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申请/专利权人：浙江工业大学
摘要：本发明公开了一种靶向识别切割多耐药基因的工程菌及其构建方法与应用，所述工程菌是以益生菌EcN为底盘菌，整合I‑E型CRISPR‑Cas系统：编码Cas3蛋白的基因和编码Cascade蛋白复合体的cas操纵子在基因组上由阿拉伯糖诱导启动子PBAD表达，靶向识别多耐药基因的CRISPRCRMNT在质粒上通过启动子PJ23100表达；本发明构建的EcN工程菌可同时靶向消减多个耐药基因，进一步提高了作为底盘菌的安全性与可操作性，不仅有助于提高活菌药物的生物安全性，而且在生产代谢中可作为优良的菌株生产各种产品如维生素、蛋白质和氨基酸等，为新药开发和工业生产带来巨大的应用价值。
主权项：1.一种靶向识别切割多耐药基因的EcN工程菌，其特征在于，所述工程菌是以E.coliNissle1917为底盘菌EcN，整合I-E型CRISPR-Cas系统；所述I-E型CRISPRCas系统由具有核酸酶功能的Cas3蛋白编码基因cas3和可与CRISPRRNA结合的Cascade蛋白复合体编码基因cas操纵子以及可表达沉默耐药基因crRNA的DNA序列CRMNT三部分组成；所述cas3和cas操纵子由阿拉伯糖诱导启动子PBAD表达，所述CRMNT通过启动子PJ23100表达；所述CRMNT由可变的间隔序列和保守序列组成，所述可变的间隔序列是指所要靶向的耐药基因同源片段。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 浙江工业大学 一种靶向识别切割多耐药基因的EcN工程菌及其构建方法与应用
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