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一种鲑鱼促性腺激素释放激素类似物中L-精氨酸残留量的柱前手性衍生测定方法 

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申请/专利权人:宁波第二激素厂

摘要:本发明涉及一种利用普通C18柱反相HPLC进行人工合成的鲑鱼促性腺激素释放激素类似物中L‑精氨酸残留量的检测的柱前手性衍生测定方法,包括样品前处理和液相检测,样品前处理中,对照品DL‑精氨酸及D‑精氨酸中加入衍生剂处理;供试品是鲑鱼促性腺激素释放激素类似物水解制备得到后加入衍生剂处理;所述的衍生剂是1%Nα‑2,4‑二硝基‑5‑氟苯基‑L‑丙氨酰胺的丙酮溶液并加入0.5molLNaHCO3溶液作为缚酸剂。本发明能有效区分D‑精氨酸和L‑精氨酸,解决了普通液相D‑精氨酸和L‑精氨酸在同一位置流出无法区分且无足够紫外检测信号的问题,也解决了其他杂峰干扰,建立了人工合成的鲑鱼促性腺激素释放激素类似物中L‑精氨酸残留量检测的柱前手性衍生测定方法。

主权项:1.一种鲑鱼促性腺激素释放激素类似物中L-精氨酸残留量的测定方法,包括样品前处理和液相检测,其特征在于,样品前处理中,对照品DL-精氨酸及D-精氨酸中加入衍生剂处理;鲑鱼促性腺激素释放激素类似物水解制备得到供试品后加入衍生剂处理;所述的衍生剂是1%Nα-2,4-二硝基-5-氟苯基-L-丙氨酰胺的丙酮溶液并加入0.5molLNaHCO3溶液作为缚酸剂;其中所述的DL-精氨酸和衍生剂的浓度比在1:1.5;所述的鲑鱼促性腺激素释放激素类似物是Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Arg-Trp-Leu-Pro-NHEt;所述的液相检测时的液相条件:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,流动相是甲醇:水=40:60,柱温35℃,流速为每分钟1.0ml,检测波长340nm,进样量50μl;所述的供试品的制备:称取鲑鱼促性腺激素释放激素类似物适量,用6molL的盐酸溶液溶解并稀释置2ml安瓿中,一边旋转一边抽尽安瓿内的空气,并火焰熔封,把熔封后的安瓿置恒温干燥箱中,110℃水解4h,取出安瓿,放冷后即得衍生前供试品。

全文数据:

权利要求:

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