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一种特异性检测5hmC的方法 

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申请/专利权人:上海鲸舟基因科技有限公司

摘要:本发明提供了一种特异性检测5hmC的方法,具体地,本发明的方法包括如下步骤:a提供一待测样本,将样本中的DNA打断,从而得到片段化DNA,所述片段化DNA含有碱基C、5mC和5hmC;b用β‑葡糖基转移酶处理所述片段化DNA,从而获得第一产物,所述第一产物包括带有β‑葡糖基的5hmC;c用胞嘧啶脱氨酶处理所述第一产物,将第一产物中的C与5mC脱氨基,转换为碱基U,从而获得第二产物,所述第二产物中的5hmC不转换为碱基U;d将所述第二产物进行扩增,碱基U转换为T之后对所述扩增产物进行检测;e分析步骤(d)获得的检测数据,从而特异性检测5hmC,非常具有应用前景。

主权项:1.一种特异性检测5hmC的方法,其特征在于,所述方法包括步骤:a提供一待测样本,将样本中的DNA打断,从而得到片段化DNA,所述片段化DNA含有碱基C、5mC(5-甲基胞嘧啶-)和5hmC(5-羟甲基胞嘧啶);b用β-葡糖基转移酶处理所述片段化DNA,从而获得第一产物,所述第一产物包括带有β-葡糖基的5hmC;c用胞嘧啶脱氨酶处理所述第一产物,将第一产物中的C与5mC脱氨基,转换为碱基U,从而获得第二产物,所述第二产物中的5hmC不转换为碱基U;d将所述第二产物进行扩增,碱基U转换为T之后对所述扩增产物进行检测;e分析步骤(d)获得的检测数据,从而特异性检测5hmC;所述胞嘧啶脱氨酶来自NEB(NEBNext®EnzymaticMethyl-seqKit)试剂盒中的胞嘧啶脱氨酶,在步骤(d)中,用以下技术进行检测:基因芯片。

全文数据:

权利要求:

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