首页 专利交易 科技果 科技人才 科技服务 国际服务 商标交易 会员权益 IP管家助手 需求市场 关于龙图腾
 /  免费注册
到顶部 到底部
清空 搜索

一种利用子叶在蜡梅中进行VIGS基因沉默的方法 

买专利卖专利找龙图腾,真高效! 查专利查商标用IPTOP,全免费!专利年费监控用IP管家,真方便!

申请/专利权人:华中农业大学

摘要:本发明公开了一种利用子叶在蜡梅中进行VIGS基因沉默的方法,该方法包含:将含有TRV2‑CpCHLD载体的重组质粒转入农杆菌GV3101中,用含有卡那霉素和利福平的LB液体培养基分别对含有TRV2‑CpCHLD或TRV1的农杆菌进行过夜活化培养,之后离心收集菌体,弃上清液后重悬菌体;将TRV2‑CpCHLD重悬菌液与TRV1重悬菌液混合,于室温、避光下静置,最后注入蜡梅子叶、幼叶和成熟叶的背面刻伤处。本发明解决了现有技术未曾在蜡梅中实现VIGS高效基因沉默的问题,首次实现VIGS技术在蜡梅中的应用,用于注射侵染的最佳器官是蜡梅子叶,用于注射侵染的农杆菌菌液最佳OD600为1.2~1.5。

主权项:1.一种利用子叶在蜡梅中进行VIGS基因沉默的方法,其特征在于,该方法包含:1将TRV2-CpCHLD载体转入大肠杆菌的感受态中,挑取阳性菌株,经PCR鉴定,提取含有TRV2-CpCHLD载体的重组质粒,将含有TRV2-CpCHLD载体的重组质粒转入农杆菌GV3101中,得到含有TRV2-CpCHLD的农杆菌GV3101;2将含有TRV1的农杆菌GV3101和TRV2-CpCHLD的农杆菌GV3101分别接种到含卡那霉素和利福平的LB液体培养基上,于28℃、200r·min-1下活化培养,于20℃离心收集菌体,弃上清液后用重悬液重悬菌体,分别得到含有TRV1的重悬菌液和含有TRV2-CpCHLD的重悬菌液;3将含有TRV1的重悬菌液和含有TRV2-CpCHLD的重悬菌液混合,于室温、避光下静置得到注射液;在蜡梅的子叶、幼叶和成熟叶的背面划出伤口,在伤口处将注射液注入,先置于避光、室温下培养,再置于20~25℃培养。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 华中农业大学 一种利用子叶在蜡梅中进行VIGS基因沉默的方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息,力求客观、公正,但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解,仅供参考使用,不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

相关技术
相关技术
相关技术
相关技术