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一种猫皮屑过敏原组分feld1双链二聚体重组蛋白、制备方法及应用 

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申请/专利权人:山东立菲生物产业有限公司

摘要:本申请涉及重组蛋白技术领域,具体公开了一种猫皮屑过敏原组分feld1双链二聚体重组蛋白、制备方法及应用。先调取合成feld1ch1,ch2和Linker基因序列,再融合连接PCR,之后以质粒pcDNA3.1+为载体构建表达载体,连接产物加入到TOP10感受态细胞中培养,收取菌体,提取质粒,基因转染HEK293细胞,表达,纯化,ELISA效价。本申请方法把复杂的天然提取变为快速,简洁,稳定的重组表达,并且获得与天然构象十分相似的目标蛋白,提高了过敏原的检测准确性。

主权项:1.一种猫皮屑过敏原组分feld1双链二聚体重组蛋白的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)制备串联体目标片段a、调取合成feld1ch1,ch2和C4bpα,序列分别为SEQIDNO.1、SEQIDNO.2、SEQIDNO.3;b、融合连接PCR,获得ch2-C4bpα-ch1串联体目标片段,序列为SEQIDNO.4;(2)构建表达载体a、扩增酶切位点目标片段;b、pcDNA3.1+质粒双酶切,连接目标片段;(3)蛋白表达连接产物加入到TOP10感受态细胞中培养,收取菌体,提取质粒;(4)ch2-C4bpα-ch1基因转染HEK293细胞,表达,纯化;(5)ELISA效价检测;制备得到猫皮屑过敏原组分feld1双链二聚体重组蛋白,构型是蝴蝶状的双链二聚体。

全文数据:

权利要求:

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