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一种基于CRISPR-Cas9构建TNF-α-HiBit动物模型的方法 

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申请/专利权人:上海南方模式生物科技股份有限公司;同济大学

摘要:本发明公开了一种构建TNF‑α‑HiBit动物模型的方法,针对TNF‑α基因,运用CRISPR‑Cas9技术以及同源重组修复原理,将HiBit标签序列在TNF‑α基因终止密码子位点上游定点敲入,获得可以跟踪小鼠内源性TNF‑α蛋白水平的基因修饰动物模型。由于这一模型具有反映TNF‑α蛋白水平在体内响应生理和病理信号的真实过程、检测方法简便灵敏和可以在同一活体上反复检测的特点,因此相较于传统动物模型上测试TNF‑α蛋白的方法具有显著的优势。获得的基因修饰动物模型可以应用到和TNF‑α相关的生命科学研究以及药物的研发中。根据动物模型,可进一步获得相应的原代细胞,实现在体外培养的细胞层面上对TNF‑α蛋白水平进行检测、研究以及相关药物分子的筛选,克服了传统的细胞系不能模拟自然细胞功能的缺陷。

主权项:1.一种DNA片段TNF-α-HiBit,其特征在于,包含TNF-α基因同源序列和HiBit标签序列,其核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。

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