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申请/专利权人：新乡医学院
申请日：2018-12-25
公开（公告）日：2022-04-26
公开（公告）号：CN109609539B
专利技术分类：.....用于酵母[2006.01]
专利摘要：本发明属于多肽制备方法技术领域，具体涉及一种从重组毕赤酵母中制备ELABELA多肽的方法。合成编码ELABELA多肽的SEQIDNO.1所示DNA序列，并将这段DNA序列克隆到毕赤酵母表达载体pGAPHαA上，得到重组表达载体pGAPHαA‑ELABELA；然后将重组表达载体pGAPHαA‑ELABELA整合到毕赤酵母染色体中，构建出能够表达ELABELA多肽的重组毕赤酵母；利用重组毕赤酵母表达外源的ELABELA多肽，提取并纯化ELABELA多肽，得到ELABELA多肽。本发明在生物体内制备的纯天然状态多肽，无需化学合成法中采用的二甲基甲酰胺和二氯甲烷等多种有毒有害试剂。
专利权项：1.一种从重组毕赤酵母中制备ELABELA多肽的方法，其特征在于，合成一段编码ELABELA多肽的SEQIDNO.1所示DNA序列，并将这段DNA序列克隆到毕赤酵母表达载体pGAPHαA上，得到重组表达载体pGAPHαA-ELABELA；然后将构建好的重组表达载体pGAPHαA-ELABELA通过转化到毕赤酵母中，构建出能够表达ELABELA多肽的重组毕赤酵母；利用重组毕赤酵母表达外源的ELABELA多肽，并将其分泌到酵母培养液上清中，将酵母培养液上清中的ELABELA多肽提取纯化，得到ELABELA多肽；所述毕赤酵母表达载体pGAPHαA是在商业化载体pGAPZαA基础上改进得到的，采用潮霉素抗性基因替代了原始pGAPZαA上的zeocin抗性基因。
百度查询： 新乡医学院 一种从重组毕赤酵母中制备ELABELA多肽的方法
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