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一种病毒诱导的沉默益母草基因的方法 

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申请/专利权人:上海辰山植物园

摘要:本发明涉及基于VIGS的高效益母草基因沉默方法,本发明包括以下步骤:1、构建pTRV2‑目标基因重组质粒,并转入农杆菌GV3101,得到转入重组质粒的阳性农杆菌;2、利用转入重组质粒的阳性农杆菌制备VIGS转化菌液,并将VIGS转化菌液注入苗龄为第一对真叶完全展开的益母草幼苗叶片;3、将注射好的益母草幼苗弱光培养2天后,置于植物生长室正常培养。本发明首次将VIGS基因沉默技术在益母草中实际应用,建立了一套高效的益母草基因沉默体系,可在短时间内高效沉默植物的目的基因,操作简便、高效,实验周期短且成本低。

主权项:1.一种病毒诱导的沉默益母草基因的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:S1、载体构建:根据益母草八氢番茄红素脱氢酶PDS基因序列构建重组质粒pTRV2-PDS,所述PDS基因序列如SEQIDNO.7所示;S2、农杆菌转化:将pTRV2-PDS和pTRV1空载体分别转入农杆菌感受态细胞,获得阳性农杆菌菌落;S3、农杆菌菌液注射益母草叶片:将阳性农杆菌菌落在加入诱导剂的培养基中培养得到农杆菌菌液,将转有pTRV2-PDS的农杆菌菌液与转有pTRV1的农杆菌菌液混合得到混合菌液,将混合菌液、无菌水、诱导剂配制得到注射液,注射入益母草叶片;所述诱导剂包括MES和As。

全文数据:

权利要求:

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