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一种检测尿液中Calcitroic acid的方法及其应用 

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申请/专利权人:复旦大学附属华山医院;上海国际人类表型组研究院

摘要:本发明涉及体外诊断技术领域,具体涉及一种检测尿液中Calcitroicacid的方法及其应用。所述的检测方法包括:待测样本预处理;样本处理;绘制校准曲线:结果分析。本发明提供的优点:填补了Calcitroicacid定量方法的空白。检测时间短,具有特异性高、高通量、灵敏度高、抗干扰能力强、重现性好。试剂廉价易得;方法简单,利于推广。为Calcitroicacid在尿液中产生的机理研究奠定了方法学上的基础,并且为不同疾病模型当中生物标志物的研究提供了可靠的技术支撑。

主权项:1.一种非诊断目的的检测尿液中Calcitroicacid的方法,其特征在于,检测方法包括:S101待测样本:新鲜采集的人尿液样本;S102样本处理:S201,室温条件下,分别移取相同体积的系列浓度的标准品溶液、经预处理后的待测样本,分别加入内标溶液和方法稳定剂,充分混匀,所述内标为稳定同位素标记的雌酮;所述方法稳定剂为50%甲醇-水溶液配制的1.2-二甲基-3-羟基-4-吡啶酮,浓度为50~150mM;S202,往步骤S201处理后的所有样品中分别加入乙腈或甲醇溶液进行蛋白沉淀;S203,往步骤S202处理后的所有样品中分别加入0.5%~5%的甲酸-水溶液进行稀释后离心;S204,将步骤S203处理后的所有样品上清液通过活化的固相萃取板进行萃取分离并洗脱,氮吹至干;S205,往所有氮吹干后的样品中加入甲醇-水溶液复溶;S206,取复溶的样品上清液进行液相色谱-串联质谱分析;S103绘制校准曲线:通过各标准品标示浓度X,系列标准品与内标的峰面积比值Y,绘制校准曲线并拟合校准曲线方程;S104结果分析:分别将待检测人尿液样本中Calcitroicacid与内标峰面积比值代入校准曲线方程,计算待检测样本人尿液样本中Calcitroicacid的浓度。

全文数据:

权利要求:

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