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申请/专利权人：浙江大学
摘要：本发明公开了一种利用Cpf1非滞留端提高基因敲进效率和精准度的方法，利用单个或配对Cpf1产生游离的靶点DNA末端和游离的供体DNA末端，联合Cpf1产生的可以互补的5’‑黏性末端，实现基于c‑NHEJ的更高效、更精准的基因敲进；本发明方法能够更高效、更精准地进行NHEJ修复，效率可以提高近两倍，而精准度可以从0％提高到100％。本发明利用Cpf1的游离端会被NHEJ核心因子KU70KU80结合与保护，从而通过NHEJ的连接更高效、更精准，为利用Cpf1的游离端提高基于NHEJ的基因敲进效率和精准度奠定基础，实现基因敲入或基因校正，且适用于不分裂细胞。
主权项：1.一种利用Cpf1非滞留端提高基因敲进效率和精准度的方法，其特征在于，所述方法为：利用单个或配对Cpf1产生游离的靶点DNA末端和游离的供体DNA末端，联合Cpf1产生的可以互补的5’-黏性末端，实现基于c-NHEJ的更高效、更精准的基因敲进；如果需要提高目的基因敲进受体基因组一端的效率和精准度，则受体基因组靶点切割后连接精准度要求高的一端为游离端，至少确保供体靶点切割后的需要对应连接的一端为游离端，供体的游离端与受体基因组精准度要求高的游离端互补连接；如果需要提高目的基因敲进受体基因组两端的效率和精准度，供体靶点切割后的两端与受体基因组切割后的对应两端均为互补游离端，此时供体和受体基因组切割都需要配对Cpf1。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 浙江大学 利用Cpf1非滞留端提高基因敲进效率和精准度的方法
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