﹕H2＝8﹕1﹕1。厌氧发酵时进行静置培养为佳，较佳的培养温度是20～40℃。优选的培养温度为37℃。使用本发明窖梭状芽孢杆菌能制备短链脂肪酸或4-甲基苯酚。所述的接种的菌株量为按体积比为2％～5％，为接种量和培养基的体积比。优选的，所述的接种的菌株量为按体积比为5％。为了获得更好的短链脂肪酸或4-甲基苯酚的产量，可以将产4-甲基苯酚培养基或产短链脂肪酸培养基灭菌后，接种上述的老窖梭状芽孢杆菌，在厌氧条件下发酵培养即得4-甲基苯酚或短链脂肪酸。为了更好地实现本发明，本发明对上述方法进行了优化，当主要需要生产短链脂肪酸时，可使用以下配方的产短链脂肪酸培养基：乙酸钠3～5gL,酵母膏1～5gL,磷酸氢二钾0.1～1gL，硫酸铵0.2～1gL，硫酸镁0.1～0.5gL,硫酸钙0～0.5gL，乙醇0～10％，L-半胱氨酸盐0.5gL，pH4.5～8。优选的，上述方法中所述的产短链脂肪酸培养基的配方为乙酸钠5gL,酵母膏1gL,磷酸氢二钾0.4gL，硫酸铵0.5gL，硫酸镁0.2gL,硫酸钙0.1gL，乙醇0～10％，L-半胱氨酸盐0.5gL，pH5.0。生产短链脂肪酸时，使用静置发酵即可。当主要需要生产4-甲基苯酚时，可使用以下配方的产4-甲基苯酚培养基：葡萄糖2～5gL，胰蛋白胨5～10gL，酵母粉1～5gL，牛肉膏5～10gL，氯化钠1～5gL，无水乙酸钠1～5gL，L-半胱氨酸盐酸盐0.5gL，可溶性淀粉1～3gL，FeCl2·4H2O0～3gL，CuCl2·2H2O2.0mgL，D+-生物素0～40mgL，pH4.5～8。优选的，上述的产4-甲基苯酚培养基的配方为：葡萄糖5gL，胰蛋白胨10gL，酵母粉3gL，牛肉膏10gL，氯化钠3gL，无水乙酸钠3gL，L-半胱氨酸盐酸盐0.5gL，可溶性淀粉1gL，FeCl2·4H2O1.50gL，CuCl2·2H2O2.00mgL，D+-生物素20.00mgL，pH5.0。实验表明，采用上述方法，发酵产物中4-甲基苯酚含量可达12.91mgL。如还需要增加4-甲基苯酚的产量，可向上述的产4-甲基苯酚培养基中添加L-酪氨酸。上述的产4-甲基苯酚培养基中L-酪氨酸的添加量为0～400mgL。优选的，产4-甲基苯酚培养基中L-酪氨酸的添加量为10～400mgL。实验证明，在培养基中添加L-酪氨酸后该菌株发酵产生的4-甲基苯酚浓度可提高541.6％，产量达69.92mgL。更优的，使用可以使用恒化发酵方法进行发酵产物的生产。使用上述的产4-甲基苯酚培养基进行恒化发酵发酵后，该菌株发酵产生4-甲基苯酚浓度可达81.11mgL。以下通过实施例的介绍对本发明进行更详细的说明。实施例1产短链脂肪酸和4-甲基苯酚细菌的筛选从泸州老窖窖泥中取5g样品装入混有玻璃珠和50mL无菌水的250mL三角瓶中，37℃摇床上以115rmin振荡30min，取菌悬液1mL用无菌生理盐水10倍梯度稀释，以10-3和10-4梯度稀释样涂布于分离培养基，厌氧条件下，37℃培养4～7天；然后挑取菌落丰厚，且生长旺盛的单菌落经分离纯化后接入液体分离培养基，37℃厌氧培养3天后运用顶空固相微萃取气相色谱-质谱联用仪技术HS-SPMEGC-MS测定4-甲基苯酚含量，采用高效液相色谱法HPLC测定短链脂肪酸含量，从而筛选菌株。分离培养基配方：葡萄糖5gL，胰蛋白胨10gL，酵母粉3gL，牛肉膏10gL，氯化钠3gL，无水乙酸钠3gL，L-半胱氨酸盐酸盐0.5gL，可溶性淀粉1gL，琼脂20gL，pH6.5,121℃下灭菌20min。HPLC测定具体方法如下：①样品的预处理方法准确量取2mL发酵上清液，将培养液离心12000rpm，5min获得上清液，分别加入800μL硫酸锌300gL和800μL亚铁氰化钾106gL，振荡混匀，离心。取上清液用0.22μm微孔滤膜过滤后为待测样品。与此同时，以甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸标准品为外标绘制不同脂肪酸的标准曲线。