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Otx2基因过表达细胞系及其构建方法 

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申请/专利权人:中信湘雅生殖与遗传专科医院有限公司;湖南光琇高新生命科技有限公司

摘要:本申请提供了一种Otx2基因过表达细胞系及其构建方法。Otx2基因过表达细胞系的构建方法包括以下步骤:构建重组慢病毒表达载体,所述重组慢病毒表达载体包括从5’端至3’端依次为第一LTR、Tet‑ON元件、Otx2基因、剪切元件、筛选基因和第二LTR的核酸片段;对所述重组慢病毒表达载体进行病毒质粒包装,利用所述重组慢病毒表达载体与病毒包装质粒构建Otx2过表达细胞系;经过抗性筛选后得到Otx2过表达细胞系。本申请在构建表达载体时,以重组慢病毒为载体,利用Tet‑ON元件诱导表达载体,将其感染宿主细胞,筛选获得能稳定过表达Otx2基因的细胞系,真实模拟了Otx2在细胞内发挥功能的条件。

主权项:1.一种Otx2基因过表达细胞系的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:构建重组慢病毒表达载体,所述重组慢病毒表达载体包括从5’端至3’端依次为第一LTR、Tet-ON元件、Otx2基因、剪切元件、筛选基因和第二LTR的核酸片段;对所述重组慢病毒表达载体进行病毒质粒包装,利用所述重组慢病毒表达载体与病毒包装质粒构建Otx2过表达细胞系;以及,经过抗性筛选后得到Otx2过表达细胞系。

全文数据:

权利要求:

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