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申请/专利权人：南京师范大学
摘要：本发明公开了一种检测革兰氏阴性菌的分子印迹荧光纳米粒子及其制备方法，属于分析化学领域，涉及革兰氏阴性菌的分析检测和分子印迹聚合物的合成。所述分子印迹荧光纳米粒子能够特异性识别革兰氏阴性菌比如大肠杆菌O157:H7和荧光假单胞菌，并能够通过荧光信号变化进行细菌的定量分析。所述合成方法包括以下步骤：首先将模板菌液与功能单体和荧光单体预组装，然后依次加入交联剂、引发剂进行聚合反应；反应完毕后，将聚合的纳米粒子从模板上去除，即得该菌的分子印迹荧光纳米粒子。本发明采用一锅法搅拌的方式制备革兰氏阴性菌的分子印迹荧光纳米粒子，操作简单，所得分子印迹荧光纳米粒子能够特异性快速识别革兰氏阴性菌。
主权项：1.一种检测革兰氏阴性菌的分子印迹荧光纳米粒子的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一.将浓度为106-108CFUmL的模板菌加入溶液中，再加入浓度为4.7-9.4µmolmL功能单体和浓度为0.1-0.4µmolmL的荧光单体进行预组装，获得分子印迹预聚液，所述模板菌为革兰氏阴性菌，其中，所述模板菌为大肠杆菌O157:H7或荧光假单胞菌，功能单体为苯硼酸硅烷化试剂，通过醛基苯硼酸和氨基硅烷化试剂按照摩尔比1:1在乙醇中一步反应获得；荧光单体可以通过含有异氰酸酯或异硫氰酸酯的荧光染料和氨基硅烷化试剂按照摩尔比1:1在乙醇中一步反应获得，所得功能单体和荧光单体无需纯化；步骤二.向步骤一制备的分子印迹预聚液中依次加入浓度为100~1000mM交联剂和质量浓度2-10%引发剂，搅拌聚合溶液，生成分子印迹荧光纳米粒子，这些纳米粒子吸附在模板菌表面，其中，交联剂为四乙氧基硅烷或四甲氧基硅烷，所述引发剂为氨水；步骤三.用洗脱溶液去除步骤二中的模板菌，得到能够特异性识别目标细菌的分子印迹荧光纳米粒子。
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权利要求：
百度查询： 南京师范大学 一种检测革兰氏阴性菌的分子印迹荧光纳米粒子及其制备方法
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