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一种同时测定CAH六种相关类固醇激素的方法 

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申请/专利权人:普宁市人民医院

摘要:本发明涉及先天性肾上腺皮质增生症筛查领域,具体涉及一种同时测定CAH六种相关类固醇激素的方法。所述六种相关类固醇激素为17α‑羟孕酮、雄烯二酮、11‑脱氧皮质醇、21‑脱氧皮质醇、皮质醇和皮质酮;测定方法包括以下步骤:步骤S1:分别制备混合内标准品、质控品和标准曲线制品;步骤S2:制备样本提取液;步骤S3:提取和孵育样本;步骤S4:浓缩复溶样本;步骤S5:用液相色谱串联质谱仪对复溶液进行测定,绘制校准曲线,计算待测样本中17α‑羟孕酮、雄烯二酮、11‑脱氧皮质醇、21‑脱氧皮质醇、皮质醇和皮质酮的浓度。本发明能够有效提高CAH筛查的特异性和阳性预测值。检测分析物中包含皮质酮,使得CAH筛查更有效的区分11‑OHD和21‑OHD,提高CAH筛查效率。

主权项:1.一种同时测定CAH六种相关类固醇激素的方法,所述六种相关类固醇激素为17α-羟孕酮、雄烯二酮、11-脱氧皮质醇、21-脱氧皮质醇、皮质醇和皮质酮;其特征在于,包括以下步骤:步骤S1:分别制备混合内标准品、质控品和标准曲线制品:所述混合内标准品为17α-羟孕酮同位素内标准品、雄烯二酮同位素内标准品、11-脱氧皮质醇同位素内标准品、21-脱氧皮质醇同位素内标准品、皮质醇同位素内标准品和皮质酮同位素内标准品的混合物;所述质控品为含有已知浓度的17α-羟孕酮、雄烯二酮、11-脱氧皮质醇、21-脱氧皮质醇、皮质醇和皮质酮六种类固醇激素的人全血滤纸干血片;所述标准曲线制品为含有已知系列浓度的17α-羟孕酮、雄烯二酮、11-脱氧皮质醇、21-脱氧皮质醇、皮质醇和皮质酮六种类固醇激素的人全血滤纸干血片;步骤S2:制备样本提取液:在混合内标准品中加入有机溶剂,溶解后稀释;步骤S3:提取和孵育样本:用样本提取液分别提取标准曲线制品以及待测样本,然后进行孵育;步骤S4:浓缩复溶样本:分别对孵育后的上清液进行浓缩后,并加入50%甲醇复溶,得到复溶液;步骤S5:测试:用液相色谱串联质谱仪对复溶液进行测定,绘制校准曲线,计算待测样本中17α-羟孕酮、雄烯二酮、11-脱氧皮质醇、21-脱氧皮质醇、皮质醇和皮质酮的浓度。

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