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摘要:本公开提供一种基于Cre‑Loxp条件性敲除基因建立脑早衰小鼠模型的打靶载体、试剂盒、方法及应用。具体地,基于Cre‑Loxp条件性敲除基因建立脑早衰小鼠模型的打靶载体包括部分GDF11基因序列和两个Loxp位点;其中,两个Loxp位点分别位于GDF11基因中第二外显子的上下游,接着通过CRISPRCas9的技术方案获得floxp小鼠,通过floxp小鼠与CaMKIIα‑Cre小鼠杂交后获得了兴奋性神经元GDF11基因特异性敲除的小鼠,简称GDF11cKO小鼠,通过衰老相关的β半乳糖苷酶染色,基于实验结果首次发现兴奋性神经元的GDF11特异性敲除后,促进脑组织的特定脑区颞叶和梨状皮层加速衰老,为研究抗衰老提供了有利的工具。
主权项:1.基于Cre-Loxp条件性敲除基因建立脑早衰的小鼠模型在筛查治疗或者预防脑组织衰老的药物中的应用,其中,建立脑早衰的小鼠模型的方法包括如下步骤:构建条件性敲除GDF11基因的打靶载体;所述打靶载体的序列包括如SEQIDNO.3所示的序列;通过CRISPRCas9技术,利用所述打靶载体构建条件性敲除GDF11基因的floxp小鼠;采用条件性敲除GDF11基因的floxp小鼠和CaMKⅡα-Cre工具鼠,构建特异性敲除GDF11基因的小鼠模型。
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百度查询: 浙江大学 基于Cre-Loxp条件性敲除基因建立脑早衰小鼠模型的打靶载体、试剂盒、方法及应用
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