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摘要:本发明公开了一种自身免疫GFAP星形细胞病兔动物模型的构建方法,包括以下步骤:1取用GFAP蛋白,并用2MUrea,PBS,pH=8.5稀释为1mgmL,继续取用等体积的完全弗氏佐剂,使用匀浆机在冰上混匀,直至乳化完全,制得首次免疫制剂;取用GFAP蛋白,并用2MUrea,PBS,pH=8.5稀释为1mgmL,继续取用等体积的不完全弗氏佐剂,使用匀浆机在冰上混匀,直至乳化完全,制得加强免疫制剂;2通过脊柱旁皮下注射方式,在兔子脊柱两侧分8点标准皮下注射所述首次免疫制剂,每点0.1ml,完成首次免疫;3每间隔两周,通过脊柱旁皮下注射的方式,在兔子脊柱两侧分8点标准皮下注射所述加强免疫制剂,每点0.1ml,进行加强免疫,共需三次加强免疫,构建自身免疫GFAP星形细胞病兔动物模型。
主权项:1.一种自身免疫GFAP星形细胞病兔动物模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:1)取用GFAP蛋白,并用2MUrea,PBS,pH=8.5稀释为1mgmL,继续取用等体积的完全弗氏佐剂,使用匀浆机在冰上混匀,直至乳化完全,制得首次免疫制剂;取用GFAP蛋白,并用2MUrea,PBS,pH=8.5稀释为1mgmL,继续取用等体积的不完全弗氏佐剂,使用匀浆机在冰上混匀,直至乳化完全,制得加强免疫制剂;2)通过脊柱旁皮下注射方式,在兔子脊柱两侧分8点标准皮下注射所述首次免疫制剂,每点0.1ml,完成首次免疫,所述首次免疫制剂的注射量为800μg,所述首次免疫制剂浓度为0.5mgmL;3)每间隔两周,通过脊柱旁皮下注射的方式,在兔子脊柱两侧分8点标准皮下注射所述加强免疫制剂,每点0.1ml,进行加强免疫,共需三次加强免疫,构建自身免疫GFAP星形细胞病兔动物模型,所述加强免疫制剂的注射量为400μg,所述加强免疫制剂浓度为0.5mgmL;待病兔动物模型构建完成后,进行临床评分、磁共振检查、脑电图检查、其他项检查,其中磁共振检查为使用扫描机对试验组兔先进行三平面定位图扫描,然后进行序列扫描,经确认兔子脑部出现病灶后进行磁共振波谱分析检查;所述脑电图检查为使用脑电图仪对试验组兔进行脑电图检查;所述其他项检查为对试验组兔采用常规检验方案分别采用ELISA、TBA、CBA检查方法进行检查,分别提供GFAP模型兔脑脊液GFAP抗体图及脑部炎症细胞图。
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百度查询: 广州医科大学附属第二医院 一种自身免疫GFAP星形细胞病兔动物模型的构建方法
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