②HPLC测定条件如表1所示表1HPLC测定条件色谱柱SepaxCarbomixH-NP5:85μm，7.8×300mm流动相2.5mMH2SO4流速0.6mLmin柱温55℃进样量10μL检测波长210nmHS-SPMEGC-MS具体方法如下：①将菌株发酵液于3000rmin条件下离心10min，吸取上清液8mL加入萃取瓶，加入3g氯化钠和2-辛醇10μgL。②HS-SPME萃取条件将萃取头插入样品瓶顶空部分，于50℃吸附30min，吸附后的萃取头取出后插入气相色谱进样口，于250℃解吸3min。③GC分析条件色谱柱：TG-WAXMS毛细管色谱柱，柱长60m，内径0.25mm，液膜厚度0.25μm；载气：He；流速：1.0mlmin，分流比：20：1；柱温：进样口温度保持在260℃，起始气相色谱柱温维持在50℃2min，以3℃min升温至145℃，再以15℃min升温至230℃，保持3min。④MS分析条件离子源温度260℃；接口温度200℃；电离方式：EI+；电子能量：70ev；扫描质量范围：33～350amu。根据HPLC和HS-SPMEGC-MS分析结果，筛选获得1株同时具有产短链脂肪酸和4-甲基苯酚能力的细菌。实施例2产短链脂肪酸和4-甲基苯酚细菌的分子鉴定纯化实施例1中筛选得到的细菌，取指数生长期新鲜菌液，离心收集菌体，采用基因组抽提试剂盒提取基因组DNA。采用细菌通用引物P0P6扩增其16SrDNA全长序列，具体如下：P0:5’-GAGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’SEQIDNO：2,P6:5’-CTACGGCTACCTTGTTACGA-3’SEQIDNO：3。鉴定方法：①反应体系50μl②反应程序PCR产物用1.0％的琼脂糖凝胶电泳分离检验，电压约11Vcm，电泳时间20min。PCR产物的纯化按上海生工生物技术公司的小量胶回收PCR产物纯化试剂盒说明进行，测序由上海生工生物技术公司完成。获得的细菌16SrDNA序列，在GenBank中进行BLAST比对确定其种属，该菌株16SrDNA序列全长为1381bp,与其同源性最高的菌株是Clostridiumsp.JN500901GenBank登录号MG753792.1，相似性为99％；16SrDNA序列见SEQIDNO：1。实施例3菌株CGMCC17037的生理生化特性将CGMCC17037接种于分离培养基，37℃厌氧培养3天后，通过透射电子显微镜TransmissionElectronMicroscope，TEM和扫描电子显微镜ScanningElectronMicroscope，SEM观察该菌株的细胞形态。将CGMCC17037接种于液态发酵培养基，通过测定培养液OD600，检测该菌株适宜生长的温度和pH范围，以及其对酒精和氯化钠的耐受范围，并通过BiologAN微孔板试验分析该菌株可利用的碳源。菌株CGMCC17037的上述特征如表2所示。表2菌株CGMCC17037的生理生化特性实施例4菌株CGMCC17037产短链脂肪酸实验将菌株CGMCC17037以5％接种量接种于含有20mL的种子培养基中，厌氧条件N2﹕CO2﹕H2＝8﹕1﹕1下于37℃静置培养2天后以5％接种量转接于发酵培养基中，厌氧条件下于37℃静置培养7天后，通过HPLC测定其发酵液中的短链脂肪酸的组成。种子培养基：乙酸钠5gL,酵母膏1gL,磷酸氢二钾0.4gL，硫酸铵0.5gL，硫酸镁0.2gL,硫酸钙0.1gL，乙醇2％，L-半胱氨酸盐酸盐0.5gL，pH5.0，121℃下灭菌20min。发酵培养基：乙酸钠5gL,酵母膏1gL,磷酸氢二钾0.4gL，硫酸铵0.5gL，硫酸镁0.2gL,硫酸钙0.1gL，乙醇0～10％，L-半胱氨酸盐酸盐0.5gL，pH5.0，121℃下灭菌20min。按照上述实施例1中所述的HPLC检测方法，分析该菌株发酵液短链脂肪酸的产量，结果如表3所示。表3短链脂肪酸的产量菌株乙酸gL丁酸gL戊酸gL己酸gLCGMCC170370.87±0.110.88±0.051.95±0.130.63±0.03实施例5生产4-甲基苯酚实验将菌株CGMCC17037接种于添加L-酪氨酸的发酵培养基中，研究L-酪氨酸浓度对该菌株产4-甲基苯酚的影响。