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α-SNAP基因稳定低表达的KGN人卵巢颗粒细胞株制备方法 

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申请/专利权人:覃颖

摘要:α‑SNAP基因稳定低表达的KGN人卵巢颗粒细胞株制备方法,其特征在于,以KGN人卵巢颗粒细胞为基础细胞,用载有α‑SNAPsiRNA的慢病毒转染KGN人卵巢颗粒细胞,构建了α‑SNAP基因稳定低表达的KGN人卵巢颗粒细胞株,其中α‑SNAPsiRNA融合慢病毒表达载体hU6‑MCS‑Ubiquitin‑EGFP‑IRES‑puromycin,设计靶点序列:gtATCAGAAGGCCATTGACAT,对照插入序列:TTCTCCGAACGTGTCACGT;本发明中构建了一种新型的α‑SNAP基因稳定低表达的稳定的人卵巢颗粒细胞株,该细胞株的特点是其pPTEN,PI3K,pAkt,pmTOR的表达量降低,即PTENPI3KAktmTORC1信号通路被负向调控,而FSHR表达量增高,表明α‑SNAP基因稳定低表达颗粒细胞株可以作为PTENPI3KAktmTORC1信号通路负向调控的颗粒细胞模型,用于PTENPI3KAktmTORC1信号通路与人卵巢颗粒细胞生长、分化等关联作用机制的研究。

主权项:1.α-SNAP基因稳定低表达的KGN人卵巢颗粒细胞株制备方法,其特征在于:以KGN人卵巢颗粒细胞为基础细胞,用载有α-SNAPsiRNA的慢病毒转染KGN人卵巢颗粒细胞,构建了α-SNAP基因稳定低表达的KGN人卵巢颗粒细胞株,其中α-SNAPsiRNA融合慢病毒表达载体hU6-MCS-Ubiquitin-EGFP-IRES-puromycin,设计靶点序列:gtATCAGAAGGCCATTGACAT,对照插入序列:TTCTCCGAACGTGTCACGT。

全文数据:

权利要求:

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