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申请/专利权人：北京利德曼生化股份有限公司

摘要：本发明公开了一种快速定量检测全血中cTnI的微流控荧光免疫芯片，属于免疫分析领域。该芯片包括示踪试剂和捕捉试剂；其中，所述示踪试剂包括花菁染料Cy5标记的cTnI单克隆抗体和质控物；所述捕获试剂含有cTnI单克隆抗体和质控物单克隆抗体。该芯片通过示踪抗体标记血液中的cTnI抗原，形成免疫复合物，被捕捉抗体捕捉，在激发光的激发下发光。具有较高的灵敏度、特异性和较宽的检测范围，能够用来评价患者cTnI水平，提示急性心肌梗塞。

主权项：1.一种快速定量检测全血中cTnI的微流控荧光免疫芯片，包括中心板和底板，所述中心板和所述底板围绕此凹部彼此相叠的区域通过激光焊接来直接地并且以流体密封方式彼此结合，样本流道与测量格呈流体接触并且在所述样本流道上设有用于溶解示踪试剂的示踪区、两个样本混合区域、液体检测监控区域、样本流道端部有样本废料区域，在测量格对应位置的中心板上设置捕获区；其特征在于，所述芯片示踪区预先封装示踪试剂，所述示踪试剂包括用荧光激发波长为610-660nm的荧光染料标记的cTnI单克隆抗体和用荧光激发波长为610-660nm的荧光染料标记的质控物；捕获试剂包括cTnI单克隆抗体和质控物单克隆抗体；所述荧光染料为Cy5花菁染料；所述示踪试剂通过使用高精度点样仪，均匀的将示踪试剂喷涂在芯片的示踪区，形成两条平行的直线，示踪剂体积为6μL；所述示踪区Cy5系列花菁染料标记的cTnI单克隆抗体浓度为1.0μgmL；所述示踪区质控物浓度为0.50μgmL；所述捕获试剂通过使用高精度点样仪，以每滴400pL的液滴喷在芯片的捕获区内，喷点形成5个等间距的6*7矩形点阵，喷点不相互重合；捕获区cTnI单克隆抗体的浓度为1.2mgmL；所述捕获区质控物单克隆抗体的浓度为1mgmL；所述芯片与ResponseIQ联用；示踪试剂还包括动物蛋白、动物血清、表面活性剂、异噬性抗体阻断剂、防腐剂和缓冲液；动物蛋白为质量百分比浓度为0.5％的牛血清白蛋白；动物血清为马血清；表面活性剂为质量百分比浓度为0.02％的Tween20；异嗜性抗体阻断剂浓度为30μgmL；防腐剂为质量百分比浓度为0.1％的叠氮化钠；缓冲液为pH为7.2的PBS缓冲液；芯片最小检测限不高于0.01ngmL，检测范围为0.01～25ngmL，对非cTnI的交叉物的加样回收率均小于5.0％；芯片检测样本的体积为50μL，检测时间为10min，批内变异系数小于±10％，批间变异系数小于±15％。

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