将菌株CGMCC17037以5％接种量接种于含有100mL发酵培养基的250mL锥形瓶中。生产4-甲基苯酚的发酵培养基的配方为：葡萄糖5gL，胰蛋白胨10gL，酵母粉3gL，牛肉膏10gL，氯化钠3gL，无水乙酸钠3gL，L-半胱氨酸盐酸盐0.5gL，可溶性淀粉1gL，FeCl2·4H2O1.50gL，CuCl2·2H2O2.00mgL，D+-生物素20.00mgL，pH5.0。并添加不同浓度L-酪氨酸0、10、50、100、200和400mgL于发酵培养基中，于37℃按上述小试厌氧条件静置培养7天。以4-甲基苯酚为外标绘制标准曲线，按照上述HS-SPMEGC-MS方法，检测发酵液中的4-甲基苯酚含量，结果如表4所示。表4L-酪氨酸添加量对菌株CGMCC17037发酵液中4-甲基苯酚产量影响实施例6流加发酵生产4-甲基苯酚实验将菌株CGMCC17037以5％接种量接种于含有400mL的产4-甲基苯酚的发酵培养基的1L厌氧发酵罐中，并在发酵培养基中加入400mgL的L-酪氨酸。生产4-甲基苯酚的发酵培养基的配方为：葡萄糖5gL，胰蛋白胨10gL，酵母粉3gL，牛肉膏10gL，氯化钠3gL，无水乙酸钠3gL，L-半胱氨酸盐酸盐0.5gL，可溶性淀粉1gL，FeCl2·4H2O1.50gL，CuCl2·2H2O2.00mgL，D+-生物素20.00mgL，pH5.0。发酵方式为恒化发酵，流加速度为0.1mLmin，转速设置为200rmin，温度37℃，并以99.99％的高纯氮气为保护气体，厌氧发酵10天。以4-甲基苯酚为外标绘制标准曲线，按照上述HS-SPMEGC-MS方法，检测发酵液中的4-甲基苯酚含量可达81.11mgL。序列表泸州品创科技有限公司江南大学老窖梭状芽孢杆菌及其用途A190170K3SIPOSequenceListing1.011381DNA人工序列ArtificialSequence1tgcaagtcgagcgagagaaatcttcggggatggatctagcggcggacgggtgagtaacac60gtgggcaacctgcctcaaagagggggatagcctcccgaaagggagattaataccgcataa120tgttgttttactgcatagtaaagcaacctaaggagtaatccactttgagatgggcccgcg180ccgcattagttagttggtggggtaacggctcaccaaggcgacgatgcgtagccgacctga240gagggtgatcggccacattggaactgagagacggtccagactcctacgggaggcagcagt300ggggaatattgcacaatgggcggaagcctgatgcagcaacgccgcgtgggtgatgaaggt360tttcggattgtaaagccctgtcttttgggacgataatgacggtaccaaaggaggaagcca420cggctaactacgtgccagcagccgcggtaatacgtaggtggcgagcgttgtccggattta480ctgggcgtaaagggtgcgtaggcggatatttaagtgggatgtgaaaaccccgggcttaac540ccggggactgcatttcaaactggatatctggagtgcaggagaggaaagcggaattcctag600tgtagcggtgaaatgcgtagagattaggaagaacaccagtggcgaaggcggctttctgga660ctgtaactgacgctgaggcacgaaagcgtgggtagcaaacaggattagataccctggtag720tccacgccgtaaacgatgagtactaggtgtaggaggtatcgaccccttctgtgccgcagt780aaacgcaataagtactccgcctgggaagtacgatcgcaagattaaaactcaaaggaattg840acgggggcccgcacaagcagcggagcatgtggtttaattcgaagcaacgcgaagaacctt900acctagacttgacatcccctgaattacctgtaattagggaagccctccggggcagggaga960caggtggtgcatggttgtcgtcagctcgtgtcgtgagatgttaggttaagtcctgcaacg1020agcgcaacccctatcattagttgctaccattaagttgagcactctagtgagactgcccgg1080gtcaaccgggaggaagtctggggatgacgtcaaatcatcatgccccttatgtctagggct1140acagcgctgctacaatggtgaatacagagagatgcaaacccgcaagggtgagccaaactt1200taaaattcacctcagttcggattgcaggctgaaacccgcctgcatgaagctggagttgct1260agtaatcgcgaatcagaatgtcgcggtgaatgcgttcccgggccttgtacacaccgcccg1320tcacaccatgagagttggcaacacccgaagtccgtggggtaaccgtaaggaaccagcggc1380c1381221DNA人工序列ArtificialSequence2gagagtttgatcctggctcag21320DNA人工序列ArtificialSequence3ctacggctaccttgttacga20

权利要求：1.老窖梭状芽孢杆菌Clostridiumfermenticellae，可代谢产生短链脂肪酸和4-甲基苯酚。2.如权利要求1所述老窖梭状芽孢杆菌，其特征在于，所述短链脂肪酸为乙酸、丁酸、戊酸或己酸中的至少一种。3.如权利要求2所述老窖梭状芽孢杆菌，其特征在于保藏编号为：CGMCC17037。4.如权利要求3所述老窖梭状芽孢杆菌，其特征在于其16SrDNA序列如SEQIDNO.l所示。5.权利要求1～4任一项所述的老窖梭状芽孢杆菌在制备短链脂肪酸和或4-甲基苯酚中的用途。6.使用权利要求1～4任一项所述的老窖梭状芽孢杆菌制备短链脂肪酸或4-甲基苯酚的方法，其特征在于，将产4-甲基苯酚培养基或产短链脂肪酸培养基灭菌后，接种所述的老窖梭状芽孢杆菌，在厌氧条件下发酵培养即得4-甲基苯酚或短链脂肪酸。7.如权利要求6所述的方法，其特征在于符合以下至少一项：所述方法中厌氧条件为N2﹕CO2﹕H2＝8～10﹕0～1﹕0～1；或所述方法中的培养条件为20～40℃静置培养；或接种的菌株量为按体积比2％～5％。8.如权利要求6或7任一项的方法，其特征在于：所述的产4-甲基苯酚培养基的配方为葡萄糖2～5gL，胰蛋白胨5～10gL，酵母粉1～5gL，牛肉膏5～10gL，氯化钠1～5gL，无水乙酸钠1～5gL，L-半胱氨酸盐酸盐0.50.5gL，可溶性淀粉1～3gL，FeCl2·4H2O0～3gL，CuCl2·2H2O2.0mgL，D+-生物素0～40mgL，pH4.5～8；优选的，所述的产4-甲基苯酚培养基的配方为：葡萄糖5gL，胰蛋白胨10gL，酵母粉3gL，牛肉膏10gL，氯化钠3gL，无水乙酸钠3gL，L-半胱氨酸盐酸盐0.5gL，可溶性淀粉1gL，FeCl2·4H2O1.50gL，CuCl2·2H2O2.00mgL，D+-生物素20.00mgL，pH5.0；优选的，所述的产4-甲基苯酚培养基中还添加有L-酪氨酸；优选的，所述的产4-甲基苯酚培养基中L-酪氨酸的添加量为10～400mgL。9.如权利要求6～8任一项所述的方法，其特征在于：所述的产短链脂肪酸培养基的配方为：乙酸钠3～5gL,酵母膏1～5gL,磷酸氢二钾0.1～1gL，硫酸铵0.2～1gL，硫酸镁0.1～0.5gL,硫酸钙0～0.5gL，乙醇0～10％，L-半胱氨酸盐0.5gL，pH4.5～8；优选的，所述的产短链脂肪酸培养基的配方为乙酸钠5gL,酵母膏1gL,磷酸氢二钾0.4gL，硫酸铵0.5gL，硫酸镁0.2gL,硫酸钙0.1gL，乙醇0～10％，L-半胱氨酸盐酸盐0.5gL，pH5.0。

百度查询： 泸州品创科技有限公司 江南大学 老窖梭状芽孢杆菌及其用途