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摘要：本发明公开了一种ITGB5条件性基因敲除小鼠模型、构建方法及其应用，属于基因工程技术领域。本发明通过将Cas9mRNA、gRNA和同源重组载体显微注射到C57BL6J小鼠的受精卵中，并将该受精卵移植至假孕小鼠，获得F0代小鼠；将含有打靶序列的F0代小鼠与野生型小鼠杂交，得到含有打靶序列的杂合性小鼠；将得到的含有打靶序列的杂合性小鼠与Vil‑Cre阳性小鼠杂交，得到肠道ITGB5基因敲除动物模型。本发明获得条件性基因敲除ConditionalKnockout，CKO小鼠，为研究ITGB5基因影响肠道对ETECF4ac型细菌的抗性提供了便捷、可靠、经济的动物模型。
主权项：1.一种ITGB5条件性基因敲除小鼠模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：1确定小鼠待敲除基因的靶位点，设计针对ITGB5基因的gRNA，所述gRNA的序列分别如SEQIDNo.1和SEQIDNo.2所示；2构建同源重组载体，所述同源重组载体包括：5’同源臂、flox区域和3’同源臂；3将Cas9mRNA、gRNA和同源重组载体注射到小鼠的受精卵中，取存活的受精卵移植到假孕母鼠体内，产出F0代小鼠，对F0代小鼠进行鉴定；4将阳性的F0代小鼠与野生型小鼠交配获得F1代小鼠，对F1代小鼠进行鉴定；5将步骤4得到的含有打靶序列的杂合性F1代小鼠与Vil-Cre重组酶阳性小鼠杂交获得F2代小鼠，对F2代小鼠进行鉴定，得到ITGB5条件性基因敲除小鼠模型。
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百度查询： 山东农业大学 一种ITGB5条件性基因敲除小鼠模型、构建方法及其应用
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